| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 缩略语 | 第16-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-27页 |
| 1.1 乳糖酶 | 第17-19页 |
| 1.1.1 乳糖酶简介 | 第17页 |
| 1.1.2 乳糖酶的来源及性质 | 第17-19页 |
| 1.2 乳糖不耐症 | 第19-22页 |
| 1.2.1 乳糖不耐症的病因学 | 第19-21页 |
| 1.2.2 乳糖不耐症的治疗 | 第21-22页 |
| 1.3 乳糖酶的应用 | 第22-24页 |
| 1.3.1 治疗乳糖不耐症 | 第22页 |
| 1.3.2 改良乳制品 | 第22-23页 |
| 1.3.3 生产低聚半乳糖(GOS) | 第23页 |
| 1.3.4 分析方面的应用 | 第23-24页 |
| 1.4 乳糖酶基因的异源表达 | 第24-25页 |
| 1.4.1 乳糖酶在大肠杆菌中的表达 | 第24页 |
| 1.4.2 乳糖酶在酵母中的表达 | 第24-25页 |
| 1.4.3 在其他宿主菌中的表达 | 第25页 |
| 1.5 本论文的主要研究目的及内容 | 第25-27页 |
| 第二章 lac4在大肠杆菌中的表达 | 第27-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第27页 |
| 2.1.2 工具酶 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂及培养基的配制 | 第27-28页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.2.1 模板基因组的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.2 目的基因的获得 | 第29-31页 |
| 2.2.3 载体的获得 | 第31-32页 |
| 2.2.4 酶切 | 第32-33页 |
| 2.2.5 重组质粒的构建及转化 | 第33-34页 |
| 2.2.6 乳糖酶酶活性测定 | 第34-36页 |
| 2.2.7 乳糖酶的酶学性质检测 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-59页 |
| 2.3.1 模板基因组的提取 | 第37-38页 |
| 2.3.2 重组质粒的构建 | 第38-46页 |
| 2.3.3 乳糖酶酶活检测 | 第46-49页 |
| 2.3.4 乳糖酶的酶学性质测定 | 第49-59页 |
| 2.4 本章小结 | 第59-61页 |
| 第三章 大肠杆菌发酵条件的确定 | 第61-69页 |
| 3.1 实验材料 | 第61页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第61页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第61页 |
| 3.2 实验方法 | 第61-62页 |
| 3.2.1 碳源的优化 | 第62页 |
| 3.2.2 氮源的优化 | 第62页 |
| 3.2.3 IPTG浓度的优化 | 第62页 |
| 3.2.4 诱导时间,诱导温度优化 | 第62页 |
| 3.2.5 最佳发酵条件下的乳糖酶酶活检测 | 第62页 |
| 3.3 实验结果 | 第62-67页 |
| 3.3.1 碳源的优化 | 第63页 |
| 3.3.2 氮源的优化 | 第63-64页 |
| 3.3.3 IPTG浓度的优化 | 第64-65页 |
| 3.3.4 诱导时间,诱导温度优化 | 第65-66页 |
| 3.3.5 最佳发酵条件下的乳糖酶酶活检测 | 第66-67页 |
| 3.4 本章小结 | 第67-69页 |
| 第四章 lac4在毕赤酵母中的表达 | 第69-81页 |
| 4.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 4.1.1 菌株及质粒 | 第69页 |
| 4.1.2 工具酶 | 第69页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第69-70页 |
| 4.1.4 主要培养基的配制 | 第70页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第70页 |
| 4.2 实验方法 | 第70-73页 |
| 4.2.1 表达重组子pPICZ α A-lac4的构建 | 第70-71页 |
| 4.2.2 酵母感受态的制备 | 第71-72页 |
| 4.2.3 电转化酵母细胞 | 第72页 |
| 4.2.4 重组子筛选 | 第72页 |
| 4.2.5 毕赤酵母诱导表达 | 第72-73页 |
| 4.3 实验结果 | 第73-79页 |
| 4.3.1 重组质粒pPICZ αA-lac4的构建 | 第73-76页 |
| 4.3.2 重组质粒pPICZ αA-lac4转化毕赤酵母GS115 | 第76-79页 |
| 4.4 本章小结 | 第79-81页 |
| 第五章 结论与展望 | 第81-83页 |
| 5.1 结论 | 第81-82页 |
| 5.2 展望 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 作者及导师简介 | 第89-90页 |
| 北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第90-91页 |
