缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第15-16页 |
文献回顾 | 第16-25页 |
第一部分 构建在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型 | 第25-32页 |
1 材料 | 第25-26页 |
1.1 主要仪器 | 第25-26页 |
1.2 主要试剂 | 第26页 |
2 方法 | 第26-28页 |
2.1 主要试剂配制 | 第26页 |
2.2 构建在体大鼠缺血/再灌注心肌梗死模型的方案 | 第26-27页 |
2.3 实验分组 | 第27页 |
2.4 心肌酶测定 | 第27页 |
2.5 TTC心肌组织染色 | 第27页 |
2.6 心脏超声心功能检测 | 第27-28页 |
2.7 统计学方法 | 第28页 |
3 结果 | 第28-30页 |
3.1 缺血/再灌注损伤对大鼠心肌梗死面积的影响 | 第28页 |
3.2 缺血/再灌注损伤对大鼠心脏功能的影响 | 第28-29页 |
3.3 缺血/再灌注对大鼠心肌损伤指标的影响 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30-31页 |
小结 | 第31-32页 |
第二部分DCPIB对心脏缺血/再灌注损伤过程中自噬水平的影响 | 第32-48页 |
1 材料 | 第32-33页 |
1.1 主要仪器 | 第32-33页 |
1.2 主要试剂 | 第33页 |
2 方法 | 第33-37页 |
2.1 在体心脏缺血/再灌注损伤模型的建立 | 第33页 |
2.2 实验分组 | 第33-34页 |
2.3 心肌组织损伤程度的检测 | 第34页 |
2.4 心肌自噬水平、相关蛋白及炎性指标的检测 | 第34-37页 |
2.5 统计学方法 | 第37页 |
3 结果 | 第37-45页 |
3.1 DCPIB对心脏缺血/再灌注心肌损伤的影响 | 第37-40页 |
3.2 DCPIB对心脏缺血/再灌注损伤心肌过程中自噬水平的调控 | 第40-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
小结 | 第47-48页 |
第三部分 构建模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞的模型 | 第48-55页 |
1 材料 | 第48-49页 |
1.1 主要仪器 | 第48-49页 |
1.2 主要试剂 | 第49页 |
2 方法 | 第49-51页 |
2.1 实验前液体配制 | 第49-50页 |
2.2 原代乳鼠心肌细胞培养和鉴定 | 第50-51页 |
2.3 构建模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞方案 | 第51页 |
2.4 离体缺血/再灌注损伤模型分组 | 第51页 |
2.5 统计学方法 | 第51页 |
3 结果 | 第51-53页 |
3.1 心肌细胞形态学观察及纯度鉴定 | 第51-52页 |
3.2 心肌细胞存活率 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-54页 |
小结 | 第54-55页 |
第四部分DCPIB对缺血/再灌注损伤心肌细胞自噬的调控及机制 | 第55-81页 |
1 材料 | 第55-57页 |
1.1 主要仪器 | 第55-56页 |
1.2 主要试剂 | 第56-57页 |
2 方法 | 第57-66页 |
2.1 试剂配制 | 第57页 |
2.2 乳鼠心肌细胞培养 | 第57-58页 |
2.3 离体心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤模型的建立 | 第58页 |
2.4 心肌细胞分组 | 第58页 |
2.5 全细胞膜片钳检测H2O2对心肌细胞VSOR Cl-电流的影响及DCPIB干预 | 第58页 |
2.6 细胞免疫荧光法检测LAMP2、LC3蛋白在心肌细胞中的表达 | 第58-59页 |
2.7 缺血/再灌注对心肌细胞内ROS水平、凋亡和细胞存活率的影响 | 第59页 |
2.8 蛋白印迹法检测心肌细胞相关自噬蛋白 | 第59-61页 |
2.9 RNA提取和RT-PCR | 第61-64页 |
2.10 Beclin1-siRNA对I/R心肌细胞自噬的影响 | 第64-65页 |
2.11 统计学方法 | 第65-66页 |
3 结果 | 第66-76页 |
3.1 DCPIB对H2O2刺激心肌细胞ICl,Vol电流的影响 | 第66-67页 |
3.2 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞LAMP2、LC3水平的影响 | 第67页 |
3.3 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞Beclin1的mRNA表达的影响 | 第67-68页 |
3.4 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞ROS水平的影响 | 第68-69页 |
3.5 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响 | 第69-70页 |
3.6 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞存活率的影响 | 第70-71页 |
3.7 H_2O_2与DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞LAMP2和LC3水平的影响 | 第71-72页 |
3.8 DCPIB对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞LAMP2、NF-κB和自噬水平的影响 | 第72-73页 |
3.9 Beclin1siRNA对模拟缺血/再灌注损伤心肌细胞自噬水平的影响 | 第73-76页 |
4 讨论 | 第76-80页 |
小结 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-89页 |
个人简历和研究成果 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |