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携带NKG2D配体和Herceptin的腺病毒联合NK-92细胞杀伤肿瘤作用的研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-15页
缩略词表第15-16页
第一章 NK 细胞和HERCEPTIN 的研究进展第16-21页
 前言第16页
   ·自然杀伤细胞研究进展第16-18页
     ·NK 细胞的表面受体第17-18页
     ·NKG2D 及其配体第18页
   ·赫赛汀(HERCEPTIN)第18-19页
   ·本课题的创意和研究内容第19-21页
     ·本课题的创意第19-20页
     ·本课题的研究内容第20-21页
第二章 携带HERCEPTIN-NKG2DL 融合基因的重组腺病毒的构建第21-64页
   ·前言第21页
   ·实验器材第21-25页
     ·实验材料第21-22页
     ·主要的实验仪器与设备第22-23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要试剂的配制第23页
     ·所需引物第23-24页
     ·基因合成第24-25页
   ·方法第25-47页
     ·载体构建第25-41页
     ·质粒的大量制备第41-42页
     ·病毒重组、扩增和纯化第42-47页
     ·病毒滴度的测定(5096组织培养感染剂量法)第47页
   ·结果第47-62页
     ·用于质粒pDC355-AT5-NKG2DL 构建的各目的片段的电泳结果第47-50页
     ·质粒pDC355-AT5-NKG2DL 的鉴定第50-53页
     ·用于质粒pDC358-AT5-NKG2DL 构建的各目的片段的电泳结果第53-54页
     ·质粒pDC358-AT5-NKG2DL 的鉴定第54-55页
     ·用于质粒pDC339-AT5-NKG2DL 构建的各目的片段的电泳结果第55-56页
     ·质粒pDC339-AT5-NKG2DL 的鉴定第56-57页
     ·重组腺病毒的鉴定第57-62页
     ·病毒滴度测定第62页
   ·讨论第62页
   ·小结第62-64页
第三章 重组腺病毒抗肿瘤效果评估第64-75页
   ·实验器材第64-66页
     ·实验所需材料第64页
     ·实验所需仪器第64-65页
     ·实验所需主要试剂第65页
     ·主要试剂的配制第65-66页
   ·实验方法第66-70页
     ·细胞培养第66页
     ·ELISA 方法检测蛋白的表达量.第66-67页
     ·Western Blot 方法检测蛋白的表达第67-68页
     ·间接免疫荧光分析(IFA)检测蛋白的结合特性.第68-69页
     ·LDH 释放实验研究蛋白的功能.第69-70页
   ·实验结果第70-73页
     ·病毒 Ad5-AT5 和Ad5-AT5-MICA(E)的目的蛋白表达量的测定.第70-71页
     ·间接免疫荧光分析(Indirect immunofluorescence Assay,IFA)第71-73页
     ·细胞毒活性实验(Cytotoxicity assay)第73页
   ·讨论第73-75页
结论第75-76页
参考文献第76-81页
致谢第81-82页
附录第82-86页
 附录1 整体实验流程图第82-83页
 附录2 AT5H’-MICA(E) 测序结果第83-86页

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