摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第10-20页 |
1 放线菌次级代谢产物抗生素的生物合成调控 | 第10-12页 |
1.1 SARPs家族 | 第10-11页 |
1.2 LAL转录调节子 | 第11页 |
1.3 胞内外信号因子 | 第11-12页 |
2 多杀菌素及其类似物或衍生物发展史 | 第12-15页 |
3 本研究室刺糖多孢菌菌种改良 | 第15-16页 |
4 (p)ppGpp研究概况 | 第16-19页 |
4.1 (p)ppGpp在链霉菌中的作用 | 第17-18页 |
4.2 (p)ppGpp自身代谢调节及其它生物学作用 | 第18-19页 |
5 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-31页 |
1 材料 | 第20-24页 |
1.1 供试菌株 | 第20-21页 |
1.2 培养基 | 第21页 |
1.3 工具酶及标准分子量 | 第21-22页 |
1.4 PCR引物及产物测序 | 第22页 |
1.5 生化试剂 | 第22页 |
1.6 常用溶液及缓冲液 | 第22-23页 |
1.7 抗生素及其使用浓度 | 第23页 |
1.8 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2 研究方法 | 第24-31页 |
2.1 菌种培养 | 第24页 |
2.2 刺糖多孢菌基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
2.3 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第25页 |
2.4 阻断型载体pOJ260-relA的构建 | 第25-26页 |
2.5 DNA片段的连接 | 第26页 |
2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
2.7 大肠杆菌的转化 | 第26-27页 |
2.8 大肠杆菌转化子的快速筛选 | 第27-28页 |
2.9 重组子的酶切鉴定 | 第28页 |
2.10 工程菌S.spinosa SP-relA的构建 | 第28-29页 |
2.11 发酵培养 | 第29页 |
2.12 多杀菌素HPLC检测分析 | 第29页 |
2.13 relA基因阻断对刺糖多孢菌生长的影响 | 第29-30页 |
2.14 relA基因阻断对刺糖多孢菌形态、色素产生的影响 | 第30页 |
2.15 工程菌S.spinosa SP-relA遗传稳定性检测 | 第30-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-40页 |
1 刺糖多孢菌1.15 kbp relA基因片段的克隆 | 第31页 |
2 阻断型载体pOJ260-relA酶切鉴定 | 第31-32页 |
3 工程菌S.spinosa SP-relA的PCR检测 | 第32-35页 |
4 relA基因阻断对刺糖多孢菌生长与多杀菌素合成的影响 | 第35-37页 |
5 relA基因阻断对刺糖多孢菌孢子形态和色素产生分析 | 第37-39页 |
6 工程菌S.spinosa SP-relA遗传稳定性检测 | 第39-40页 |
讨论 | 第40-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
附录 | 第49-53页 |
硕士研究生期间撰写、发表与课题相关的学术论文 | 第53-54页 |
本论文感谢以下基金项目的资助 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |