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AMPK信号通路负向调节热应激诱导仔猪睾丸支持细胞乳酸分泌

中文摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第10-24页
    1.睾丸支持细胞概述第10-13页
        1.1 支持细胞的结构和功能第10页
        1.2 支持细胞的能量代谢第10-11页
        1.3 支持细胞乳酸的分泌第11-13页
    2.热应激的研究进展第13-17页
        2.1 热应激概述第13-14页
        2.2 热应激对机体代谢的影响第14-16页
        2.3 热应激对公猪繁殖性能的影响第16-17页
    3.AMPK的研究概况第17-22页
        3.1 AMPK的结构第18-19页
        3.2 AMPK的活性第19-20页
        3.3 AMPK与代谢调节第20-22页
        3.4 AMPK与热应激第22页
    4.结束语第22-24页
第二章 引言第24-26页
第三章 试验材料与方法第26-42页
    1.试验材料第26-30页
        1.1 试验材料第26页
        1.2 主要试剂第26-28页
        1.3 试剂配置第28-29页
        1.4 主要试验仪器第29-30页
    2.试验方法第30-40页
        2.1 睾丸支持细胞分离培养第30-31页
        2.2 支持细胞的纯度鉴定第31-32页
        2.3 热应激处理第32页
        2.4 AMPK过表达载体的构建第32-35页
        2.5 细胞转染第35页
        2.6 蛋白免疫印迹第35-37页
        2.7 乳酸含量测定第37页
        2.8 乳酸脱氢酶活性检测第37-38页
        2.9 荧光定量PCR第38-40页
    3.统计分析第40-42页
第四章 试验结果第42-54页
    1.支持细胞的分离、培养和纯度鉴定第42页
    2.RNA完整性检测第42-43页
    3.荧光定量PCR扩增曲线和融解曲线分析第43-44页
        3.1 荧光定量PCR扩增曲线第43页
        3.2 荧光定量PCR熔解曲线第43-44页
    4.热应激对支持细胞乳酸分泌的影响第44-45页
    5.热应激对支持细胞AMPK磷酸化水平的影响第45页
    6. AICAR对热应激调节支持细胞乳酸分泌的影响第45-49页
        6.1 AMPK激活剂AIC AR对支持细胞内AMPK磷酸化水平的影响第45-46页
        6.2 AMPK激活剂AIC AR对支持细胞乳酸分泌量的影响第46-47页
        6.3 AMPK激活剂AIC AR对支持细胞LDH活性的影响第47-48页
        6.4 AICAR对支持细胞GLUT3、LDHA和MC T1蛋白表达的影响第48页
        6.5 AICAR对支持细胞SLC2A3、LDHA和SLC16A1表达的影响第48-49页
    7. 过表达AMPK对乳酸合成的影响第49-54页
        7.1 过表达载体pcDNA-AMPK对AMPK表达量的影响第49-50页
        7.2 过表达AMPK对支持细胞乳酸分泌量的影响第50-51页
        7.3 过表达AMPK对支持细胞LDH活性的影响第51页
        7.4 过表达AMPK对支持细胞GLUT3、LDHA和MCT1蛋白表达的影响第51-52页
        7.5 过表达AMPK对支持细胞SLC2A3、LDHA和SLC16A1表达的影响第52-54页
第五章 讨论第54-58页
第六章 结论第58-60页
参考文献第60-72页
致谢第72页

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