| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 细胞分裂素 | 第11-16页 |
| 1.1.1 细胞分裂素的生物合成 | 第11-13页 |
| 1.1.2 细胞分裂素的运输 | 第13页 |
| 1.1.3 细胞分裂素的代谢 | 第13页 |
| 1.1.4 细胞分裂素的信号传导 | 第13-16页 |
| 1.2 植物离体芽发生的分子机理 | 第16-19页 |
| 1.2.1 植物离体芽发生分子机理的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2.2 杨树离体芽发生相关研究 | 第18-19页 |
| 1.3 植物维管形成层活动的机理 | 第19-24页 |
| 1.3.1 植物维管形成层的结构 | 第20页 |
| 1.3.2 植物形成层发生及发育 | 第20-21页 |
| 1.3.3 植物形成层活动的分子调控机制 | 第21-23页 |
| 1.3.4 细胞分裂素对形成层生长的调控机理 | 第23-24页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料和生长条件 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂和仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-42页 |
| 2.2.1 植物总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.1.1 检测RNA的质量和浓度 | 第26-27页 |
| 2.2.1.2 反转录cDNA第一链的合成 | 第27页 |
| 2.2.2 植物基因组DNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.3 Artificial microRNA沉默RR12/13基因表达载体的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.4 质粒的提取 | 第30页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备(热击法) | 第30-31页 |
| 2.2.6 大肠杆菌细胞的转化 | 第31-32页 |
| 2.2.7 目的片段和质粒DNA的酶切与回收 | 第32页 |
| 2.2.8 DNA测序 | 第32页 |
| 2.2.9 GV3101农杆菌感受态的制备 | 第32页 |
| 2.2.10 农杆菌感受态细胞的转化(电击法) | 第32-33页 |
| 2.2.11 农杆菌介导的杨树叶盘法遗传转化及抗性植株的获得 | 第33-34页 |
| 2.2.12 转基因杨树的GUS染色鉴定和石蜡切片 | 第34-35页 |
| 2.2.12.1 对转DR5：：GUS的杨树取材固定进行GUS染色 | 第34页 |
| 2.2.12.2 材料脱水、透明、浸蜡和包埋 | 第34-35页 |
| 2.2.12.3 切片 | 第35页 |
| 2.2.12.4 TBO染色 | 第35页 |
| 2.2.13 实时定量PCR分析 | 第35-36页 |
| 2.2.14 原位杂交分析 | 第36-42页 |
| 2.2.14.1 材料的固定 | 第36页 |
| 2.2.14.2 材料的包埋 | 第36-37页 |
| 2.2.14.3 切片 | 第37页 |
| 2.2.14.4 探针标记 | 第37-40页 |
| 2.2.14.5 脱蜡、消化、乙酰化和杂交 | 第40-41页 |
| 2.2.14.6 洗片 | 第41页 |
| 2.2.14.7 检测 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-54页 |
| 3.1 杨树遗传转化体系的建立 | 第42-45页 |
| 3.1.1 杨树离体芽发生系统的建立 | 第42-43页 |
| 3.1.2 杨树遗传转化体系的建立 | 第43-45页 |
| 3.2 杨树离体芽发生过程中激素响应信号的分布模式 | 第45-49页 |
| 3.2.1 生长素响应信号在杨树离体芽发生过程中的分布模式 | 第45-47页 |
| 3.2.2 细胞分裂素反应调节因子编码基因在杨树离体芽发生过程中的表达模式 | 第47-49页 |
| 3.3 细胞分裂素反应调节因子RR12和RR13调控杨树离体芽发生 | 第49-51页 |
| 3.3.1 AmiR-RR12,13转基因株系的获得 | 第49-50页 |
| 3.3.2 敲除RR12和RR13抑制了离体芽的发生 | 第50-51页 |
| 3.4 细胞分裂素反应调节因子RR12和RR13调控杨树茎的次生生长 | 第51-54页 |
| 3.4.1 RR12和RR13在杨树茎中的表达模式分析 | 第51-52页 |
| 3.4.2 RR12和RR13调控杨树茎的次生生长 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
