| 摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| 摘要 | 第11页 |
| 前言 | 第11页 |
| 1.1 玉米炭疽病与禾谷炭疽菌 | 第11-12页 |
| 1.2 病原真菌与寄主的互作 | 第12-16页 |
| 1.2.1 基础免疫防卫反应‐ PTI | 第13-14页 |
| 1.2.2 病菌效应子触发的寄主免疫防卫反应‐ETI | 第14-16页 |
| 1.3 效应子 | 第16-18页 |
| 1.4 CFEM效应子的研究现状 | 第18-19页 |
| 1.5 本论文研究目的与意义 | 第19页 |
| 1.6 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 生物信息学鉴定禾谷炭疽菌CFEM效应子组成 | 第20-24页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-21页 |
| 2.3.1 生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.4 结果与分析 | 第21-22页 |
| 2.4.1 禾谷炭疽菌CFEM蛋白信号肽分析 | 第22页 |
| 2.4.2 禾谷炭疽菌CFEM蛋白亚细胞定位分析 | 第22页 |
| 2.5 讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 禾谷炭疽菌CFEM效应子在植物异源表达的亚细胞定位分析 | 第24-48页 |
| 3.1 引言 | 第24页 |
| 3.2 实验材料 | 第24-25页 |
| 3.2.1 植物材料、菌株和载体 | 第24页 |
| 3.2.2 主要试剂、酶、试剂盒、引物合成及测序 | 第24页 |
| 3.2.3 抗生素 | 第24-25页 |
| 3.2.4 培养基 | 第25页 |
| 3.2.5 溶液试剂 | 第25页 |
| 3.3 实验方法 | 第25-31页 |
| 3.3.1 禾谷炭疽菌M2 cDNA的获得 | 第25-27页 |
| 3.3.2 引物设计 | 第27-28页 |
| 3.3.3 T载体的构建 | 第28-30页 |
| 3.3.4 瞬时表达载体的构建 | 第30页 |
| 3.3.5 农杆菌介导的转化实验 | 第30-31页 |
| 3.4 结果与分析 | 第31-47页 |
| 3.4.1 禾谷炭疽菌CFEM效应子的表达模式分析 | 第31-32页 |
| 3.4.2 载体构建 | 第32-34页 |
| 3.4.3 效应子全长序列在植物异源表达的亚细胞定位 | 第34-41页 |
| 3.4.4 去信号肽效应子在植物异源表达的亚细胞定位 | 第41-47页 |
| 3.5 讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 禾谷炭疽菌CFEM效应子诱导或抑制细胞凋亡的功能分析 | 第48-66页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48页 |
| 4.2.1 植物材料、菌种及载体 | 第48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-49页 |
| 4.3.1 烟草注射接菌 | 第48-49页 |
| 4.4 结果与分析 | 第49-65页 |
| 4.4.1 候选CFEM效应子全长序列诱导或抑制HR分析 | 第49-56页 |
| 4.4.2 候选CFEM效应子去信号肽序列诱导或抑制HR分析 | 第56-65页 |
| 4.5 讨论 | 第65-66页 |
| 第五章 禾谷炭疽菌CFEM效应子致病性分析 | 第66-78页 |
| 5.1 引言 | 第66页 |
| 5.2 实验材料 | 第66-68页 |
| 5.2.1 植物材料、菌株和载体 | 第66页 |
| 5.2.2 主要试剂、酶、试剂盒、引物合成及测序 | 第66页 |
| 5.2.3 抗生素 | 第66-67页 |
| 5.2.4 培养基 | 第67页 |
| 5.2.5 溶液试剂 | 第67-68页 |
| 5.3 实验方法 | 第68-71页 |
| 5.3.1 禾谷炭疽菌M2基因组DNA的提取 | 第68页 |
| 5.3.2 引物设计 | 第68-69页 |
| 5.3.3 T载体的构建 | 第69页 |
| 5.3.4 pCX62基因敲除载体的构建 | 第69-70页 |
| 5.3.5 禾谷炭疽菌原生质体的制备与转化 | 第70-71页 |
| 5.3.6 禾谷炭疽菌突变体表型鉴定 | 第71页 |
| 5.4 结果与分析 | 第71-77页 |
| 5.4.1 pCX62基因敲除载体构建 | 第71-72页 |
| 5.4.2 敲除菌株的鉴定 | 第72-74页 |
| 5.4.3 敲除菌株菌落形态分析 | 第74-75页 |
| 5.4.4 敲除菌株致病表型分析 | 第75-77页 |
| 5.5 讨论 | 第77-78页 |
| 第六章 全文结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 附录 | 第85-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 作者简历 | 第89页 |
