中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语 | 第11-12页 |
前言 | 第12-19页 |
研究现状、成果 | 第12-18页 |
研究目的 | 第18页 |
研究方法 | 第18-19页 |
对象和方法 | 第19-43页 |
1.1 实验材料 | 第19-20页 |
1.1.1 细胞系 | 第19页 |
1.1.2 常用试剂 | 第19-20页 |
1.1.3 试剂盒 | 第20页 |
1.2 实验所需的仪器 | 第20-21页 |
1.3 各实验所需的主要试剂的配置 | 第21-25页 |
1.3.1 细胞培养所需 | 第21-22页 |
1.3.2 质粒的提取和纯化所需 | 第22页 |
1.3.3 线粒体提取所需 | 第22-23页 |
1.3.4 免疫印迹(Western Blot)所需 | 第23-24页 |
1.3.5 RT-PCR所需 | 第24-25页 |
1.3.6 酶解所需 | 第25页 |
1.4 研究方法 | 第25-43页 |
1.4.1 细胞培养相关技术 | 第25-26页 |
1.4.2 质粒的转化 | 第26页 |
1.4.3 质粒的提取和转化 | 第26-27页 |
1.4.4 质粒的转染 | 第27页 |
1.4.5 Western Blot细胞裂解 | 第27-28页 |
1.4.6 蛋白浓度测定 | 第28页 |
1.4.7 Western Blot | 第28-30页 |
1.4.8 免疫共沉淀 | 第30-31页 |
1.4.9 银染 | 第31页 |
1.4.10 酶解 | 第31-32页 |
1.4.11 除盐 | 第32-33页 |
1.4.12 线粒体的提取 | 第33-34页 |
1.4.13 RNA的提取 | 第34页 |
1.4.14 RNA电泳 | 第34-35页 |
1.4.15 反转录 | 第35页 |
1.4.16 RT-PCR | 第35-36页 |
1.4.17 免疫荧光 | 第36-37页 |
1.4.18 DNA电泳 | 第37页 |
1.4.19 切胶回收 | 第37-39页 |
1.4.20 DNA片段连接 | 第39-40页 |
1.4.21 siRNA转染肾癌细胞 | 第40页 |
1.4.22 PDH酶活性的检测 | 第40-41页 |
1.4.23 质谱鉴定及分析 | 第41-43页 |
结果 | 第43-54页 |
2.1 线粒体的提取和纯化 | 第43-45页 |
2.1.1 线粒体提取纯度的验证 | 第43-44页 |
2.1.2 显微镜下线粒体的形状 | 第44-45页 |
2.1.3 讨论 | 第45页 |
2.2 免疫共沉淀法纯化与C1QBP相互作用的蛋白 | 第45-49页 |
2.2.1 不同免疫共沉淀实验条件比较 | 第46-47页 |
2.2.2 C1QBP相互作用蛋白质组 | 第47-48页 |
2.2.3 质谱鉴定结果 | 第48-49页 |
2.2.4 讨论 | 第49页 |
2.3 与C1QBP相互作用的蛋白验证 | 第49-51页 |
2.3.1 C1QBP相互作用蛋白DLAT的Western Blot鉴定 | 第49-50页 |
2.3.2 C1QBP与其相互作用蛋白DLAT的共定位鉴定 | 第50-51页 |
2.3.3 讨论 | 第51页 |
2.4 C1QBP影响PDH酶活性 | 第51-54页 |
2.4.1 在肾癌细胞中,C1QBP影响PDH活性 | 第52-53页 |
2.4.2 讨论 | 第53-54页 |
讨论 | 第54-57页 |
结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第62-63页 |
综述 蛋白质组的研究进展 | 第63-69页 |
综述参考文献 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
个人简历 | 第70页 |