缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
前言 | 第16-18页 |
文献回顾 | 第18-28页 |
第一部分 优化可以诱导间充质干细胞转分化肝细胞样细胞MIRNA组合 | 第28-46页 |
1 材料和仪器 | 第28-30页 |
1.1 细胞 | 第28页 |
1.2 生化试剂以及耗材 | 第28-29页 |
1.3 主要仪器以及设备 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-38页 |
2.1 脐带间充质干细胞鉴定 | 第30-32页 |
2.2 活细胞计数 | 第32页 |
2.3 microRNA模拟物转染 | 第32-33页 |
2.4 Trizol法提取细胞RNA | 第33-34页 |
2.5 RNA浓度测定及反转录 | 第34-35页 |
2.6 荧光定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction, RT -PCR) | 第35-37页 |
2.7 PAS染色 | 第37页 |
2.8 LDL摄取试验 | 第37-38页 |
2.9 ICG摄取试验 | 第38页 |
2.10 尿素合成实验 | 第38页 |
3 实验结果 | 第38-44页 |
3.1 脐带MSCs表面分子和分化潜能鉴定 | 第38-39页 |
3.2 明确5种microRNA转染诱导MSC转分化为HLC | 第39-42页 |
3.3 4种microRNA转染不能诱导MSC转分化为HLC | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
第二部分 肝细胞样细胞在急性肝损伤和急性肝衰竭动物模型中的作用 | 第46-58页 |
1 材料和仪器 | 第46-48页 |
1.1 动物 | 第46页 |
1.2 主要试剂以及耗材 | 第46-47页 |
1.3 主要仪器以及设备 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-52页 |
2.1 诱导裸鼠急性肝损伤模型 | 第48页 |
2.2 诱导裸鼠急性肝衰竭 | 第48页 |
2.3 腹腔注射 | 第48-49页 |
2.4 细胞移植—尾静脉注射 | 第49页 |
2.5 裸鼠眼球取血收集血清 | 第49页 |
2.6 制作肝组织石蜡切片 | 第49-50页 |
2.7 制作肝组织冰冻切片 | 第50页 |
2.8 H&E染色 | 第50-51页 |
2.9 苦味酸天狼星红胶原染色 | 第51页 |
2.10 免疫荧光染色 | 第51-52页 |
3 结果 | 第52-56页 |
3.1 成功建立裸鼠急性肝损伤 | 第52-53页 |
3.2 HLC-5 细胞移植可以缓解裸鼠急性肝损伤 | 第53-54页 |
3.3 成功建立裸鼠急性肝衰竭 | 第54页 |
3.4 HLC-5 移植可以显著延长急性肝衰竭裸鼠的生存时间 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
个人简历和研究成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |