| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 引言和文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 心肌肥厚的特征变化 | 第11-12页 |
| 1.2 心肌肥厚过程中的分子机制 | 第12-14页 |
| 1.2.1 MARK信号途径 | 第12页 |
| 1.2.2 G蛋白信号途径 | 第12-13页 |
| 1.2.3 PI3K/Akt/GSK3β级联激活的途径 | 第13-14页 |
| 1.2.4 钙信号引起的心肌肥厚的转录机制 | 第14页 |
| 1.3 在心肌肥大中作用的转录因子 | 第14-20页 |
| 1.3.1 GATA转录因子 | 第15-16页 |
| 1.3.2 MEF2转录因子 | 第16-18页 |
| 1.3.3 心脏同源异形盒转录因子Csx/Nkx2.5 | 第18页 |
| 1.3.4 SRF基因 | 第18-19页 |
| 1.3.5 HAND基因 | 第19-20页 |
| 1.4 刺激心肌肥大的主要因素 | 第20-22页 |
| 1.4.1 机械应力 | 第20页 |
| 1.4.2 神经激素因子介导机械应力诱导性心肌肥大 | 第20-21页 |
| 1.4.3 机械应力转化为生化信号诱导心肌肥大 | 第21页 |
| 1.4.4 其他因素引起心肌肥大 | 第21-22页 |
| 1.5 Nulp1基因 | 第22页 |
| 1.6 FHL2基因 | 第22-23页 |
| 1.7 本文研究的意义 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-37页 |
| 2.1 材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 生物信息学软件 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.3 质粒、细胞和菌株 | 第26页 |
| 2.1.4 主要实验仪器和耗材 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 Nulp1基因的生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.2 ISO刺激的心肌肥大小鼠模型的制备 | 第27页 |
| 2.2.3 新生大鼠心肌细胞的分离和培养 | 第27-28页 |
| 2.2.4 细胞和心脏组织总RNA的抽提 | 第28-29页 |
| 2.2.5 引物设计与合成 | 第29页 |
| 2.2.6 PCR扩增 | 第29页 |
| 2.2.7 PCR产物纯化回收 | 第29-30页 |
| 2.2.8 载体连接实验 | 第30页 |
| 2.2.9 感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.10 连接产物的转化 | 第31页 |
| 2.2.11 质粒的小量制备 | 第31-32页 |
| 2.2.12 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第32页 |
| 2.2.13 测序 | 第32页 |
| 2.2.14 真核表达重组质粒的大量制备 | 第32-33页 |
| 2.2.15 常规细胞培养及转染 | 第33-34页 |
| 2.2.16 转基因细胞稳定系的构建 | 第34页 |
| 2.2.17 报道基因活性的分析 | 第34页 |
| 2.2.18 SDS-PAGE | 第34-35页 |
| 2.2.19 Western Blot技术 | 第35页 |
| 2.2.20 多克隆抗体的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.21 成年小鼠各组织蛋白的提取与检测 | 第36页 |
| 2.2.22 内源性免疫共沉淀(CO-IP) | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-47页 |
| 3.1 人类Nulp1基因的生物信息学分析结果 | 第37-38页 |
| 3.2 人鼠同源的Nulp1抗体的制备 | 第38-39页 |
| 3.3 Nulp1在小鼠心脏中特异性表达 | 第39-40页 |
| 3.4 Nulp1在肥大新生大鼠心肌细胞中的表达研究 | 第40页 |
| 3.5 Nulp1在心肌肥大小鼠中的表达研究 | 第40-41页 |
| 3.6 Nulp1基因在人类肥大心脏标本中的表达研究 | 第41-42页 |
| 3.7 Nulp1与FHL2的内源性相互作用 | 第42页 |
| 3.8 Nulp1蛋白对报告基因的分析 | 第42-43页 |
| 3.9 其他工作 | 第43-47页 |
| 3.9.1 Nfat基因克隆至表达载体连接 | 第43-44页 |
| 3.9.2 Nfat融合蛋白诱导表达及纯化 | 第44-45页 |
| 3.9.3 Nfat多克隆抗体的Western Blot的鉴定 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录1 | 第56-58页 |
| 附录2 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
