| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 缩略表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1 乳腺癌概述 | 第9页 |
| ·乳腺癌现状 | 第9页 |
| ·乳腺癌的诊断治疗 | 第9页 |
| 2 干细胞及肿瘤干细胞 | 第9-12页 |
| ·干细胞的定义 | 第9-10页 |
| ·肿瘤干细胞假说 | 第10-11页 |
| ·乳腺肿瘤干细胞 | 第11-12页 |
| 3 GIPC1 | 第12-13页 |
| 4 RNA 干扰 | 第13-15页 |
| ·RNAi 的概念及机制 | 第13-14页 |
| ·RNAi 的实验室应用 | 第14-15页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 构建GIPC1 的低表达细胞株 | 第16-25页 |
| 1 实验材料 | 第16-18页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第16-17页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·生物材料 | 第17页 |
| ·主要溶液配制 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-23页 |
| ·shRNA 表达质粒及阴性对照质粒载体构建 | 第18-21页 |
| ·shRNA 序列设计 | 第18-19页 |
| ·制备感受态细胞 | 第19页 |
| ·扩增质粒 | 第19-20页 |
| ·构建重组质粒载体 | 第20页 |
| ·pCMV-R8.2，pCMV-VSV-G 质粒扩增 | 第20-21页 |
| ·病毒的包装及侵染 | 第21-22页 |
| ·细胞培养 | 第21页 |
| ·包装病毒 | 第21页 |
| ·侵染MCF-7L 细胞系 | 第21-22页 |
| ·免疫印迹(Western Blot) | 第22-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-25页 |
| 第三章 GIPC1 低表达细胞株差异蛋白质组学研究 | 第25-37页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第25-28页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要材料 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·分析软件 | 第27页 |
| ·主要溶液配制 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-31页 |
| ·mammosphere 的培养 | 第28页 |
| ·样品制备 | 第28页 |
| ·双向电泳 | 第28-31页 |
| ·第一向等电聚焦(IEF) | 第28-29页 |
| ·IPG 胶条的平衡 | 第29页 |
| ·IPG 胶条的转移和第二向 SDS-PAGE | 第29-30页 |
| ·银染及图像分析 | 第30页 |
| ·胶内酶解 | 第30页 |
| ·MALDI-TOF-TOF 质谱鉴定和数据库搜索 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-34页 |
| ·mammosphere 光学显微镜观察 | 第31-32页 |
| ·双向电泳结果 | 第32-33页 |
| ·GIPC1-i2 和GIPC1-NC 的双向电泳图谱 | 第32页 |
| ·双向电泳图谱的重复性 | 第32-33页 |
| ·双向电泳图谱的蛋白质表达差异 | 第33页 |
| ·质谱鉴定结果 | 第33-34页 |
| 4. 讨论 | 第34-37页 |
| 第四章 结论与展望 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 致谢 | 第44页 |
