前言 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
主要缩略词 | 第10-13页 |
第一章 引言:植物抗病基因暨基因合成与进化技术的研究进展 | 第13-40页 |
1.1 植物抗病基因简介 | 第13-14页 |
1.2 植物抗病基因的结构特点与分类 | 第14-16页 |
1.3 植物抗病基因主要结构域NBS与LRR | 第16-17页 |
1.4 植物抗病基因的分子进化 | 第17-18页 |
1.5 植物抗病基因的克隆与分离方法 | 第18-25页 |
1.5.1 转座子标签法 | 第19-20页 |
1.5.2 图位克隆法 | 第20-24页 |
1.5.3 抗病基因同源序列法(RGA法) | 第24-25页 |
1.6 水稻抗稻瘟病基因的研究进展 | 第25-30页 |
1.6.1 水稻稻瘟病 | 第25-27页 |
1.6.2 水稻抗稻瘟病基因的研究现状 | 第27-29页 |
1.6.3 水稻稻瘟病抗性基因的克隆新思路 | 第29-30页 |
1.7 合成生物学技术与基因的人工进化技术 | 第30-38页 |
1.7.1 合成生物学技术 | 第30-34页 |
1.7.2 基因的体外人工进化技术 | 第34-38页 |
1.8 本研究的目的与意义 | 第38-40页 |
第二章 抗稻瘟病基因快速演化位点的克隆、鉴定与遗传分析 | 第40-93页 |
2.1 引言 | 第40-42页 |
2.2 材料与方法 | 第42-68页 |
2.2.1 实验材料 | 第42-44页 |
2.2.2 水稻NBS-LRR抗病基因的选择 | 第44页 |
2.2.3 水稻NBS-LRR抗病基因的克隆流程 | 第44-55页 |
2.2.4 候选NBS-LRR基因转化到土壤农杆菌 | 第55-57页 |
2.2.5 候选NBS-LRR基因对水稻感病材料的遗传转化 | 第57-63页 |
2.2.6 水稻转化植株的遗传与稻瘟病抗性鉴定 | 第63-67页 |
2.2.7 克隆基因的序列比对与进化分析 | 第67-68页 |
2.3 结果 | 第68-89页 |
2.3.1 候选NBS-LRR基因的选择 | 第68-70页 |
2.3.2 候选NBS-LRR基因的初步分析 | 第70-71页 |
2.3.3 候选NBS-LRR基因的引物设计 | 第71-72页 |
2.3.4 候选NBS-LRR基因的克隆 | 第72页 |
2.3.5 候选NBS-LRR基因对水稻感病材料的遗传转化 | 第72-74页 |
2.3.6 水稻转化植株的遗传鉴定 | 第74-75页 |
2.3.7 水稻转化系的稻瘟病抗性鉴定 | 第75-80页 |
2.3.8 水稻转化系的抗谱分析 | 第80-81页 |
2.3.9 克隆基因的遗传进化分析 | 第81-89页 |
2.4 讨论 | 第89-92页 |
2.4.1 NBS结构域在抗性建立过程中的潜在作用 | 第90-91页 |
2.4.2 水稻稻瘟病抗性的两种潜在的进化策略 | 第91-92页 |
2.5 小结 | 第92-93页 |
第三章 稻瘟病抗性基因的人工进化技术体系的建立 | 第93-129页 |
3.1 引言 | 第93-95页 |
3.2 材料与方法 | 第95-101页 |
3.2.1 实验材料 | 第95-96页 |
3.2.2 靶标NBS-LRR基因的选择 | 第96-97页 |
3.2.3 靶标NBS-LRR基因的人工进化流程 | 第97-100页 |
3.2.4 合成基因的序列比对与进化分析 | 第100-101页 |
3.3 结果 | 第101-123页 |
3.3.1 候选NBS-LRR基因的选择 | 第101-103页 |
3.3.2 候选NBS-LRR基因的克隆与抗性鉴定 | 第103-104页 |
3.3.3 候选NBS-LRR基因的表达载体构建 | 第104-108页 |
3.3.4 候选NBS-LRR基因NBS与LRR供体序列的选择 | 第108-114页 |
3.3.5 候选NBS-LRR基因供体序列的分段克隆 | 第114-116页 |
3.3.6 各LRR片段的人工诱变与体外重组 | 第116-118页 |
3.3.7 各基因片段的逐级组装 | 第118页 |
3.3.8 各组装片段与表达载体的连接 | 第118页 |
3.3.9 重组载体的转化、阳性筛选与测序验证 | 第118-122页 |
3.3.10 阳性重组载体对水稻感病材料的遗传转化与抗性鉴定 | 第122-123页 |
3.4 讨论 | 第123-128页 |
3.4.1 基因不同结构域的改造策略的选择 | 第124-125页 |
3.4.2 基因改造中供体材料的选择 | 第125-126页 |
3.4.3 基因改造体外重组技术的影响 | 第126页 |
3.4.4 水稻抗病基因资源库的建立 | 第126-128页 |
3.5 小结 | 第128-129页 |
全文结论 | 第129-130页 |
参考文献 | 第130-137页 |
附录A: 水稻遗传转化培养基的基本组分配方 | 第137-140页 |
附录B: 合成基因的LRR系统进化树 | 第140-149页 |
附录C: 合成基因转化系的稻瘟病抗性鉴定 | 第149-154页 |
博士期间发表的论文 | 第154-155页 |
致谢 | 第155-156页 |