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铜绿假单胞菌裂解性噬菌体的筛选、鉴定及应用

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
主要符号表第15-16页
1 文献综述第16-48页
    1.1 国内外水貂产业现状第16页
    1.2 水貂出血性肺炎与铜绿假单胞菌第16-20页
        1.2.1 水貂生物学特性第16-17页
        1.2.2 水貂出血性肺炎第17-18页
        1.2.3 铜绿假单胞菌第18-20页
    1.3 噬菌体的发现、分类及生物学第20-27页
        1.3.1 噬菌体的发现及主要里程碑事件第20-21页
        1.3.2 噬菌体的分类第21-24页
        1.3.3 噬菌体生物学第24-26页
        1.3.4 噬菌体作为抗菌制剂的优势第26-27页
    1.4 噬菌体控制人畜共患病病原菌第27-30页
        1.4.1 沙门氏菌第27-28页
        1.4.2 弯曲杆菌第28页
        1.4.3 单核细胞增生李斯特菌第28-29页
        1.4.4 大肠杆菌O157:H7第29-30页
        1.4.5 金黄色葡萄球菌第30页
    1.5 噬菌体控制铜绿假单胞菌研究第30-42页
        1.5.1 噬菌体控制铜绿假单胞菌的优势第31页
        1.5.2 噬菌体控制铜绿假单胞菌感染研究第31-42页
    1.6 噬菌体施用途径研究进展第42-46页
        1.6.1 非消化道施用第42-43页
        1.6.2 口服施用第43-44页
        1.6.3 局部施用第44-45页
        1.6.4 吸入施用第45-46页
    1.7 论文的选题依据及研究内容第46-48页
2 铜绿假单胞菌及其特异裂解性噬菌体的分离和生物学特性研究第48-72页
    2.1 引言第48-49页
    2.2 实验材料第49-51页
        2.2.1 菌种第49页
        2.2.2 引物合成第49页
        2.2.3 主要试剂第49-50页
        2.2.4 仪器第50页
        2.2.5 溶液配制第50-51页
    2.3 实验方法第51-56页
        2.3.1 铜绿假单胞菌的分离培养第51页
        2.3.2 生理生化指标检测第51页
        2.3.3 分子生物学鉴定第51-52页
        2.3.4 耐药性分析第52页
        2.3.5 外毒素A水平检测第52-53页
        2.3.6 非溶源性宿主菌株验证第53页
        2.3.7 噬菌体的分离第53页
        2.3.8 噬菌体的效价测定第53页
        2.3.9 噬菌体的扩增第53-54页
        2.3.10 噬菌体的纯化第54页
        2.3.11 噬菌体的形态观察第54页
        2.3.12 噬菌体的氯仿敏感实验第54页
        2.3.13 宿主谱测定第54-55页
        2.3.14 一步生长曲线第55-56页
        2.3.15 体外抑菌实验第56页
        2.3.16 噬菌体耐pH实验第56页
        2.3.17 不同温度对噬菌体效价的影响第56页
        2.3.18 统计分析第56页
    2.4 结果与分析第56-67页
        2.4.1 铜绿假单胞菌疑似菌株的分离第56-57页
        2.4.2 生理生化指标检测第57-59页
        2.4.3 16SrDNA 扩增第59页
        2.4.4 系统发育树构建第59-60页
        2.4.5 铜绿假单胞菌耐药性分析第60-61页
        2.4.6 外毒素A水平检测第61页
        2.4.7 丝裂霉素C诱导裂解实验第61-62页
        2.4.8 噬菌体分离第62页
        2.4.9 噬菌体的形态学观察第62-63页
        2.4.10 裂解谱分析第63-64页
        2.4.11 一步生长曲线第64页
        2.4.12 噬菌体的体外抑菌实验第64-65页
        2.4.13 氯仿敏感实验第65-66页
        2.4.14 pH对噬菌体稳定性的影响第66-67页
        2.4.15 不同温度对噬菌体温度的影响第67页
    2.5 讨论第67-71页
    2.6 小结第71-72页
3 铜绿假单胞菌噬菌体的全基因组分析第72-104页
    3.1 引言第72页
    3.2 实验材料与设备第72-75页
        3.2.1 实验材料第73-74页
        3.2.2 仪器第74页
        3.2.3 溶液配制第74-75页
    3.3 实验方法第75-78页
        3.3.1 噬菌体的扩增纯化及效价测定第75-76页
        3.3.2 噬菌体基因组的提取及生物信息学分析第76-78页
        3.3.3 主要结构蛋白编码基因的确定第78页
    3.4 结果与分析第78-101页
        3.4.1 噬菌体PPA-ABTNL基因组线性与环状判断第79页
        3.4.2 噬菌体PPA-ABTNL基因组碱基组成第79-81页
        3.4.3 噬菌体PPA-ABTNL基因组开放阅读框分析第81-88页
        3.4.4 噬菌体PPA-ABTNL基因组结构分析第88页
        3.4.5 tRNA编码基因预测第88页
        3.4.6 比较基因组分析第88-94页
        3.4.7 跨膜区分析第94-96页
        3.4.8 调控元件分析第96-97页
        3.4.9 主要结构蛋白基因的确定第97-101页
    3.5 讨论第101-103页
    3.6 小结第103-104页
4 采用喷雾方式施用噬菌体控制水貂出血性肺炎研究第104-115页
    4.1 引言第104页
    4.2 实验材料与设备第104-106页
        4.2.1 实验材料第105页
        4.2.2 仪器第105-106页
        4.2.3 溶液配制第106页
    4.3 实验方法第106-108页
        4.3.1 噬菌体的扩增纯化及效价测定第106-107页
        4.3.2 噬菌体粗制剂的安全性评价第107-108页
        4.3.3 超声喷雾对噬菌体效价的影响第108页
        4.3.4 噬菌体治疗水貂出血性肺炎第108页
        4.3.5 统计分析第108页
    4.4 实验结果第108-112页
        4.4.1 噬菌体粗制剂的安全性初步评价第108-109页
        4.4.2 超声喷雾对噬菌体效价的影响第109-110页
        4.4.3 噬菌体治疗水貂出血性肺炎第110-112页
    4.5 讨论第112-114页
    4.6 小结第114-115页
5 结论与展望第115-117页
    5.1 结论第115页
    5.2 创新点第115-116页
    5.3 展望第116-117页
参考文献第117-134页
附录A 序列测定与分析第134-135页
攻读博士学位期间科研项目及科研成果第135-139页
致谢第139-140页
作者简介第140-138页

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