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沙冬青种子总黄酮纯化工艺及免疫活性研究

摘要第3-5页
Summary第5-6页
缩略词英汉对照表第7-12页
第一部分 文献综述第12-23页
    1 沙冬青研究概述第12-13页
        1.1 沙冬青及其种子化学成分研究第12-13页
        1.2 沙冬青的药理活性概况第13页
    2 黄酮类化合物研究进展第13-20页
        2.1 黄酮类化合物简介第13页
        2.2 黄酮类化合物理化性质第13-14页
        2.3 黄酮类化合物基本结构及其分类第14页
        2.4 黄酮类化合物的定性检测第14-15页
        2.5 黄酮类化合物定量检测分析第15-16页
            2.5.1 分光光度法第15页
            2.5.2 气相色谱法第15-16页
            2.5.3 平面薄层色谱法第16页
            2.5.4 高效液相色谱法第16页
            2.5.5 毛细管电泳法第16页
            2.5.6 其他测定方法第16页
        2.6 黄酮类化合物的分离纯化第16-18页
            2.6.1 硅胶柱层折法第17页
            2.6.2 梯度p H萃取法第17页
            2.6.3 聚酰胺柱层析法第17页
            2.6.4 葡聚糖凝胶柱法第17-18页
            2.6.5 大孔吸附树脂法第18页
            2.6.6 高效液相色谱(HPLC)分离法第18页
        2.7 黄酮类化合物的生物活性第18-20页
            2.7.1 抗氧化及清除自由基作用第18-19页
            2.7.2 免疫调节作用第19页
            2.7.3 心脑血管保护第19-20页
            2.7.4 抗菌抗病毒作用第20页
    3 本试验研究概况第20-23页
        3.1 研究目的与意义第20-22页
        3.2 研究内容第22-23页
第二部分 试验研究第23-67页
    第一章 沙冬青种子总黄酮测定方法的建立第23-31页
        1 引言第23页
        2 材料和仪器第23-24页
            2.1 试验材料和试剂第23页
            2.2 试验仪器第23-24页
        3 试验方法第24-25页
            3.1 标准品溶液的制备第24页
            3.2 供试溶液的制备第24页
                3.2.1 沙冬青种子中总黄酮粗品制备第24页
                3.2.2 待测沙冬青总黄酮样品溶液制备第24页
            3.3 显色方法第24-25页
            3.4 最佳检测方法的建立第25页
                3.4.1 不同显色方法最大吸收波长测定第25页
                3.4.2 标准曲线的建立第25页
                3.4.3 不同显色方法精密度测定第25页
                3.4.4 各显色方法重复性测定第25页
                3.4.5 各显色方法加样回收率测定第25页
            3.5 沙冬青总黄酮纯度测定第25页
        4 结果与分析第25-29页
            4.1 不同显色方法下波长扫描结果第25-26页
            4.2 槲皮素在不同检测条件下的标准曲线第26-27页
            4.3 沙冬青种子总黄酮在不同检测条件下的方法学验证结果第27-28页
            4.4 标准曲线的绘制第28-29页
            4.5 沙冬青种子总黄酮粗提物含量测定结果第29页
        5 讨论第29-30页
        6 本章小结第30-31页
    第二章 沙冬青种子总黄酮的纯化工艺研究第31-44页
        1 引言第31页
        2 材料与仪器第31页
            2.1 试验材料第31页
            2.2 试验仪器第31页
        3 检测方法与样品配置第31-32页
            3.1 紫外分光光度法第31页
            3.2 样品溶液的制备第31-32页
        4 试验方法第32-35页
            4.1 大孔树脂预处理与装柱第32页
                4.1.1 大孔树脂试验前处理第32页
                4.1.2 大孔树脂装柱第32页
            4.2 大孔吸附树脂筛选第32-33页
            4.3 AB-8 大孔树脂吸附性能的试验第33-34页
                4.3.1 大孔吸附树脂对沙冬青种子总黄酮静态吸附动力学试验第33页
                4.3.2 样品液浓度对其吸附性能的影响第33页
                4.3.3 上样液p H值对其吸附的影响第33-34页
                4.3.4 上样液流速对其吸附效果的影响第34页
                4.3.5 AB-8 型大孔树脂动态吸附条件正交试验第34页
                4.3.6 动态吸附透过试验第34页
            4.4 AB-8 大孔树脂动态解析性能的试验第34-35页
                4.4.1 洗脱液浓度对洗脱效果的影响第34页
                4.4.2 洗脱液流速对洗脱效果的影响第34-35页
                4.4.3 洗脱液用量对洗脱效果的影响第35页
            4.5 乙酸乙酯对沙冬青种子中总黄酮萃取第35页
        5 结果与分析第35-43页
            5.1 不同型号大孔树脂对沙冬青种子总黄酮吸附率及解析率第35-36页
            5.2 AB-8 大孔树脂最佳吸附条件第36-40页
                5.2.1 AB-8 大孔树脂静态吸附平衡第36-37页
                5.2.2 最佳上样液浓度第37-38页
                5.2.3 最佳上样液p H第38页
                5.2.4 最佳上样液流速第38-39页
                5.2.5 AB-8 大孔树脂动态吸附条件正交试验结果第39-40页
                5.2.6 AB-8 大孔树脂最大吸附上样液体积第40页
            5.3 AB-8 型大孔树脂最佳洗脱条件第40-43页
                5.3.1 最佳洗脱液浓度第40-41页
                5.3.2 最佳洗脱流速第41-42页
                5.3.3 最佳洗脱液用量第42页
                5.3.4 纯化前后沙冬青种子总黄酮紫外扫描图谱第42-43页
        6 讨论第43页
        7 本章小结第43-44页
    第三章 沙冬青种子总黄酮免疫活性研究第44-67页
        1 引言第44页
        2 材料和仪器第44-45页
            2.1 试验材料第44页
            2.2 试验仪器第44-45页
        3 试验方法第45-49页
            3.1 沙冬青总黄酮对小鼠体内免疫活性调节试验第45-47页
                3.1.1 试验药物配置第45页
                3.1.2 试验小鼠造模及给药第45页
                3.1.3 免疫脏器指数的测定第45-46页
                3.1.4 细胞因子IL-2、IL-4 的测定第46页
                3.1.5 碳粒廓清率的测定第46-47页
                3.1.6 小鼠器官组织形态学结构观察第47页
            3.2 沙冬青总黄酮对小鼠脾淋巴细胞体外增殖试验第47-49页
                3.2.1 试验药物及试剂配置第47-48页
                3.2.2 脾淋巴细胞悬液的制备第48页
                3.2.3 不同浓度沙冬青种子总黄酮对脾淋巴细胞增殖试验第48页
                3.2.4 脾淋巴细胞培养及测定第48-49页
        4 结果与分析第49-63页
            4.1 小鼠免疫抑制(CTX)模型的成功复制第49-51页
            4.2 沙冬青种子总黄酮对免疫抑制小鼠体内免疫系统的激活第51-62页
                4.2.1 小鼠免疫器官指数测定结果第51-53页
                4.2.2 IL-2、IL-4 细胞因子测定结果第53-54页
                4.2.3 碳粒廓清率的测定第54-55页
                4.2.4 沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官结构的影响第55-58页
                4.2.5 沙冬青种子总黄酮对小鼠器官组织的毒性第58-62页
            4.3 沙冬青总黄酮体外对小鼠脾淋巴细胞的增殖第62-63页
        5 讨论第63-65页
        6 本章小结第65-67页
结论第67-69页
附录 1:ELSA诊断试剂盒操作过程第69-70页
附录 2 :石蜡制作及HE染色方法第70-72页
参考文献第72-78页
致谢第78-79页
作者简介第79-80页
导师简介第80-82页

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