| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 马传染性贫血病毒概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 慢病毒属的构成 | 第10页 |
| 1.1.2 EIAV认知历史 | 第10-11页 |
| 1.1.3 EIAV的形态结构和理化特性 | 第11页 |
| 1.1.4 EIAV的细胞嗜性和在感染动物体内的组织分布 | 第11-12页 |
| 1.1.5 EIAV致病性 | 第12页 |
| 1.2 EIAV基因编码蛋白的分子生物学特征 | 第12-14页 |
| 1.2.1 Gag和pol蛋白 | 第12-13页 |
| 1.2.2 囊膜蛋白 | 第13页 |
| 1.2.3 调节蛋白 | 第13页 |
| 1.2.4 EIAV的非编码区—LTR | 第13-14页 |
| 1.3 EIAV疫苗的研究历史 | 第14页 |
| 1.4 马传贫弱毒疫苗免疫保护机制的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 试验材料 | 第17-19页 |
| 2.1 实验动物 | 第17页 |
| 2.2 细胞、病毒株和质粒 | 第17页 |
| 2.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.4 主要仪器与耗材 | 第17-18页 |
| 2.5 主要溶液配制 | 第18-19页 |
| 3 试验方法 | 第19-28页 |
| 3.1 免疫和攻毒 | 第19页 |
| 3.2 体温和血小板的测定 | 第19页 |
| 3.3 病毒RNA的提取 | 第19-20页 |
| 3.4 反转录 | 第20页 |
| 3.5 血浆病毒载量的测定 | 第20-21页 |
| 3.6 假病毒的包装的相关方法 | 第21-25页 |
| 3.6.1 囊膜蛋白表达质粒pcDNA-env的构建 | 第21-23页 |
| 3.6.2 EIAV囊膜蛋白的表达 | 第23-24页 |
| 3.6.3 EIAV假病毒的制备 | 第24-25页 |
| 3.7 中和抗体测定的相关方法 | 第25页 |
| 3.8 组织病料的采集保存及送检 | 第25-26页 |
| 3.8.1 病料的采取 | 第25页 |
| 3.8.2 病料固定 | 第25页 |
| 3.8.3 病料送检 | 第25-26页 |
| 3.9 组织病毒载量的确定 | 第26-28页 |
| 3.9.1 Trizol法提取组织总RNA | 第26页 |
| 3.9.2 去基因组和反转录 | 第26页 |
| 3.9.3 染料法荧光定量PCR测定组织内EIAV病毒载量 | 第26-28页 |
| 4 结果 | 第28-43页 |
| 4.1 接种马的临床体征 | 第28-30页 |
| 4.1.1 试验组免疫及攻毒后3匹试验马的临床体征 | 第28-29页 |
| 4.1.2 对照组攻毒后3匹试验马的临床体征 | 第29-30页 |
| 4.2 病毒载量结果 | 第30-32页 |
| 4.2.1 试验组免疫及攻毒后的3匹试验马血浆中的病毒载量 | 第30-31页 |
| 4.2.2 对照组攻毒后的3匹试验马血浆中的病毒载量 | 第31-32页 |
| 4.3 成功构建pcDNA-env囊膜蛋白表达质粒 | 第32-33页 |
| 4.3.1 重组囊膜表达质粒pcDNA-env的构建 | 第32-33页 |
| 4.3.2 重组囊膜表达质粒pcDNA-env的表达鉴定 | 第33页 |
| 4.4 构建重组EIAV病毒 | 第33-34页 |
| 4.5 中和抗体的检测 | 第34-36页 |
| 4.5.1 重组EIAV重组病毒的中和特异性鉴定 | 第34页 |
| 4.5.2 EIAV-Env微量中和试验 | 第34-36页 |
| 4.6 病理解剖结果 | 第36-39页 |
| 4.6.1 试验组免疫攻毒后3匹试验马的病理变化 | 第36-38页 |
| 4.6.2 对照组3匹马的病理变化 | 第38-39页 |
| 4.7 EIAV感染马主要组织器官病毒载量检测 | 第39-43页 |
| 4.7.1 试验组免疫攻毒后3匹试验马的组织病毒载量 | 第39-40页 |
| 4.7.2 对照组攻毒后3匹试验马的组织病毒载量 | 第40-43页 |
| 5 讨论 | 第43-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 7 展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
