摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第11-13页 |
第2章 实验材料 | 第13-17页 |
2.1 主要试剂和耗材 | 第13-14页 |
2.2 主要仪器设备 | 第14页 |
2.3 细胞株 | 第14-15页 |
2.4 数据处理和分析 | 第15-17页 |
第3章 实验方法 | 第17-27页 |
3.1 生物信息学分析 | 第17页 |
3.2 常用液体的配制 | 第17页 |
3.3 动物模型制备 | 第17-18页 |
3.4 血脂水平的检测 | 第18页 |
3.5 油红O染色 | 第18页 |
3.6 动脉粥样硬化损害分析 | 第18页 |
3.7 细胞培养 | 第18-19页 |
3.7.1 细胞复苏 | 第18页 |
3.7.2 细胞传代 | 第18-19页 |
3.7.3 细胞冻存 | 第19页 |
3.8 Mipu1表达质粒和干扰质粒的转化和扩增 | 第19-20页 |
3.8.1 溶液的配制 | 第19-20页 |
3.8.2 受体菌的培养 | 第20页 |
3.8.3 感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第20页 |
3.8.4 质粒的转化 | 第20页 |
3.9 质粒的提取 | 第20-21页 |
3.10 Western Blot检测 | 第21-25页 |
3.10.1 蛋白质提取 | 第21-22页 |
3.10.2 BCA蛋白定量 | 第22-23页 |
3.10.3 Western Blot | 第23-25页 |
3.11 脂质聚积的检测 | 第25页 |
3.12 实验分组 | 第25-27页 |
第4章 实验结果 | 第27-45页 |
4.1 Mipu1的生物信息学分析 | 第27-33页 |
4.1.1 核酸序列分析 | 第27-29页 |
4.1.2 Mipu1的氨基酸序列 | 第29-30页 |
4.1.3 Mipu1二级结构 | 第30-31页 |
4.1.4 Mipu1三级结构 | 第31页 |
4.1.5 Mipu1功能预测 | 第31-32页 |
4.1.6 启动子区含Mipu1结合位点的清道夫受体 | 第32页 |
4.1.7 改变Mipu1表达水平对清道夫受体mRNA表达的影响 | 第32-33页 |
4.2 Mipu1在AS新西兰兔主动脉中的表达情况 | 第33-36页 |
4.2.1 高脂喂养对新西兰兔血脂水平的影响 | 第33-34页 |
4.2.2 高脂喂养促使新西兰兔主动脉AS斑块的形成 | 第34页 |
4.2.3 高脂喂养对新西兰兔主动脉Mipu1和CD36表达的影响 | 第34-36页 |
4.3 oxLDL处理RAW264.7 细胞对Mipu1和CD36表达的影响 | 第36-39页 |
4.3.1 不同浓度oxLDL处理RAW264.7细胞后Mipu1和CD36的表达 | 第36-37页 |
4.3.2 75mg/L oxLDL处理RAW264.7细胞不同时间后Mipu1和CD36的表达 | 第37-39页 |
4.4 Mipu1过表达抑制oxLDL诱导的巨噬细胞脂质聚积 | 第39-41页 |
4.4.1 转染Mipu1对RAW264.7细胞Mipu1表达的影响 | 第39页 |
4.4.2 过表达Mipu1对RAW264.7细胞内胆固醇含量的影响 | 第39-40页 |
4.4.3 过表达Mipu1对RAW264.7细胞脂质摄取的影 | 第40页 |
4.4.4 油红O染色观察过表达Mipu1对RAW264.7 细胞内脂滴的影响 | 第40-41页 |
4.5 Mipu1过表达对oxLDL处理的巨噬细胞ABCA1,ABCG1,SR-B1及CD36表达的影响 | 第41-45页 |
4.5.1 过表达Mipu1对RAW264.7细胞ABCA1 mRNA表达的影响 | 第41-42页 |
4.5.2 过表达Mipu1对RAW264.7细胞ABCG1 mRNA表达的影响 | 第42页 |
4.5.3 过表达Mipu1对RAW264.7细胞SR-B1 mRNA表达的影响 | 第42-43页 |
4.5.4 过表达Mipu1对RAW264.7细胞CD36表达的影响 | 第43-45页 |
第5章 讨论 | 第45-47页 |
第6章 结论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
综述 | 第52-65页 |
参考文献 | 第60-65页 |
攻读学位期间的科研成果 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-69页 |
附录 | 第69页 |