摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-25页 |
·那西肽研究历程及现 | 第16页 |
·那西肽分子结构与理化性质 | 第16-17页 |
·那西肽抗菌机制 | 第17页 |
·那西肽的生物合成途径 | 第17-19页 |
·那西肽的发酵生产 | 第19-23页 |
·那西肽产生菌的菌种特性 | 第19-20页 |
·诱变育种 | 第20页 |
·那西肽的发酵工艺 | 第20-21页 |
·那西肽的提取工艺 | 第21-22页 |
·那西肽的分析检测方法 | 第22-23页 |
·物理诱变与化学诱变主要方法 | 第23-24页 |
·本论文研究意义与目标 | 第24-25页 |
第二章 那西肽产生菌的孢子诱变育种 | 第25-46页 |
·菌种筛选流程 | 第25-26页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·菌株 | 第26页 |
·培养基 | 第26页 |
·斜面及平板培养基(%) | 第26页 |
·种子培养基(%) | 第26页 |
·发酵培养基(%) | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要实验设备 | 第26-27页 |
·分析方法 | 第27-29页 |
·pH测定 | 第27页 |
·PMV测定 | 第27页 |
·还原糖测定 | 第27-28页 |
·氨基氮含量测定 | 第28-29页 |
·那西肽的含量测定 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-32页 |
·单孢子悬液的制备 | 第29-30页 |
·经典诱变-物理诱变方法的考察 | 第30页 |
·紫外诱变 | 第30页 |
·微波诱变 | 第30页 |
·激光诱变 | 第30页 |
·经典诱变-化学诱变方法的考察 | 第30-31页 |
·助诱剂LiCL抗性实验 | 第30页 |
·亚硝酸钠诱变 | 第30-31页 |
·亚硝基胍(NTG)诱变 | 第31页 |
·前体氨基酸抗性筛选 | 第31页 |
·理性与推理选育-复合诱变 | 第31-32页 |
·紫外和微波复合诱变 | 第31-32页 |
·紫外诱变和氨基酸抗性筛选复合诱变那西肽产生菌 | 第32页 |
·NTG诱变和组合氨基酸抗性复合育种 | 第32页 |
·菌种保藏 | 第32页 |
·培养条件 | 第32页 |
·斜面及平板培养条件 | 第32页 |
·种子瓶培养条件 | 第32页 |
·发酵瓶培养条件 | 第32页 |
·高产菌株的形态特征与传代稳定性 | 第32页 |
·菌落形态特征比较 | 第32页 |
·高产菌株的传代稳定性 | 第32页 |
·结果与讨论 | 第32-46页 |
·葡萄糖标准曲线 | 第32-33页 |
·那西肽分光光度计法含量测定标准曲线 | 第33页 |
·紫外诱变的致死率与正突变率 | 第33-34页 |
·微波诱变 | 第34-35页 |
·激光对那西肽产生菌孢子的诱变效应 | 第35-37页 |
·助诱变剂LiCL抗性实验 | 第37页 |
·亚硝酸钠诱变 | 第37-38页 |
·亚硝基胍对那西肽产生菌孢子的诱变效应 | 第38-40页 |
·理性与推理选育实验结果 | 第40-44页 |
·氨基酸抗性实验 | 第40-42页 |
·紫外和微波复合诱变 | 第42-43页 |
·紫外诱变和氨基酸抗性筛选复合育种 | 第43页 |
·NTG诱变和组合氨基酸抗性复合育种 | 第43-44页 |
·高产菌株菌落形态演变谱系 | 第44-46页 |
第三章 那西肽产生菌原生质体诱变 | 第46-55页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·菌株 | 第46页 |
·培养基 | 第46-47页 |
·斜面、母瓶、发酵培养基 | 第46页 |
·菌丝体培养基 | 第46-47页 |
·原生质体再生培养基 | 第47页 |
·溶液配制 | 第47页 |
·微量元素溶液 | 第47页 |
·高渗稳定液P buffer | 第47页 |
·溶菌酶溶液 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-49页 |
·活跃链霉菌-那西肽原生质体制备条件的研究 | 第47-48页 |
·菌丝体培养 | 第47-48页 |
·原生质体制备 | 第48页 |
·原生质体再生 | 第48页 |
·活跃链霉菌-那西肽原生质体诱变 | 第48-49页 |
·原生质体紫外诱变 | 第49页 |
·原生质体微波诱变 | 第49页 |
·紫外-微波复合诱变 | 第49页 |
·结果与讨论 | 第49-54页 |
·菌丝体培养最佳接种量的确立 | 第49-50页 |
·原生质体制备及再生的优化 | 第50页 |
·紫外和微波分别对那西肽产生菌原生质体的诱变 | 第50-52页 |
·紫外-微波复合诱变效应 | 第52-54页 |
·那西肽高产菌株的诱变谱系 | 第54-55页 |
第四章 那西肽发酵条件优化及中试放大 | 第55-74页 |
·实验材料 | 第55-57页 |
·菌种 | 第55页 |
·培养基 | 第55页 |
·种子罐培养基 | 第55页 |
·发酵罐培养基 | 第55页 |
·主要原材料 | 第55-56页 |
·发酵主要原材料质量控制指标 | 第56-57页 |
·主要实验设备 | 第57页 |
·试验方法 | 第57-58页 |
·斜面、母瓶培养条件 | 第57页 |
·种子罐培养工艺指标 | 第57-58页 |
·发酵罐培养工艺指标 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-67页 |
·斜面和母瓶培养工艺局部改变 | 第58-60页 |
·高产菌株斜面保藏时间的考察 | 第58-59页 |
4..3.1.2 母瓶种子液保藏时间对发酵放瓶效价的影响 | 第59页 |
·种子移种时间对发酵的影响 | 第59-60页 |
·高产突变株NXT-UV19-J2-NA10代谢特性的研究 | 第60页 |
·摇瓶发酵培养基的优化 | 第60-65页 |
·Plackett-Burman设计法 | 第60-62页 |
·响应面分析法优化培养基的组成 | 第62-65页 |
·发酵培养基添加有机氮源实验 | 第65-66页 |
·发酵初始培养基补加氨基酸对发酵产物的影响 | 第66-67页 |
·中式放大条件的研究 | 第67-74页 |
·成熟母瓶菌丝形态 | 第67-68页 |
·种子罐接种量的考察 | 第68页 |
·种子罐按0.2%接种量不同时间菌丝形态 | 第68页 |
·发酵罐接种量的考察 | 第68-69页 |
·发酵罐的工艺控制 | 第69-70页 |
·两级培养 | 第69-70页 |
·三级发酵 | 第70页 |
·发酵罐基础料添加氨基酸和玉米蛋白粉实验 | 第70-71页 |
·两级发酵过程菌丝形态 | 第71-72页 |
·根据溶氧调整温度和空气通气量 | 第72页 |
·调整后的发酵培养工艺 | 第72-74页 |
第五章 结论与展望 | 第74-76页 |
·结论 | 第74-75页 |
·展望 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-80页 |
学位论文研究工作期间发表的文章 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |