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容积敏感性氯通道通过自噬调节心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制

缩略语表第5-7页
中文摘要第7-11页
ABSTRACT第11-14页
前言第15-16页
文献回顾第16-25页
第一部分 构建在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型第25-32页
    1 材料第25-26页
        1.1 主要仪器第25-26页
        1.2 主要试剂第26页
    2 方法第26-28页
        2.1 主要试剂配制第26页
        2.2 构建在体大鼠缺血/再灌注心肌梗死模型的方案第26-27页
        2.3 实验分组第27页
        2.4 心肌酶测定第27页
        2.5 TTC心肌组织染色第27页
        2.6 心脏超声心功能检测第27-28页
        2.7 统计学方法第28页
    3 结果第28-30页
        3.1 缺血/再灌注损伤对大鼠心肌梗死面积的影响第28页
        3.2 缺血/再灌注损伤对大鼠心脏功能的影响第28-29页
        3.3 缺血/再灌注对大鼠心肌损伤指标的影响第29-30页
    4 讨论第30-31页
    小结第31-32页
第二部分DCPIB对心脏缺血/再灌注损伤过程中自噬水平的影响第32-48页
    1 材料第32-33页
        1.1 主要仪器第32-33页
        1.2 主要试剂第33页
    2 方法第33-37页
        2.1 在体心脏缺血/再灌注损伤模型的建立第33页
        2.2 实验分组第33-34页
        2.3 心肌组织损伤程度的检测第34页
        2.4 心肌自噬水平、相关蛋白及炎性指标的检测第34-37页
        2.5 统计学方法第37页
    3 结果第37-45页
        3.1 DCPIB对心脏缺血/再灌注心肌损伤的影响第37-40页
        3.2 DCPIB对心脏缺血/再灌注损伤心肌过程中自噬水平的调控第40-45页
    4 讨论第45-47页
    小结第47-48页
第三部分 构建模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞的模型第48-55页
    1 材料第48-49页
        1.1 主要仪器第48-49页
        1.2 主要试剂第49页
    2 方法第49-51页
        2.1 实验前液体配制第49-50页
        2.2 原代乳鼠心肌细胞培养和鉴定第50-51页
        2.3 构建模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞方案第51页
        2.4 离体缺血/再灌注损伤模型分组第51页
        2.5 统计学方法第51页
    3 结果第51-53页
        3.1 心肌细胞形态学观察及纯度鉴定第51-52页
        3.2 心肌细胞存活率第52-53页
    4 讨论第53-54页
    小结第54-55页
第四部分DCPIB对缺血/再灌注损伤心肌细胞自噬的调控及机制第55-81页
    1 材料第55-57页
        1.1 主要仪器第55-56页
        1.2 主要试剂第56-57页
    2 方法第57-66页
        2.1 试剂配制第57页
        2.2 乳鼠心肌细胞培养第57-58页
        2.3 离体心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤模型的建立第58页
        2.4 心肌细胞分组第58页
        2.5 全细胞膜片钳检测H2O2对心肌细胞VSOR Cl-电流的影响及DCPIB干预第58页
        2.6 细胞免疫荧光法检测LAMP2、LC3蛋白在心肌细胞中的表达第58-59页
        2.7 缺血/再灌注对心肌细胞内ROS水平、凋亡和细胞存活率的影响第59页
        2.8 蛋白印迹法检测心肌细胞相关自噬蛋白第59-61页
        2.9 RNA提取和RT-PCR第61-64页
        2.10 Beclin1-siRNA对I/R心肌细胞自噬的影响第64-65页
        2.11 统计学方法第65-66页
    3 结果第66-76页
        3.1 DCPIB对H2O2刺激心肌细胞ICl,Vol电流的影响第66-67页
        3.2 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞LAMP2、LC3水平的影响第67页
        3.3 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞Beclin1的mRNA表达的影响第67-68页
        3.4 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞ROS水平的影响第68-69页
        3.5 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响第69-70页
        3.6 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞存活率的影响第70-71页
        3.7 H_2O_2与DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞LAMP2和LC3水平的影响第71-72页
        3.8 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞LAMP2、NF-κB和自噬水平的影响第72-73页
        3.9 Beclin1siRNA对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞自噬水平的影响第73-76页
    4 讨论第76-80页
    小结第80-81页
参考文献第81-89页
个人简历和研究成果第89-90页
致谢第90-91页

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