中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1.睾丸支持细胞概述 | 第10-13页 |
1.1 支持细胞的结构和功能 | 第10页 |
1.2 支持细胞的能量代谢 | 第10-11页 |
1.3 支持细胞乳酸的分泌 | 第11-13页 |
2.热应激的研究进展 | 第13-17页 |
2.1 热应激概述 | 第13-14页 |
2.2 热应激对机体代谢的影响 | 第14-16页 |
2.3 热应激对公猪繁殖性能的影响 | 第16-17页 |
3.AMPK的研究概况 | 第17-22页 |
3.1 AMPK的结构 | 第18-19页 |
3.2 AMPK的活性 | 第19-20页 |
3.3 AMPK与代谢调节 | 第20-22页 |
3.4 AMPK与热应激 | 第22页 |
4.结束语 | 第22-24页 |
第二章 引言 | 第24-26页 |
第三章 试验材料与方法 | 第26-42页 |
1.试验材料 | 第26-30页 |
1.1 试验材料 | 第26页 |
1.2 主要试剂 | 第26-28页 |
1.3 试剂配置 | 第28-29页 |
1.4 主要试验仪器 | 第29-30页 |
2.试验方法 | 第30-40页 |
2.1 睾丸支持细胞分离培养 | 第30-31页 |
2.2 支持细胞的纯度鉴定 | 第31-32页 |
2.3 热应激处理 | 第32页 |
2.4 AMPK过表达载体的构建 | 第32-35页 |
2.5 细胞转染 | 第35页 |
2.6 蛋白免疫印迹 | 第35-37页 |
2.7 乳酸含量测定 | 第37页 |
2.8 乳酸脱氢酶活性检测 | 第37-38页 |
2.9 荧光定量PCR | 第38-40页 |
3.统计分析 | 第40-42页 |
第四章 试验结果 | 第42-54页 |
1.支持细胞的分离、培养和纯度鉴定 | 第42页 |
2.RNA完整性检测 | 第42-43页 |
3.荧光定量PCR扩增曲线和融解曲线分析 | 第43-44页 |
3.1 荧光定量PCR扩增曲线 | 第43页 |
3.2 荧光定量PCR熔解曲线 | 第43-44页 |
4.热应激对支持细胞乳酸分泌的影响 | 第44-45页 |
5.热应激对支持细胞AMPK磷酸化水平的影响 | 第45页 |
6. AICAR对热应激调节支持细胞乳酸分泌的影响 | 第45-49页 |
6.1 AMPK激活剂AIC AR对支持细胞内AMPK磷酸化水平的影响 | 第45-46页 |
6.2 AMPK激活剂AIC AR对支持细胞乳酸分泌量的影响 | 第46-47页 |
6.3 AMPK激活剂AIC AR对支持细胞LDH活性的影响 | 第47-48页 |
6.4 AICAR对支持细胞GLUT3、LDHA和MC T1蛋白表达的影响 | 第48页 |
6.5 AICAR对支持细胞SLC2A3、LDHA和SLC16A1表达的影响 | 第48-49页 |
7. 过表达AMPK对乳酸合成的影响 | 第49-54页 |
7.1 过表达载体pcDNA-AMPK对AMPK表达量的影响 | 第49-50页 |
7.2 过表达AMPK对支持细胞乳酸分泌量的影响 | 第50-51页 |
7.3 过表达AMPK对支持细胞LDH活性的影响 | 第51页 |
7.4 过表达AMPK对支持细胞GLUT3、LDHA和MCT1蛋白表达的影响 | 第51-52页 |
7.5 过表达AMPK对支持细胞SLC2A3、LDHA和SLC16A1表达的影响 | 第52-54页 |
第五章 讨论 | 第54-58页 |
第六章 结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-72页 |
致谢 | 第72页 |