中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
缩略词表 | 第15-16页 |
第一章 NK 细胞和HERCEPTIN 的研究进展 | 第16-21页 |
前言 | 第16页 |
·自然杀伤细胞研究进展 | 第16-18页 |
·NK 细胞的表面受体 | 第17-18页 |
·NKG2D 及其配体 | 第18页 |
·赫赛汀(HERCEPTIN) | 第18-19页 |
·本课题的创意和研究内容 | 第19-21页 |
·本课题的创意 | 第19-20页 |
·本课题的研究内容 | 第20-21页 |
第二章 携带HERCEPTIN-NKG2DL 融合基因的重组腺病毒的构建 | 第21-64页 |
·前言 | 第21页 |
·实验器材 | 第21-25页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·主要的实验仪器与设备 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要试剂的配制 | 第23页 |
·所需引物 | 第23-24页 |
·基因合成 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-47页 |
·载体构建 | 第25-41页 |
·质粒的大量制备 | 第41-42页 |
·病毒重组、扩增和纯化 | 第42-47页 |
·病毒滴度的测定(5096组织培养感染剂量法) | 第47页 |
·结果 | 第47-62页 |
·用于质粒pDC355-AT5-NKG2DL 构建的各目的片段的电泳结果 | 第47-50页 |
·质粒pDC355-AT5-NKG2DL 的鉴定 | 第50-53页 |
·用于质粒pDC358-AT5-NKG2DL 构建的各目的片段的电泳结果 | 第53-54页 |
·质粒pDC358-AT5-NKG2DL 的鉴定 | 第54-55页 |
·用于质粒pDC339-AT5-NKG2DL 构建的各目的片段的电泳结果 | 第55-56页 |
·质粒pDC339-AT5-NKG2DL 的鉴定 | 第56-57页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第57-62页 |
·病毒滴度测定 | 第62页 |
·讨论 | 第62页 |
·小结 | 第62-64页 |
第三章 重组腺病毒抗肿瘤效果评估 | 第64-75页 |
·实验器材 | 第64-66页 |
·实验所需材料 | 第64页 |
·实验所需仪器 | 第64-65页 |
·实验所需主要试剂 | 第65页 |
·主要试剂的配制 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-70页 |
·细胞培养 | 第66页 |
·ELISA 方法检测蛋白的表达量. | 第66-67页 |
·Western Blot 方法检测蛋白的表达 | 第67-68页 |
·间接免疫荧光分析(IFA)检测蛋白的结合特性. | 第68-69页 |
·LDH 释放实验研究蛋白的功能. | 第69-70页 |
·实验结果 | 第70-73页 |
·病毒 Ad5-AT5 和Ad5-AT5-MICA(E)的目的蛋白表达量的测定. | 第70-71页 |
·间接免疫荧光分析(Indirect immunofluorescence Assay,IFA) | 第71-73页 |
·细胞毒活性实验(Cytotoxicity assay) | 第73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
附录 | 第82-86页 |
附录1 整体实验流程图 | 第82-83页 |
附录2 AT5H’-MICA(E) 测序结果 | 第83-86页 |