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果蝇心脏候选基因CG3295敲除品系的鉴定

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 引言第10-23页
    1.1 果蝇心脏的形态发生第11-13页
        1.1.1 果蝇的心脏结构第11页
        1.1.2 果蝇心脏的胚胎发育第11-12页
        1.1.3 果蝇的胚胎发育的时期特点第12-13页
    1.2 利用P转座子插入突变法建立果蝇突变系第13-15页
        1.2.1 转座子的发现第13-14页
        1.2.2 果蝇的P因子系统第14-15页
    1.3 果蝇荧光心脏标记系统第15-16页
    1.4 果蝇心脏发育的相关基因及信号途径第16-21页
        1.4.1 Tinman第17-18页
        1.4.2 Tkv第18-19页
        1.4.3 Dmef2第19-21页
    1.5 果蝇CG3295的研究工作基础第21-23页
第二章 材料与方法第23-39页
    2.1 材料第23-28页
        2.1.1 生物信息学分析的主要软件与数据库第23-24页
        2.1.2 果蝇品系及引物第24-25页
        2.1.3 酶与试剂盒第25页
        2.1.4 质粒和菌株第25-27页
        2.1.5 抗体第27页
        2.1.6 其他试剂第27页
        2.1.7 主要实验仪器第27-28页
    2.2 方法第28-39页
        2.2.1 常用试剂及培养基配制第28-31页
        2.2.2 PCR产物的纯化回收第31-32页
        2.2.3 PCR产物与T-载体的连接第32页
        2.2.4 DH-5α感受态细胞的制备第32页
        2.2.5 转化(热休克法)第32-33页
        2.2.6 大规模提取质粒方法第33-35页
        2.2.7 CG3295敲除品系果蝇的PCR检测第35-36页
        2.2.8 CG3295敲除果蝇蛋白表达检测第36-38页
        2.2.9 表型观察品系和纯合体检测品系的构建第38-39页
第三章 结果第39-45页
    3.1 基因CG3295在果蝇中的基本表达情况第39-40页
    3.2 West-blotting检测是否敲除CG3295第40-42页
    3.3 PCR鉴定敲除品系第42-43页
        3.3.1 敲除品系果蝇基因组的提取第42页
        3.3.2 PCR鉴定敲除品系第42-43页
    3.4 观察敲除致死系的心管表型第43-45页
第四章 讨论第45-47页
第五章 其他工作第47-57页
    5.1 Mef2基因多克隆抗体的制备及检测第47-51页
        5.1.1 材料与方法第47-49页
        5.1.2 结果与分析第49-51页
    5.2 Pericardin蛋白的表达纯化以及多克隆抗体的制备第51-53页
        5.2.1 材料与方法第51页
        5.2.2 结果与分析第51-53页
    5.3 Zfh1基因多克隆抗体的制备第53-57页
        5.3.1 材料与方法第54页
        5.3.2 结果与分析第54-57页
参考文献第57-63页
附录1第63-64页
附录2第64-65页
后记第65-66页

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