| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 文献综述 | 第9-24页 |
| 1. 海豚链球菌研究进展 | 第9-16页 |
| 1.1 海豚链球菌来源及血清分型 | 第9-10页 |
| 1.2 鱼类海豚链球菌病的流行情况 | 第10页 |
| 1.3 海豚链球菌的感染性 | 第10-11页 |
| 1.4 海豚链球菌的致病机制 | 第11-12页 |
| 1.5 海豚链球菌的毒力因子 | 第12-15页 |
| 1.6 海豚链球菌的防控 | 第15-16页 |
| 2. 海豚链球菌荚膜的研究进展 | 第16-22页 |
| 2.1 细菌荚膜概况 | 第16-17页 |
| 2.2 细菌荚膜的作用及致病机制 | 第17-18页 |
| 2.3 海豚链球菌荚膜 | 第18-22页 |
| 3. 研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 第一章 cpsJ基因缺失株的构建 | 第24-43页 |
| 1. 材料 | 第24-27页 |
| 1.1 载体 | 第24页 |
| 1.2 菌株 | 第24-25页 |
| 1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 1.4 主要试剂及配制 | 第25-27页 |
| 1.5 主要仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-35页 |
| 2.1 引物设计 | 第27-29页 |
| 2.2 海豚链球菌的培养及基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.3 从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段(胶回收) | 第29-30页 |
| 2.4 基因敲除目的片段的扩增 | 第30-32页 |
| 2.5 感受态DH5α大肠杆菌的制备(CaCl_2法) | 第32页 |
| 2.6 感受态DGX07海豚链球菌的制备 | 第32-33页 |
| 2.7 敲除重组载体的构建 | 第33页 |
| 2.8 电转化 | 第33-34页 |
| 2.9 敲除突变株的筛选 | 第34-35页 |
| 3. 结果 | 第35-39页 |
| 3.1 基因敲除目的片段和敲除载体pJRS233-ΔcpsJ的合成和鉴定 | 第35-37页 |
| 3.2 敲除突变株的筛选和鉴定 | 第37-39页 |
| 4. 讨论 | 第39-43页 |
| 4.1 利用同源重组进行基因敲除的原理 | 第39-41页 |
| 4.2 利用温敏穿梭载体质粒pJRS233进行基因敲除 | 第41-42页 |
| 4.3 突变株PCR鉴定 | 第42-43页 |
| 第二章 cpsJ基因敲除突变株的生物学特性研究 | 第43-54页 |
| 1 材料 | 第43-45页 |
| 1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.2 试剂 | 第43页 |
| 1.3 仪器 | 第43-44页 |
| 1.4 实验动物 | 第44页 |
| 1.5 主要试剂配制方法 | 第44-45页 |
| 2. 方法 | 第45-47页 |
| 2.1 菌体菌落形态观察 | 第45页 |
| 2.2 生长率分析 | 第45页 |
| 2.3 全血存活试验 | 第45-46页 |
| 2.4 粘附与入侵试验 | 第46-47页 |
| 2.5 攻毒试验 | 第47页 |
| 3. 结果 | 第47-52页 |
| 3.1 菌体菌落形态观察结果 | 第47-49页 |
| 3.2 生长率测定结果 | 第49页 |
| 3.3 粘附和入侵试验结果 | 第49-50页 |
| 3.4 全血杀灭试验结果 | 第50-51页 |
| 3.5 攻毒试验结果 | 第51-52页 |
| 4. 讨论 | 第52-54页 |
| 4.1 ⊿cpsJ突变株形成长链的讨论 | 第52-53页 |
| 4.2 ⊿cpsJ突变株具有较高的粘附和入侵性的讨论 | 第53页 |
| 4.3 ⊿cpsJ具有较低生长率的讨论 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
