| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第9-22页 |
| 1.1 胸腺 | 第9-15页 |
| 1.1.1 胸腺的形态结构 | 第9-10页 |
| 1.1.2 胸腺微环境 | 第10页 |
| 1.1.3 胸腺的功能 | 第10-11页 |
| 1.1.4 T细胞在胸腺中的发育成熟 | 第11-12页 |
| 1.1.5 T细胞表面分子及其功能 | 第12-13页 |
| 1.1.6 T细胞的分类和功能 | 第13-14页 |
| 1.1.7 构建人工胸腺 | 第14-15页 |
| 1.2 细胞外基质 | 第15-17页 |
| 1.2.1 胶原蛋白 | 第16页 |
| 1.2.2 弹性蛋白 | 第16页 |
| 1.2.3 硫酸氨基聚糖(sGAG) | 第16-17页 |
| 1.3 脱细胞试剂 | 第17-18页 |
| 1.3.1 化学试剂 | 第17-18页 |
| 1.3.2 生物学试剂 | 第18页 |
| 1.3.3 其他试剂 | 第18页 |
| 1.4 脱细胞方法 | 第18-19页 |
| 1.4.1 整体器官灌注法 | 第19页 |
| 1.4.2 震荡浸润法 | 第19页 |
| 1.5 ECM质量评估 | 第19-20页 |
| 1.6 ECM的应用前景和展望 | 第20-22页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 实验动物来源 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 所用试剂的配方 | 第24-25页 |
| 2.1.5 细胞培养液的配置 | 第25-26页 |
| 2.2 实验流程及方法 | 第26-38页 |
| 2.2.1 探索最佳的ECM制备条件 | 第26-27页 |
| 2.2.2 脱细胞后胸腺ECM的组织学分析 | 第27-29页 |
| 2.2.3 脱细胞后胸腺ECM的生化成分测定及分析 | 第29-32页 |
| 2.2.4 脱细胞后胸腺ECM的体内再生 | 第32-33页 |
| 2.2.5 体外3D培养细胞的获取 | 第33-34页 |
| 2.2.6 脱细胞后的胸腺ECM注细胞体外3D培养 | 第34页 |
| 2.2.7 脱细胞后的胸腺ECM注细胞体外3D培养流式细胞术检测 | 第34-35页 |
| 2.2.8 脱细胞后的胸腺ECM注细胞体外培养PCR检测 | 第35-38页 |
| 第三章 结果 | 第38-55页 |
| 3.1 不同处理时间下胸腺脱细胞后ECM组织学定性分析 | 第38-42页 |
| 3.1.1 H&E染色 | 第38-39页 |
| 3.1.2 DAPI染色 | 第39-40页 |
| 3.1.3 sGAG染色 | 第40页 |
| 3.1.4 弹性蛋白染色 | 第40-41页 |
| 3.1.5 胶原染色 | 第41-42页 |
| 3.2 不同时间处理下制备的胸腺ECM的生化成分测定 | 第42-50页 |
| 3.2.1 DNA含量和片段长度的测定 | 第42-44页 |
| 3.2.1.1 DNA含量的测定 | 第43-44页 |
| 3.2.1.2 DNA片段长度的测定 | 第44页 |
| 3.2.2 sGAG、弹性蛋白、胶原的测定 | 第44-50页 |
| 3.2.2.1 sGAG测定结果 | 第45-46页 |
| 3.2.2.2 弹性蛋白的测定结果 | 第46-48页 |
| 3.2.2.3 胶原的测定结果 | 第48-50页 |
| 3.3 脱细胞后的胸腺ECM体内移植 | 第50页 |
| 3.4 脱细胞后的胸腺ECM注细胞体外培养时间曲线 | 第50-52页 |
| 3.4.1 胸腺细胞注ECM体外3D培养时间曲线 | 第51页 |
| 3.4.2 胸腺细胞和骨髓造血干细胞注ECM体外3D培养冰冻切片 | 第51-52页 |
| 3.5 胸腺细胞注ECM体外3D培养10d荧光定量PCR检测 | 第52-53页 |
| 3.5.1 胸腺细胞注ECM体外3D培养PCR电泳检测 | 第52页 |
| 3.5.2 胸腺细胞注ECM体外3D培养RT-qPCR检测 | 第52-53页 |
| 3.6 流式细胞分析 | 第53-55页 |
| 3.6.1 胸腺细胞注ECM体外3D培养10d FCM检测 | 第53-54页 |
| 3.6.2 胸腺细胞和骨髓造血干细胞混合注ECM体外3D培养FCM | 第54-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
