| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-14页 |
| 1.1 粉尘螨过敏原的研究现状 | 第10-11页 |
| 1.2 螨类过敏原对过敏性哮喘的影响 | 第11-12页 |
| 1.3 螨类过敏原诱发过敏性哮喘的机制 | 第12-14页 |
| 第2章 Derf31和Derf1蛋白的诱导表达及纯化 | 第14-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-17页 |
| 2.1.1 实验主要材料 | 第14页 |
| 2.1.2 实验主要仪器设备 | 第14页 |
| 2.1.3 实验主要试剂及耗材 | 第14-15页 |
| 2.1.4 实验溶液的配制 | 第15-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-19页 |
| 2.2.1 大肠杆菌BL21感受态细胞的制备及质粒的转导 | 第17-18页 |
| 2.2.2 Derf31和Derf1重组蛋白的鉴定 | 第18页 |
| 2.2.3 Derf31和Derf1蛋白的大量表达及纯化 | 第18-19页 |
| 2.3 实验结果 | 第19-21页 |
| 2.3.1 Derf31重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第19-20页 |
| 2.3.2 Derf1重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第20-21页 |
| 2.4 讨论 | 第21-23页 |
| 第3章 尘螨过敏原Derf31诱发过敏性哮喘的机制研究 | 第23-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 3.1.1 实验主要材料 | 第23页 |
| 3.1.2 实验主要仪器设备 | 第23页 |
| 3.1.3 实验试剂及耗材 | 第23-24页 |
| 3.1.4 实验溶液的配制 | 第24-26页 |
| 3.2 实验设计流程 | 第26页 |
| 3.3 实验方法 | 第26-36页 |
| 3.3.1 细胞实验 | 第26-31页 |
| 3.3.1.1 DC2.4细胞培养及共刺激分子的检测 | 第26-27页 |
| 3.3.1.2 BMDC细胞培养 | 第27页 |
| 3.3.1.3 体外T细胞的极化 | 第27-28页 |
| 3.3.1.4 肺上皮细胞中TSLP和IL-33 的表达 | 第28-29页 |
| 3.3.1.5 肺上皮细胞总RNA提取 | 第29页 |
| 3.3.1.6 RT-PCR检测TSLP和IL-33 的表达 | 第29-30页 |
| 3.3.1.7 TSLP通路检测：A549细胞 | 第30页 |
| 3.3.1.8 TSLP通路检测：正常小鼠肺组织细胞 | 第30-31页 |
| 3.3.2 动物实验 | 第31-36页 |
| 3.3.2.1 Derf31诱导小鼠过敏性哮喘模型 | 第31页 |
| 3.3.2.2 血清特异性抗体检测 | 第31-32页 |
| 3.3.2.3 肺泡灌洗液细胞因子检测 | 第32页 |
| 3.3.2.4 脾脏组织处理 | 第32-33页 |
| 3.3.2.5 肺部组织处理 | 第33-34页 |
| 3.3.2.6 肺部组织病理切片染色 | 第34-36页 |
| 3.4 统计学处理 | 第36页 |
| 3.5 实验结果 | 第36-45页 |
| 3.5.1 Derf31通过DC细胞诱导T细胞极化 | 第36-38页 |
| 3.5.2 Derf31通过TLR2受体上调肺上皮细胞TSLP、IL-33 的表达 | 第38-39页 |
| 3.5.3 小鼠过敏性哮喘模型的建立 | 第39-42页 |
| 3.5.4 Derf31诱发小鼠嗜酸性粒细胞过敏性哮喘和TSLP、IL-33 分泌 | 第42-44页 |
| 3.5.5 Derf31活化肺部ILC2细胞 | 第44-45页 |
| 3.6 讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 结论与展望 | 第47-48页 |
| 4.1 结论 | 第47页 |
| 4.2 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第52页 |
