| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略语 | 第15-18页 |
| 前言 | 第18-23页 |
| 研究现状、成果 | 第18-21页 |
| 研究目的、方法 | 第21-23页 |
| 一、NK细胞激活过程中染色质修饰状态发生变化 | 第23-50页 |
| 1.1 对象和方法 | 第23-38页 |
| 1.1.1 细胞、质粒和小鼠 | 第23页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 1.1.3 主要溶液、缓冲液和培养基 | 第24-28页 |
| 1.1.4 主要仪器和设备 | 第28-29页 |
| 1.1.5 实验方法及流程 | 第29-38页 |
| 1.2 结果 | 第38-47页 |
| 1.2.1 表达谱芯片分析NK细胞在激活前后基因总体表达变化 | 第38-39页 |
| 1.2.2 qPCR和Western blot验证组蛋白甲基化和组蛋白去甲基化酶的表达变化 | 第39-41页 |
| 1.2.3 ChIP-seq与表达谱芯片综合分析 | 第41-42页 |
| 1.2.4 组蛋白甲基化修饰调控NK功能相关基因 | 第42-43页 |
| 1.2.5 NK细胞激活改变组蛋白甲基化修饰状态 | 第43-45页 |
| 1.2.6 NK细胞的脱颗粒水平和细胞因子表达受甲基化修饰调控 | 第45-47页 |
| 1.3 讨论 | 第47-49页 |
| 1.4 小结 | 第49-50页 |
| 二、EZH2依赖的钙离子信号调控NK细胞脱颗粒与杀伤功能 | 第50-77页 |
| 2.1 对象和方法 | 第50-61页 |
| 2.1.1 细胞、质粒和小鼠 | 第50页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第50-52页 |
| 2.1.3 主要溶液、缓冲液和培养基 | 第52页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第52-53页 |
| 2.1.5 实验方法及流程 | 第53-61页 |
| 2.2 结果 | 第61-73页 |
| 2.2.1 抑制EZH2酶活性或表达促进NK细胞脱颗粒 | 第61-64页 |
| 2.2.2 抑制EZH2酶活性或表达下调NK细胞毒性 | 第64-65页 |
| 2.2.3 抑制EZH2酶活性不影响NK细胞长时间杀伤能力 | 第65-66页 |
| 2.2.4 抑制EZH2酶活性不影响NK细胞与靶细胞结合、免疫突触形成和毒性颗粒极化 | 第66-67页 |
| 2.2.5 EZH2活性依赖的钙离子上调可以诱导NK细胞异常毒性颗粒释放 | 第67-69页 |
| 2.2.6 异常毒性颗粒释放导致很少的靶细胞可以获得毒性颗粒 | 第69-70页 |
| 2.2.7 高通量分析抑制EZH2活性上调NK细胞钙流的分子机制 | 第70-71页 |
| 2.2.8 抑制EZH2活性上调钙离子通道PKD2的表达 | 第71-73页 |
| 2.3 讨论 | 第73-76页 |
| 2.4 小结 | 第76-77页 |
| 三、Ezh2调控小鼠NK细胞的终端成熟与抗肿瘤活性 | 第77-88页 |
| 3.1 对象和方法 | 第77-80页 |
| 3.1.1 细胞、质粒和小鼠 | 第77页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第77页 |
| 3.1.3 主要溶液、缓冲液和培养基 | 第77-78页 |
| 3.1.4 主要仪器和设备 | 第78页 |
| 3.1.5 实验方法及流程 | 第78-80页 |
| 3.2 结果 | 第80-85页 |
| 3.2.1 mEzh2条件敲除小鼠NK细胞中mEzh2表达显著降低 | 第80-81页 |
| 3.2.2 mEzh2条件敲除小鼠中NK细胞增多 | 第81-82页 |
| 3.2.3 mEzh2调控NK细胞的终端成熟 | 第82-83页 |
| 3.2.4 mEzh2缺陷促进IFN-γ 的表达 | 第83-84页 |
| 3.2.5 mEzh2条件敲除小鼠具备更强的抗肿瘤能力 | 第84-85页 |
| 3.3 讨论 | 第85-87页 |
| 3.4 小结 | 第87-88页 |
| 全文结论 | 第88-89页 |
| 论文创新点 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第100-101页 |
| 综述 NK细胞的表观遗传学调控与临床应用前景 | 第101-122页 |
| 综述参考文献 | 第111-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 个人简历 | 第123页 |
