| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 雄配子体的发育和结构 | 第11-12页 |
| 1.1.1 雄配子体的发育 | 第11页 |
| 1.1.2 雄配子体的结构 | 第11-12页 |
| 1.2 花粉发育过程中液泡动态变化 | 第12-13页 |
| 1.3 雌配子体的发育和结构 | 第13-15页 |
| 1.3.1 雌配子体的发育 | 第13-14页 |
| 1.3.1.1 大孢子的发生 | 第13-14页 |
| 1.3.1.2 雌配子的形成 | 第14页 |
| 1.3.2 雌配子体的结构 | 第14-15页 |
| 1.4 花粉管的接纳 | 第15-17页 |
| 1.5 适配蛋白的类型、结构和功能 | 第17-20页 |
| 1.5.1 适配蛋白的类型 | 第17页 |
| 1.5.2 异源四聚体构成的适配蛋白复合体的结构和各亚基的功能 | 第17-18页 |
| 1.5.3 适配蛋白复合体的功能 | 第18-20页 |
| 1.5.3.1 AP1的功能 | 第18页 |
| 1.5.3.2 AP2的功能 | 第18-19页 |
| 1.5.3.3 AP3的功能 | 第19页 |
| 1.5.3.4 AP4和AP5的功能 | 第19-20页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第21页 |
| 2.1.2 酶与各种生化试剂 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-36页 |
| 2.2.1 构建表达载体 | 第21-26页 |
| 2.2.1.1 设计PCR引物 | 第21-22页 |
| 2.2.1.2 PCR扩增目的基因 | 第22-23页 |
| 2.2.1.3 回收PCR产物 | 第23页 |
| 2.2.1.4 构建克隆载体 | 第23页 |
| 2.2.1.5 大肠杆菌转化及质粒提取(试剂盒法) | 第23-25页 |
| 2.2.1.6 DNA序列测定 | 第25页 |
| 2.2.1.7 LR反应 | 第25页 |
| 2.2.1.8 质粒DNA的酶切鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.2 拟南芥遗传转化及植物材料的鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.2.1 制备农杆菌感受态与转化 | 第26-27页 |
| 2.2.2.2 拟南芥的种植和遗传转化 | 第27页 |
| 2.2.2.3 提取植物基因组DNA | 第27-28页 |
| 2.2.3 GUS染色 | 第28页 |
| 2.2.4 原位杂交分析 | 第28-32页 |
| 2.2.4.1 固定材料 | 第28-29页 |
| 2.2.4.2 石蜡包埋 | 第29页 |
| 2.2.4.3 切片 | 第29页 |
| 2.2.4.4 原位探针标记 | 第29-30页 |
| 2.2.4.5 杂交预处理和杂交 | 第30-31页 |
| 2.2.4.6 杂交 | 第31-32页 |
| 2.2.4.7 洗片 | 第32页 |
| 2.2.4.8 检测 | 第32页 |
| 2.2.5 花粉萌发及花粉染色实验 | 第32-33页 |
| 2.2.5.1 花粉萌发实验 | 第33页 |
| 2.2.5.2 历山大染色实验 | 第33页 |
| 2.2.5.3 DAPI染色实验 | 第33页 |
| 2.2.6 扫描电子显微镜观察 | 第33页 |
| 2.2.7 树脂切片观察 | 第33-34页 |
| 2.2.8 透射电子显微镜观察 | 第34页 |
| 2.2.9 拟南芥胚珠光学切片观察 | 第34-35页 |
| 2.2.10 激光共聚焦扫描隧道显微镜观察及图像处理 | 第35页 |
| 2.2.11 药剂处理及荧光染料染色 | 第35-36页 |
| 2.2.11.1 FM4-64染色 | 第35页 |
| 2.2.11.2 BFA处理 | 第35页 |
| 2.2.11.3 BCECF-AM染色 | 第35页 |
| 2.2.11.4 中性红染色 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-53页 |
| 3.1 AP1Gs功能缺失突变体的表型分析 | 第36-45页 |
| 3.1.1 AP1Gs功能缺失突变体的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.1.2 AP1Gs突变体的表型分析 | 第37-45页 |
| 3.1.2.1 AP1Gs功能缺失突变体传代率降低 | 第37-38页 |
| 3.1.2.2 AP1Gs功能缺失造成雄配子体完全败育 | 第38-41页 |
| 3.1.2.3 AP1Gs功能缺失导致雌配子体部分异常 | 第41-45页 |
| 3.2 AP1Gs的表达模式分析 | 第45-47页 |
| 3.2.1 启动子启动GUS报告基因分析AP1Gs表达模式 | 第45-46页 |
| 3.2.2 原位杂交检测AP1Gs的表达模式 | 第46-47页 |
| 3.3 AP1Gs的亚细胞定位及功能互补 | 第47-50页 |
| 3.3.1 AP1Gs的亚细胞定位研究 | 第47-49页 |
| 3.3.2 ap1g突变体的功能互补 | 第49-50页 |
| 3.4 AP1Gs突变体影响了花粉液泡的酸性和花粉发育过程中液泡动态变化 | 第50-53页 |
| 3.4.1 AP1Gs突变体花粉发育过程中液泡动态组织机制异常 | 第50-51页 |
| 3.4.2 AP1Gs突变体花粉液泡酸性异常 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第65页 |
