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谷氨酸棒杆菌中苯酚代谢调控机制研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第10-25页
    1.1 微生物代谢芳香化合物第10-11页
    1.2 Corynebacterium glutamicum代谢芳香化合物的途径第11-12页
    1.3 C.glutamicum的β-酮己二酸途径第12-13页
    1.4 苯酚及其危害第13页
    1.5 微生物降解苯酚的途径第13-14页
    1.6 苯酚羟化酶第14-16页
        1.6.1 单亚基苯酚羟化酶第14页
        1.6.2 双亚基苯酚羟化酶第14页
        1.6.3 多亚基苯酚羟化酶第14-16页
    1.7 微生物代谢芳香化合物的调节机制第16-22页
        1.7.1 Ara C/Xyl S型调节蛋白第16-18页
        1.7.2 Ntr C/Xyl R型蛋白第18-19页
        1.7.3 Lys R型蛋白第19-20页
        1.7.4 Icl R型蛋白第20-22页
    1.8 微生物代谢苯酚的调节机制第22-24页
    1.9 研究的目的和意义第24-25页
第二章 材料和方法第25-34页
    2.1 材料第25-28页
        2.1.1 试剂第25页
        2.1.2 菌种及培养条件第25页
        2.1.3 质粒第25-28页
    2.2 方法第28-34页
        2.2.1 克隆构建第28-29页
        2.2.2 Phe R蛋白的表达与纯化第29页
        2.2.3 凝胶迁移实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay)第29-30页
        2.2.4 DNase I足迹法第30页
        2.2.5 感受态细胞的制备第30-31页
        2.2.6 基因敲除与互补第31页
        2.2.7 Quantitative real-time RT-PCR第31-33页
        2.2.8 报告基因lac Z融合菌株构建及 β-galactosidase酶活测定第33-34页
第三章 试验结果第34-44页
    3.1 Phe R 对谷氨酸棒杆菌中苯酚代谢的调控第34-37页
        3.1.1 突变体RES167Δphe R构建第34页
        3.1.2 互补菌株的构建第34-35页
        3.1.3 生理测定第35页
        3.1.4 报告基因lac Z融合菌株构建第35-36页
        3.1.5 融合启动子酶活分析Phe R对phe基因表达水平的影响第36-37页
    3.2 Phe R蛋白的异源表达及进化分析第37-39页
    3.3 Phe R对谷氨酸棒杆菌中苯酚代谢的调控机理第39-42页
    3.4 phe R基因的表达不受苯酚诱导第42-44页
第四章 结果分析与讨论第44-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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