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油菜细胞壁机械特性、激素与活性氧信号响应低硼胁迫的基因型差异

摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
缩略语表第14-16页
1 文献综述第16-34页
    1.1 植物硼营养概述第16-20页
        1.1.1 硼的生理功能第16页
        1.1.2 土壤与植物体硼的浓度和分布第16-17页
        1.1.3 植物的缺硼症状第17-18页
        1.1.4 植物硼高效的生理与分子机制第18-20页
    1.2 硼对植物细胞壁结构和力学性能的影响第20-24页
    1.3 低硼胁迫对植物激素信号的影响第24-27页
        1.3.1 低硼胁迫对生长素的影响第25-26页
        1.3.2 低硼胁迫对其它植物激素的影响第26-27页
    1.4 低硼胁迫对植物活性氧信号的影响第27-28页
    1.5 植物钙、活性氧、激素信号的互作第28-30页
        1.5.1 钙与活性氧的互作第28-29页
        1.5.2 激素与活性氧的互作第29-30页
        1.5.3 激素与钙的互作第30页
    1.6 植物细胞培养研究进展第30-34页
2 课题研究的背景、内容和技术路线第34-36页
    2.1 研究背景第34页
    2.2 研究内容第34-35页
    2.3 技术路线第35-36页
3 果胶介导的细胞壁机械特性与甘蓝型油菜低硼敏感性的关系第36-68页
    3.1 引言第36页
    3.2 材料与方法第36-44页
        3.2.1 试验材料第36页
        3.2.2 悬浮细胞体系的建立第36-38页
        3.2.3 材料培养及硼浓度处理第38-39页
        3.2.4 细胞活性的测定第39页
        3.2.5 细胞超微结构的观察第39-40页
        3.2.6 细胞壁的提取与分级第40页
        3.2.7 原子力显微镜(AFM)测定细胞表面形貌及力学性能第40-41页
        3.2.8 根系扫描与根系细胞壁弱化的检测第41页
        3.2.9 原生质体培养与细胞壁再生能力的鉴定第41-42页
        3.2.10 果胶的提取与细胞壁组分中糖醛酸含量的测定第42页
        3.2.11 RG-II单体及二聚体的测定第42页
        3.2.12 细胞壁及其组分的傅里叶变换红外光谱(FTIR)的测定第42页
        3.2.13 高通量数字基因表达谱测序第42-43页
        3.2.14 总RNA的提取及逆转录第43页
        3.2.15 基因引物设计及实时定量表达(qRT-PCR)分析第43-44页
        3.2.16 数据分析第44页
    3.3 结果与分析第44-64页
        3.3.1 硼对油菜悬浮细胞生长的影响第44-46页
        3.3.2 硼对油菜悬浮细胞显微形态的影响第46-47页
        3.3.3 硼对油菜细胞壁力学性能的影响第47-52页
        3.3.4 硼对油菜原生质体细胞壁再生的影响第52-54页
        3.3.5 硼对果胶浓度及RG-II单体与二聚体比例的影响第54-55页
        3.3.6 硼高效和硼低效基因型果胶合成相关基因表达的差异第55-64页
    3.4 讨论第64-68页
        3.4.1 低硼导致细胞壁力学性能的弱化促使细胞破裂第64页
        3.4.2 细胞壁果胶含量的差异与基因型间缺硼敏感性的关系第64-66页
        3.4.3 果胶RG-II的二聚化程度与细胞壁的力学性能第66页
        3.4.4 果胶响应低硼胁迫与调控细胞壁强度的模型第66-68页
4 甘蓝型油菜硼高效和硼低效基因型响应低硼胁迫的激素变化第68-90页
    4.1 引言第68页
    4.2 材料与方法第68-72页
        4.2.1 试验材料第68-69页
        4.2.2 材料培养及硼处理第69页
        4.2.3 根系扫描,生物量与硼浓度的测定第69页
        4.2.4 高通量数字基因表达谱测序第69-70页
        4.2.5 生长素、茉莉酸、脱落酸及相关前体物质或者衍生物的提取和测定第70页
        4.2.6 总RNA的提取及逆转录第70页
        4.2.7 基因引物设计及实时定量表达(qRT-PCR)分析第70-71页
        4.2.8 显微观察分析第71页
        4.2.9 数据分析第71-72页
    4.3 结果与分析第72-87页
        4.3.1 长期低硼胁迫对生物量及硼效率相关性状的影响第72-73页
        4.3.2 激素相关基因响应低硼胁迫时的数字基因表达谱分析第73-75页
        4.3.3 硼对生长素浓度及相关基因表达的影响第75-78页
        4.3.4 拟南芥生长素相关转基因材料对低硼的响应第78-80页
        4.3.5 低硼胁迫下外源添加生长素对甘蓝型油菜生长的影响第80-82页
        4.3.6 硼对茉莉酸浓度及相关基因表达的影响第82-85页
        4.3.7 硼对脱落酸浓度及相关基因表达的影响第85-87页
    4.4 讨论第87-90页
        4.4.1 低硼胁迫降低生长素的浓度从而影响腋芽与根系的生长第87-88页
        4.4.2 茉莉酸对低硼胁迫的响应第88-89页
        4.4.3 脱落酸对低硼胁迫的响应第89-90页
5 活性氧与钙离子参与低硼诱导的细胞死亡第90-112页
    5.1 引言第90页
    5.2 材料与方法第90-94页
        5.2.1 试验材料第90页
        5.2.2 材料培养及硼处理第90-91页
        5.2.3 细胞活性的测定第91页
        5.2.4 根系扫描与硼浓度的测定第91页
        5.2.5 离子渗漏的测定第91页
        5.2.6 组织化学染色第91-92页
        5.2.7 MDA,O_2~-和H_2O_2浓度测定第92页
        5.2.8 O_2~-和H_2O_2细胞染色第92页
        5.2.9 RNA的提取及逆转录第92页
        5.2.10 基因引物设计及实时定量表达(qRT-PCR)分析第92-93页
        5.2.11 K~+和Ca~(2+)流的测定第93-94页
        5.2.12 抗氧化酶活性的测定第94页
        5.2.13 活性氧清除剂以及钙离子通道抑制剂的前处理第94页
        5.2.14 数据分析第94页
    5.3 结果与分析第94-109页
        5.3.1 硼对植株根系生长及细胞活性的影响第94-96页
        5.3.2 低硼胁迫下基因型间硼浓度及硼吸收相关基因的表达第96-97页
        5.3.3 硼对主根质膜稳定性的影响第97-98页
        5.3.4 低硼胁迫诱导活性氧爆发及相关基因的表达第98-102页
        5.3.5 低硼胁迫引起的离子流变化第102-104页
        5.3.6 钙离子作用于ROS的上游第104-105页
        5.3.7 低硼胁迫对抗氧化酶活性的影响第105-107页
        5.3.8 超氧阴离子特异清除剂缓解缺硼时根系和悬浮细胞的细胞死亡第107-109页
    5.4 讨论第109-112页
6 全文总结与展望第112-114页
    6.1 研究总结第112页
    6.2 本研究主要创新点第112-113页
    6.3 本研究不足之处第113页
    6.4 研究展望第113-114页
参考文献第114-144页
致谢第144-146页
作者简介第146-148页

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