| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1.1 5-氨基乙酰丙酸 | 第9-12页 |
| 1.1.1 5-氨基乙酰丙酸简介 | 第9页 |
| 1.1.2 5-氨基乙酰丙酸生物合成途径 | 第9-11页 |
| 1.1.3 5-氨基乙酰丙酸研究进展 | 第11页 |
| 1.1.4 5-氨基乙酰丙酸合成的调控策略 | 第11-12页 |
| 1.1.5 5-氨基乙酰丙酸的应用 | 第12页 |
| 1.2 血红素 | 第12-15页 |
| 1.2.1 血红素概述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 血红素的生物学功能及应用 | 第13-14页 |
| 1.2.3 血红素的生物合成途径 | 第14页 |
| 1.2.4 血红素合成途径的代谢调控 | 第14-15页 |
| 1.3 sRNA MicC | 第15-16页 |
| 1.3.1 sRNA简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 MicC | 第16页 |
| 1.4 立题依据和研究意义 | 第16-17页 |
| 1.5 本论文主要研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第18-20页 |
| 2.1.2 培养基 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要试剂、工具酶和试剂盒 | 第21页 |
| 2.2 基因hemB的突变 | 第21-24页 |
| 2.2.1 分子生物学操作方法 | 第21-22页 |
| 2.2.2 基因hemB内部定点突变 | 第22-23页 |
| 2.2.3 菌株培养条件 | 第23页 |
| 2.2.4 OD600测定 | 第23页 |
| 2.2.5 ALA浓度测定 | 第23页 |
| 2.2.6 PBGS酶活测定 | 第23-24页 |
| 2.2.7 SDS-PAGE分析 | 第24页 |
| 2.2.8 HemA酶活测定 | 第24页 |
| 2.3 sRNA MicC的表达 | 第24-25页 |
| 2.3.1 sRNA相关质粒构建 | 第24-25页 |
| 2.3.2 菌株培养方法 | 第25页 |
| 2.4 血红素合成途径基因的启动子表达分析 | 第25-26页 |
| 2.4.1 启动子鉴定相关质粒构建 | 第25-26页 |
| 2.4.2 发酵培养基对途径基因启动子表达的影响 | 第26页 |
| 2.4.3 GFP荧光强度测定 | 第26页 |
| 2.5 血红素合成途径的模块化组装 | 第26-30页 |
| 2.5.1 模块相关表达载体构建 | 第26-27页 |
| 2.5.2 模块相关重组工程菌株的构建 | 第27-28页 |
| 2.5.3 菌株培养条件 | 第28页 |
| 2.5.4 葡萄糖浓度测定 | 第28页 |
| 2.5.5 血红素浓度测定 | 第28-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-42页 |
| 3.1 基因hemB的突变 | 第30-33页 |
| 3.1.1 基因hemB内部定点突变 | 第30页 |
| 3.1.2 基因hemB不同位置的突变对ALA合成的影响 | 第30-31页 |
| 3.1.3 分析基因hemB不同位置的突变对ALA合成影响的原因 | 第31-33页 |
| 3.2 sRNA MicC的表达 | 第33-35页 |
| 3.2.1 sRNA质粒的构建 | 第33-34页 |
| 3.2.2 对ALA和血红素合成的影响 | 第34-35页 |
| 3.3 血红素合成途径基因的启动子表达分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 相关质粒构建 | 第35-36页 |
| 3.3.2 发酵培养基对各启动子表达时间和表达强度的影响 | 第36-38页 |
| 3.4 血红素合成途径的模块化组装 | 第38-42页 |
| 3.4.1 血红素合成途径的模块划分与相关载体构建 | 第38-39页 |
| 3.4.2 模块化优化合成途径强化血红素合成 | 第39-40页 |
| 3.4.3 血红素分批发酵 | 第40-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-44页 |
| 主要结论 | 第42-43页 |
| 展望 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |
