| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 睾丸支持细胞 | 第11-13页 |
| 1.1.1 支持细胞的基本结构 | 第11页 |
| 1.1.2 支持细胞的增殖和成熟 | 第11-12页 |
| 1.1.3 支持细胞的功能 | 第12-13页 |
| 1.2 睾丸支持细胞内乳酸合成及转运 | 第13-14页 |
| 1.2.1 支持细胞内乳酸合成及转运 | 第13页 |
| 1.2.2 乳酸的作用 | 第13-14页 |
| 1.3 热应激 | 第14-16页 |
| 1.3.1 热应激概述 | 第14-15页 |
| 1.3.2 热应激对睾丸内细胞的影响 | 第15-16页 |
| 1.4 ERK1/2信号通路 | 第16-17页 |
| 1.4.1 ERK1/2信号通路概述 | 第16页 |
| 1.4.2 ERK1/2信号通路的生理功能 | 第16-17页 |
| 1.4.3 ERK1/2信号通路与热应激 | 第17页 |
| 1.5 热休克蛋白 70 | 第17-20页 |
| 1.5.1 HSP70与热应激反应 | 第18页 |
| 1.5.2 HSP70与ERK1/2信号通路 | 第18-19页 |
| 1.5.3 HSP70的其他功能 | 第19-20页 |
| 1.6 展望 | 第20-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| 第三章 试验材料与方法 | 第23-37页 |
| 3.1 试验材料 | 第23-27页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试验试剂和耗材 | 第23-25页 |
| 3.1.3 主要试验仪器 | 第25页 |
| 3.1.4 主要试验试剂的配制 | 第25-27页 |
| 3.2 试验方法 | 第27-36页 |
| 3.2.1 支持细胞的分离培养 | 第27-28页 |
| 3.2.2 支持细胞纯度鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2.3 热处理 | 第29页 |
| 3.2.4 U0126处理 | 第29页 |
| 3.2.5 RNA干扰 | 第29-30页 |
| 3.2.6 细胞活性检测 | 第30页 |
| 3.2.7 蛋白检测 | 第30-32页 |
| 3.2.8 mRNA检测 | 第32-34页 |
| 3.2.9 乳酸测定 | 第34-35页 |
| 3.2.10 LDH活性测定 | 第35-36页 |
| 3.3 统计分析 | 第36-37页 |
| 第四章 试验结果 | 第37-51页 |
| 4.1 支持细胞的分离培养 | 第37页 |
| 4.2 RNA完整性检测 | 第37-38页 |
| 4.3 荧光定量PCR扩增曲线和熔解曲线分析 | 第38-39页 |
| 4.4 热应激对ERK1/2磷酸化的影响及恢复时间的筛选 | 第39-40页 |
| 4.4.1 热应激对ERK1/2磷酸化的影响 | 第39-40页 |
| 4.4.2 热应激后细胞恢复时间的筛选 | 第40页 |
| 4.5 抑制剂U0126对热应激诱导乳酸合成量的影响 | 第40-45页 |
| 4.5.1 U0126浓度的筛选 | 第40-41页 |
| 4.5.2 U0126抑制作用的鉴定 | 第41页 |
| 4.5.3 U0126对乳酸合成的影响 | 第41-42页 |
| 4.5.4 U0126对LDH活性的影响 | 第42页 |
| 4.5.5 U0126对ERK1/2磷酸化的影响 | 第42-43页 |
| 4.5.6 U0126对HSP70蛋白表达的影响 | 第43页 |
| 4.5.7 U0126对HSP70 mRNA水平的影响 | 第43-44页 |
| 4.5.8 U0126对GLUT3和LDH A蛋白表达的影响 | 第44页 |
| 4.5.9 U0126对SLC2A3和LDH A mRNA水平的影响 | 第44-45页 |
| 4.6 ERK2 Si RNA对热诱导乳酸合成量的影响 | 第45-51页 |
| 4.6.1 ERK1及ERK2 siRNA干涉片段的筛选 | 第45-46页 |
| 4.6.2 ERK1及ERK2 siRNA干涉作用的鉴定 | 第46页 |
| 4.6.3 ERK2 siRNA对乳酸合成的影响 | 第46-47页 |
| 4.6.4 ERK2 siRNA对LDH活性的影响 | 第47页 |
| 4.6.5 ERK2 siRNA对ERK1/2磷酸化的影响 | 第47页 |
| 4.6.6 ERK2 siRNA对HSP70蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
| 4.6.7 ERK2 siRNA对HSP70 mRNA水平的影响 | 第48页 |
| 4.6.8 ERK2 siRNA对GLUT3和LDH A蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| 4.6.9 ERK2 siRNA对SLC2A3和LDH A mRNA水平的影响 | 第49-51页 |
| 第五章 讨论 | 第51-55页 |
| 第六章 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 在读期间参与的课题和发表的文章 | 第75页 |
