| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 mTOR的结构和功能 | 第12-13页 |
| 1.2 mTORC1信号通路概述 | 第13-14页 |
| 1.3 氨基酸对mTORC1信号通路的调控 | 第14-17页 |
| 1.4 mTORC1信号通路引起的疾病 | 第17-19页 |
| 1.5 CASTOR家族的相关背景 | 第19-23页 |
| 1.5.1 CASTOR蛋白概述 | 第19-21页 |
| 1.5.2 CASTOR1和精氨酸复合物的功能研究 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 载体和细胞株 | 第23页 |
| 2.1.2 常用试剂和试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.1.3 常用仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验流程 | 第25-35页 |
| 2.2.1 表达载体的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.2 目的蛋白的表达和纯化 | 第28-31页 |
| 2.2.3 蛋白质浓度的测定 | 第31页 |
| 2.2.4 溶液中蛋白样品的均一性和分子量分析 | 第31页 |
| 2.2.5 蛋白质样品的晶体筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.6 通过脱水处理的方法提高晶体的衍射分辨率 | 第32-33页 |
| 2.2.7 晶体衍射数据的收集和处理 | 第33页 |
| 2.2.8 晶体结构的解析 | 第33-34页 |
| 2.2.9 体外相互作用分析 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果 | 第35-57页 |
| 3.1 CASTOR1和精氨酸的晶体结构分析 | 第35-46页 |
| 3.1.1 CASTOR1的表达和纯化 | 第35-36页 |
| 3.1.2 CASTOR2的表达和纯化 | 第36-38页 |
| 3.1.3 CASTOR1-CASTOR2复合物的表达和纯化 | 第38-39页 |
| 3.1.4 CASTOR1-arginine复合物的结晶 | 第39-42页 |
| 3.1.5 CASTOR1-arginine复合物的结构 | 第42-46页 |
| 3.2 CASTOR1和精氨酸的结合分析 | 第46-52页 |
| 3.2.1 精氨酸的结合位点 | 第46-48页 |
| 3.2.2 CASTOR1和精氨酸相互作用位点上的关键氨基酸残基 | 第48-50页 |
| 3.2.3 CASTOR1和CASTOR2对精氨酸敏感性的区别 | 第50-52页 |
| 3.3 CASTOR1的结构与同源结构的比较 | 第52-55页 |
| 3.4 尝试其他结构的结晶和解析 | 第55-57页 |
| 第四章 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 晶体结构的Protein Data Bank入库号 | 第63-64页 |
| 作者在攻读硕士学位期间公开发表的文章 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
