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microRNA介导人脐带间充质干细胞转分化为肝细胞样细胞的组合优化与验证

缩略语表第5-7页
中文摘要第7-11页
ABSTRACT第11-15页
前言第16-18页
文献回顾第18-28页
第一部分 优化可以诱导间充质干细胞转分化肝细胞样细胞MIRNA组合第28-46页
    1 材料和仪器第28-30页
        1.1 细胞第28页
        1.2 生化试剂以及耗材第28-29页
        1.3 主要仪器以及设备第29-30页
    2 实验方法第30-38页
        2.1 脐带间充质干细胞鉴定第30-32页
        2.2 活细胞计数第32页
        2.3 microRNA模拟物转染第32-33页
        2.4 Trizol法提取细胞RNA第33-34页
        2.5 RNA浓度测定及反转录第34-35页
        2.6 荧光定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction, RT -PCR)第35-37页
        2.7 PAS染色第37页
        2.8 LDL摄取试验第37-38页
        2.9 ICG摄取试验第38页
        2.10 尿素合成实验第38页
    3 实验结果第38-44页
        3.1 脐带MSCs表面分子和分化潜能鉴定第38-39页
        3.2 明确5种microRNA转染诱导MSC转分化为HLC第39-42页
        3.3 4种microRNA转染不能诱导MSC转分化为HLC第42-44页
    4 讨论第44-46页
第二部分 肝细胞样细胞在急性肝损伤和急性肝衰竭动物模型中的作用第46-58页
    1 材料和仪器第46-48页
        1.1 动物第46页
        1.2 主要试剂以及耗材第46-47页
        1.3 主要仪器以及设备第47-48页
    2 方法第48-52页
        2.1 诱导裸鼠急性肝损伤模型第48页
        2.2 诱导裸鼠急性肝衰竭第48页
        2.3 腹腔注射第48-49页
        2.4 细胞移植—尾静脉注射第49页
        2.5 裸鼠眼球取血收集血清第49页
        2.6 制作肝组织石蜡切片第49-50页
        2.7 制作肝组织冰冻切片第50页
        2.8 H&E染色第50-51页
        2.9 苦味酸天狼星红胶原染色第51页
        2.10 免疫荧光染色第51-52页
    3 结果第52-56页
        3.1 成功建立裸鼠急性肝损伤第52-53页
        3.2 HLC-5 细胞移植可以缓解裸鼠急性肝损伤第53-54页
        3.3 成功建立裸鼠急性肝衰竭第54页
        3.4 HLC-5 移植可以显著延长急性肝衰竭裸鼠的生存时间第54-56页
    4 讨论第56-58页
小结第58-59页
参考文献第59-67页
个人简历和研究成果第67-68页
致谢第68页

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