| 中文摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-20页 |
| 参考文献 | 第17-20页 |
| 第一部分 人胃癌组织样本中maspin的表达及人胃癌MGC-803/maspin~-细胞株的构建 | 第20-35页 |
| 1 材料 | 第20-25页 |
| 1.1 组织样本 | 第20页 |
| 1.2 siRNA | 第20页 |
| 1.3 转染试剂 | 第20页 |
| 1.4 细胞 | 第20-21页 |
| 1.5 实验试剂 | 第21-22页 |
| 1.6 引物 | 第22页 |
| 1.7 仪器及耗材 | 第22-24页 |
| 1.8 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-28页 |
| 2.1 免疫组化 | 第25页 |
| 2.2 细胞培养 | 第25-26页 |
| 2.3 阳离子聚合物介导法转染细胞 | 第26页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR | 第26-28页 |
| 2.5 western blot | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-31页 |
| 3.1 临床胃癌样本中抑癌基因maspin的表达量 | 第28-30页 |
| 3.2 转染后MGC-803细胞中maspin RNA的表达 | 第30-31页 |
| 3.3 转染后MGC-803细胞中MASPIN蛋白的表达 | 第31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第二部分 南蛇藤提取物对人胃癌MGC-803/maspin~-细胞增殖和凋亡的影响 | 第35-57页 |
| 1 材料 | 第35-37页 |
| 1.1 药品 | 第35页 |
| 1.2 细胞株 | 第35-36页 |
| 1.3 实验试剂 | 第36页 |
| 1.4 耗材及仪器 | 第36-37页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-42页 |
| 2.1 细胞培养 | 第37页 |
| 2.2 MTT实验 | 第37-38页 |
| 2.3 倒置显微镜观察COE作用24 h后的细胞形态 | 第38页 |
| 2.4 TUNEL实验 | 第38-39页 |
| 2.5 流式检测细胞凋亡 | 第39页 |
| 2.6 JC-1检测线粒体膜电位 | 第39页 |
| 2.7 透射电镜观察细胞超微结构变化 | 第39-40页 |
| 2.8 Transwell小室迁移实验 | 第40-41页 |
| 2.9 Transwell小室侵袭实验 | 第41-42页 |
| 2.10 细胞创伤-愈合实验 | 第42页 |
| 2.11 统计学处理 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-54页 |
| 3.1 COE对MGC-803/maspin~-细胞形态的影响 | 第42-43页 |
| 3.2 透射电镜观察细胞形态 | 第43-44页 |
| 3.3 COE抑制MGC-803/maspin~-细胞的增殖 | 第44-45页 |
| 3.4 COE促进MGC-803/maspin~-细胞的凋亡 | 第45-46页 |
| 3.5 COE对MGC-803/maspin~-细胞的早期凋亡的影响 | 第46-49页 |
| 3.6 COE对MGC-803/maspin~-细胞线粒体膜电位的影响 | 第49-51页 |
| 3.7 COE抑制MGC-803/maspin~-细胞的迁移能力 | 第51-53页 |
| 3.8 COE抑制MGC-803/maspin~-细胞的侵袭能力 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第三部分 南蛇藤提取物通过maspin促进人胃癌MGC-803细胞凋亡的分子机制 | 第57-69页 |
| 1 材料 | 第57-59页 |
| 1.1 药物准备 | 第57-58页 |
| 1.2 细胞株 | 第58页 |
| 1.3 实验试剂 | 第58-59页 |
| 1.4 引物 | 第59页 |
| 1.5 耗材及仪器 | 第59页 |
| 1.6 主要试剂配制 | 第59页 |
| 2 方法 | 第59-61页 |
| 2.1 样品制备 | 第59-60页 |
| 2.2 western blot分析 | 第60-61页 |
| 2.3 实时荧光定量PCR | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-65页 |
| 3.1 COE对MASPIN蛋白和RNA表达的影响 | 第61-63页 |
| 3.2 COE对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
| 3.3 western blot检测COE对MAPK及PI3K/AKT/ mTOR信号通路的影响 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 文献综述 | 第69-78页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第79-80页 |
