摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩写一览表 | 第10-11页 |
第1章 前言 | 第11-17页 |
1.1 果蝇研究概述 | 第11-13页 |
1.1.1 果蝇胚胎囊胚至原肠胚发育过程 | 第11-12页 |
1.1.2 果蝇胚胎囊胚至原肠胚发育分子机制 | 第12-13页 |
1.2 RyR基因及其CAMR调控基因研究现状 | 第13-15页 |
1.2.1 RyR蛋白分子结构和控制钙离子释放的作用机理 | 第13页 |
1.2.2 RyR蛋白在昆虫中的研究现状 | 第13-14页 |
1.2.3 CAMRs蛋白分子结构和调节钙离子通道开放和闭合的作用机理 | 第14页 |
1.2.4 CAMRs蛋白在昆虫中的研究现状 | 第14-15页 |
1.3 果蝇应激(运动)后心动能力研究现状 | 第15页 |
1.4 本课题的研究目的和意义 | 第15-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-41页 |
2.1 实验材料 | 第17-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 实验仪器 | 第17-18页 |
2.1.3 实验试剂 | 第18页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第18-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-41页 |
2.2.1 果蝇的培养 | 第22-23页 |
2.2.2 果蝇不同发育时期胚胎的收集 | 第23页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR检测RyR基因表达 | 第23-26页 |
2.2.4 果蝇胚胎组织蛋白样品制备和免疫印迹(Western Blot)方法 | 第26-28页 |
2.2.5 果蝇胚胎组织学样品制备和HE染色鉴定 | 第28-30页 |
2.2.6 果蝇RyR基因保守序列与pGEM-Teasy重组质粒构建 | 第30-35页 |
2.2.7 果蝇RyR基因保守序列RNA探针合成 | 第35-36页 |
2.2.8 果蝇胚胎组织学样品原位杂交染色 | 第36-38页 |
2.2.9 果蝇胚胎组织学样品免疫组织化学染色 | 第38页 |
2.2.10 运动对果蝇成虫心功能的影响及检测方法 | 第38-41页 |
第3章 实验结果与分析 | 第41-61页 |
3.1 各发育时期的胚胎数目占收集胚胎数目的比例 | 第41页 |
3.2 RNA和蛋白定量分析 | 第41-45页 |
3.2.1 果蝇不同发育时期胚胎组织总RNA提取结果及RT-PCR扩增 | 第41-43页 |
3.2.2 果蝇RyR基因实时荧光定量PCR分析 | 第43-44页 |
3.2.3 果蝇CAMR2蛋白免疫印迹分析 | 第44-45页 |
3.3 RyR基因在RNA水平的定位表达研究 | 第45-52页 |
3.3.1 重组质粒酶切鉴定结果 | 第45-46页 |
3.3.2 重组质粒测序 | 第46-49页 |
3.3.3 制备探针 | 第49页 |
3.3.4 RyR基因在果蝇不同发育时期胚胎中RNA水平表达定位 | 第49-50页 |
3.3.5 CAMRs基因在果蝇不同发育时期胚胎中RNA水平表达定位结果 | 第50-52页 |
3.4 RyR基因在蛋白水平的定位表达研究 | 第52-57页 |
3.4.1 RyR蛋白在果蝇发育不同时期胚胎免疫组织化学结果分析 | 第53-56页 |
3.4.2 CAMR调控蛋白在果蝇发育不同时期胚胎免疫组织化学结果分析 | 第56-57页 |
3.5 果蝇成虫心管跳动数据分析 | 第57-61页 |
第4章 讨论与结果 | 第61-65页 |
4.1 讨论 | 第61-62页 |
4.2 结果 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第73页 |