摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第17-26页 |
1 TGF-β 信号通路的研究 | 第17-20页 |
1.1 TGF-β 信号通路的发现 | 第17-18页 |
1.2 TGF-β-Smad信号转导通路 | 第18-19页 |
1.3 TGF-β 及其受体的作用 | 第19-20页 |
2 果蝇中TGF-β 家族成员dpp基因的研究 | 第20-22页 |
3 果蝇中TGF-β 家族成员daw基因的研究 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-26页 |
第二章 研究目的与研究内容 | 第26-29页 |
1 研究目的和意义 | 第26-27页 |
2 研究的主要内容 | 第27-28页 |
2.1 家蚕 TGF-β 超家族成员基因 Bmdpp 和 Bmdaw 的克隆及序列分析 | 第27页 |
2.2 家蚕 TGF-β 超家族基因 Bmdpp 和 Bmdaw 的组织表达谱分析 | 第27页 |
2.3 家蚕 TGF-β 超家族基因 Bmdpp 和 Bmdaw 的亚细胞定位 | 第27页 |
2.4 病原微生物刺激对 Bmdpp 和 Bmdaw 表达水平的影响 | 第27页 |
2.5 调节 Bmdpp 和 Bmdaw 基因表达对 Bm NPV、Bm CPV 增殖的影响 | 第27页 |
2.6 调节 Bmdpp 和 Bmdaw 基因表达对 Toll、Imd、JAK/STAT 和 RNAi 通路影响 | 第27页 |
2.7 Bmdpp 和 Bmdaw 相互作用蛋白筛选与鉴定 | 第27-28页 |
3 技术路线 | 第28-29页 |
第三章 家蚕TGF-β 基因家族成员Bmdpp和Bmdaw的克隆及序列分析 | 第29-45页 |
1 引言 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-38页 |
2.1 实验材料 | 第30-32页 |
2.2 常用仪器 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-38页 |
3 结果与分析 | 第38-42页 |
3.1 家蚕Bmdpp和Bmdaw基因的克隆与序列测定 | 第38-39页 |
3.2 Bmdpp和Bmdaw的结构域分析 | 第39-40页 |
3.3 家蚕Bmdpp和Bmdaw基因的高级结构分析 | 第40-41页 |
3.4 家蚕TGF-β 信号通路主要组件的信号肽序列分析 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
第四章 家蚕TGF-β 信号通路基因Bmdpp和Bmdaw的表达谱分析 | 第45-52页 |
1 引言 | 第45-46页 |
2 材料与方法 | 第46-47页 |
2.1 材料与主要试剂 | 第46页 |
2.2 实验方法 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-50页 |
3.1 基于microarray数据库的Bmdpp和Bmdaw的表达谱分析 | 第47-48页 |
3.2 Bmdpp和Bmdaw基因在五龄第3天家蚕不同组织的表达谱分析 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-52页 |
第五章Bmdpp和Bmdaw的多克隆抗体制备及亚细胞定位 | 第52-65页 |
1 引言 | 第52页 |
2 材料与方法 | 第52-58页 |
2.1 材料与试剂 | 第52-53页 |
2.2 主要实验试剂的配制 | 第53-55页 |
2.3 实验方法 | 第55-58页 |
3 结果与分析 | 第58-63页 |
3.1 Bmdpp和Bmdaw基因表达载体的构建 | 第58-59页 |
3.2 大肠杆菌表达Bmdpp和Bmdaw多抗的特异性检测 | 第59-61页 |
3.3 Bmdpp和Bmdaw的亚细胞定位 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63页 |
参考文献 | 第63-65页 |
第六章Bmdpp和Bmdaw基因对病原微生物感染应答 | 第65-82页 |
1 引言 | 第65-66页 |
2 材料与方法 | 第66-69页 |
2.1 材料和主要试剂 | 第66-67页 |
2.2 实验方法 | 第67-69页 |
3 实验结果 | 第69-79页 |
3.1 细胞水平Bmdpp和Bmdaw对病原微生物及LPS的感染应答 | 第69-74页 |
3.1.1 Bmdpp对LPS和bab刺激的应答 | 第69-70页 |
3.1.2 Bmdpp对病毒感染的应答 | 第70-71页 |
3.1.3 Bmdaw对LPS和bab刺激的应答 | 第71-73页 |
3.1.4 Bmdaw对病毒感染的应答 | 第73-74页 |
3.2 家蚕个体水平Bmdpp和Bmdaw对病原微生物感染应答 | 第74-79页 |
4 讨论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-82页 |
第七章 调节Bmdpp和Bmdaw基因表达对BmNPV、BmCPV增殖的影响 | 第82-98页 |
1 引言 | 第82-83页 |
2.材料方法 | 第83-86页 |
2.1 材料 | 第83页 |
2.2 实验方法 | 第83-86页 |
3 结果与分析 | 第86-96页 |
3.1 pIZT/V5-His-dpp、pIZT/V5-His-daw的酶切鉴定 | 第86-87页 |
3.2 转染细胞的筛选 | 第87-88页 |
3.3 稳定转化细胞中Bmdpp和Bmdaw表达的鉴定 | 第88-90页 |
3.4 不同siRNA在BmN细胞中对Bmdpp和Bmdaw基因的沉默效果 | 第90-92页 |
3.5 过表达Bmdpp和Bmdaw基因对BmCPV和BmNPV BmN细胞增殖的影响 | 第92-93页 |
3.6 沉默Bmdpp和Bmdaw基因对BmCPV和BmNPV BmN细胞增殖的影响 | 第93-94页 |
3.7 过表达和沉默Bmdpp和Bmdaw基因的BmN细胞中BmNPV、BmCPV蛋白的检测 | 第94-96页 |
4 讨论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-98页 |
第八章 调节Bmdpp和Bmdaw基因表达对其他通路关键基因表达水平的影响 | 第98-108页 |
1 引言 | 第98-99页 |
2 材料方法 | 第99-100页 |
2.1 材料 | 第99页 |
2.2 实验方法 | 第99-100页 |
3 结果与分析 | 第100-104页 |
3.1 过表达Bmdpp基因对相关通路基因表达的影响 | 第100-102页 |
3.2 过表达Bmdaw基因对相关通路基因表达的影响 | 第102-104页 |
4 讨论 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-108页 |
第九章 Bmdpp和Bmdaw相互作用蛋白的筛选与鉴定 | 第108-120页 |
1 引言 | 第108页 |
2 材料与方法 | 第108-111页 |
2.1 实验材料 | 第108-109页 |
2.2 实验方法 | 第109-111页 |
3.实验结果 | 第111-116页 |
3.1 Co-IP及质谱分析 | 第111-112页 |
3.2 Bmdpp和Bmdaw互作宿主蛋白的筛选与鉴定 | 第112-113页 |
3.3 候选蛋白的功能分析 | 第113-116页 |
4 讨论 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-120页 |
结论 | 第120-121页 |
附录一 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第121-122页 |
附录二 英文简写对照表 | 第122-123页 |
附录三 质谱Bsaepeak图 | 第123-126页 |
致谢 | 第126-128页 |