| 缩略词表 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 三种常见蔬菜病毒病害简介 | 第14-22页 |
| 1.1.1 双生病毒-番茄黄化曲叶病毒及伴随卫星分子 | 第14-18页 |
| 1.1.1.1 双生病毒的分类及特征 | 第14-15页 |
| 1.1.1.2 番茄黄化曲叶病毒的分类及特征 | 第15-16页 |
| 1.1.1.3 番茄黄化曲叶病毒的传播媒介及方式 | 第16页 |
| 1.1.1.4 番茄黄化曲叶病毒病发生情况及田间寄主范围 | 第16-17页 |
| 1.1.1.5 与双生病毒伴随的卫星DNAβ的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.1.2 蚕豆萎蔫病毒 | 第18-20页 |
| 1.1.2.1 蚕豆萎蔫病毒特征 | 第18页 |
| 1.1.2.2 蚕豆萎蔫病毒症状特征及发病规律 | 第18-19页 |
| 1.1.2.3 蚕豆萎蔫病毒鉴别寄主反应和症状 | 第19页 |
| 1.1.2.4 蚕豆萎蔫病毒的检测技术 | 第19-20页 |
| 1.1.3 番茄褪绿病毒 | 第20-22页 |
| 1.1.3.1 番茄褪绿病毒病原特征 | 第20-21页 |
| 1.1.3.2 番茄褪绿病毒病发生情况及田间寄主范围 | 第21页 |
| 1.1.3.3 番茄褪绿病毒的传播方式 | 第21页 |
| 1.1.3.4 番茄褪绿病毒基因组和粒子特性 | 第21-22页 |
| 1.1.3.5 番茄褪绿病毒的检测技术 | 第22页 |
| 1.2 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 供试植株的来源 | 第24-25页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第25页 |
| 2.1.3 生化及分子生物学试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.5 实验所需试剂及配制 | 第26-27页 |
| 2.2 番茄黄化曲叶病毒及其伴随卫星DNA的检测与鉴定 | 第27-33页 |
| 2.2.1 植物总DNA提取 | 第27页 |
| 2.2.2 引物的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.3.1 外壳蛋白的PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.3.2 全基因组及小分子卫星DNA的PCR扩增 | 第29页 |
| 2.2.4 PCR产物的克隆与测序 | 第29-33页 |
| 2.2.4.1 琼脂糖凝胶电泳与DNA片段回收 | 第29-30页 |
| 2.2.4.2 连接载体 | 第30-31页 |
| 2.2.4.3 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| 2.2.4.4 连接产物转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
| 2.2.4.5 碱裂解法提取质粒DNA | 第32页 |
| 2.2.4.6 重组质粒鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.4.7 序列分析 | 第33页 |
| 2.3 蚕豆萎蔫病毒的鉴定与检测 | 第33-37页 |
| 2.3.1 引物的设计与合成 | 第33-34页 |
| 2.3.2 植物总RNA提取 | 第34-35页 |
| 2.3.3 反转录cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 2.3.4 RT-PCR扩增 | 第36-37页 |
| 2.3.4.1 BBWV2-RNA1的PCR扩增 | 第36页 |
| 2.3.4.2 BBWV2-RNA2的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 2.3.5 PCR产物的克隆及测序 | 第37页 |
| 2.4 番茄褪绿病毒的鉴定与检测 | 第37-39页 |
| 2.4.1 引物的设计与合成 | 第37-38页 |
| 2.4.2 样品RNA提取、反转录cDNA的合成及RT-PCR扩增 | 第38页 |
| 2.4.3 PCR产物的克隆及测序 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-55页 |
| 3.1 双生病毒--番茄黄化曲叶病毒及伴随卫星分子 | 第39-45页 |
| 3.1.1 山东省、河南省、河北省和辽宁省番茄TYLCV及其伴随卫星检测 | 第39-40页 |
| 3.1.2 DNAβ全序列测定和分析 | 第40-45页 |
| 3.1.2.1 DNAβ的PCR扩增及序列测定 | 第40页 |
| 3.1.2.2 TYLCV伴随卫星β全长序列分析 | 第40-41页 |
| 3.1.2.3 TYLCV DNAβ与其他DNAβ的分子进化分析 | 第41-44页 |
| 3.1.2.4 系统进化树分析 | 第44-45页 |
| 3.2 蚕豆萎蔫病毒病病原的鉴定 | 第45-49页 |
| 3.2.1 BBWV2在山东省发生情况检测 | 第45页 |
| 3.2.2 BBWV2 RNA1的PCR扩增及序列测定 | 第45-47页 |
| 3.2.3 BBWV2 RNA2的PCR扩增及序列测定 | 第47-49页 |
| 3.3 番茄褪绿病毒病病原的鉴定 | 第49-55页 |
| 3.3.1 ToCV在河北省发生情况检测 | 第49-50页 |
| 3.3.2 ToCV与TYLCV复合侵染检测 | 第50-52页 |
| 3.3.3 番茄褪绿病毒CP与HSP70序列测定和分析 | 第52页 |
| 3.3.4 复合侵染的番茄黄化曲叶病毒DNA-1序列测定和分析 | 第52页 |
| 3.3.5 番茄褪绿病毒CP与HSP70分离物全基因系统进化树构建 | 第52-55页 |
| 4 结论与讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 双生病毒--番茄黄化曲叶病毒伴随卫星DNAβ | 第55-56页 |
| 4.1.1 山东、河北、河南和辽宁TYLCV伴随卫星β检测和分析 | 第55-56页 |
| 4.2 蚕豆萎蔫病毒的检测和分析 | 第56页 |
| 4.3 番茄褪绿病毒的检测和分析 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第63页 |
