符号说明 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第10-30页 |
1.1 植物胚胎发生过程 | 第10-12页 |
1.1.1 早期合子极性的建立 | 第10页 |
1.1.2 顶细胞的发育过程及胚体的形成 | 第10-11页 |
1.1.3 基细胞的发育过程 | 第11-12页 |
1.2 植物胚胎发生的分子遗传调控 | 第12-17页 |
1.2.1 胚胎顶-基轴建立的基因表达调控 | 第12-15页 |
1.2.2 胚胎辐射对称轴建立的基因表达调控 | 第15页 |
1.2.3 胚胎形态建成的基因表达调控 | 第15-16页 |
1.2.4 雌雄配子体中特异表达基因对胚胎发生过程的影响 | 第16-17页 |
1.3 茎端分生组织的结构与功能 | 第17-22页 |
1.3.1 胚胎发生过程茎端分生组织的起始与子叶分化 | 第17-18页 |
1.3.2 茎端分生组织的结构 | 第18-19页 |
1.3.3 维持茎端分生组织的分子机制 | 第19-22页 |
1.3.3.1 WUS基因在调控茎端分生组织发育过程中的作用 | 第20-21页 |
1.3.3.2 STM基因在调控茎端分生组织发育过程中的作用 | 第21-22页 |
1.4 植物根端分生组织的结构与功能 | 第22-26页 |
1.4.1 胚胎发生过程根端分生组织的起始 | 第22-24页 |
1.4.2 根端分生组织的结构 | 第24-25页 |
1.4.3 静止中心是根干细胞池的组织者 | 第25页 |
1.4.4 WOX5基因在静止中心特异表达维持干细胞的特性 | 第25-26页 |
1.4.5 SHR对静止中心的功能维持是必须的 | 第26页 |
1.5 真核生物RNA的剪切 | 第26-28页 |
1.5.1 CRM保守结构域 | 第27-28页 |
1.5.2 Ⅱ类内含子的剪切 | 第28页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-46页 |
2.1 实验材料 | 第30-32页 |
2.1.1 植物材料及生长条件 | 第30页 |
2.1.2 酶与生化试剂 | 第30页 |
2.1.3 菌株与载体 | 第30页 |
2.1.4 各种缓冲液及培养基配方 | 第30-32页 |
2.1.5 引物 | 第32页 |
2.2 实验方法 | 第32-46页 |
2.2.1 拟南芥的种植与培养 | 第32-33页 |
2.2.2 拟南芥基因组的提取与纯化 | 第33页 |
2.2.3 表达载体构建 | 第33-38页 |
2.2.3.1 PCR扩增 | 第33-34页 |
2.2.3.2 目的片段的回收与纯化 | 第34页 |
2.2.3.3 连接反应 | 第34-35页 |
2.2.3.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
2.2.3.5 大肠杆菌转化 | 第36页 |
2.2.3.6 DNA序列测定 | 第36页 |
2.2.3.7 高纯度小提质粒 | 第36-37页 |
2.2.3.8 质粒DNA的酶切鉴定 | 第37-38页 |
2.2.3.9 LR反应连入表达载体 | 第38页 |
2.2.4 农杆菌感受态细胞的制备及遗传转化 | 第38-39页 |
2.2.4.1 冻融法根癌农杆菌感受态的制备 | 第38页 |
2.2.4.2 冻融法转化农杆菌 | 第38-39页 |
2.2.5 拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定 | 第39-40页 |
2.2.5.1 PCR鉴定拟南芥突变体是否纯合 | 第39页 |
2.2.5.2 农杆菌介导的花序浸染拟南芥转化法 | 第39页 |
2.2.5.3 转基因植株的筛选及初步鉴定 | 第39-40页 |
2.2.6 拟南芥胚胎透明 | 第40页 |
2.2.7 植物总RNA的提取与纯化 | 第40-42页 |
2.2.8 RNA的反转录及cDNA第一链的合成 | 第42-43页 |
2.2.9 Quantitative Real-Time PCR分析 | 第43-44页 |
2.2.10 转基因植株的GUS染色分析 | 第44页 |
2.2.11 共聚焦显微镜观察和图像处理 | 第44页 |
2.2.12 烟草介导的瞬时转化 | 第44-45页 |
2.2.13 FM4-64 染色(MA Peflalva 2005) | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-59页 |
3.1 LOH1功能缺失突变体鉴定 | 第46-47页 |
3.2 loh1突变体的表型分析 | 第47-54页 |
3.3 突变体的互补实验及表型分析 | 第54页 |
3.4 LOH1的表达模式分析 | 第54-56页 |
3.5 LOH1蛋白结构域分析 | 第56-57页 |
3.6 LOHl蛋白的亚细胞定位 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-74页 |
致谢 | 第74页 |