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抗稻痕病基因快速演化位点的遗传分析与人工进化研究

前言第4-6页
摘要第6-8页
英文摘要第8-9页
主要缩略词第10-13页
第一章 引言:植物抗病基因暨基因合成与进化技术的研究进展第13-40页
    1.1 植物抗病基因简介第13-14页
    1.2 植物抗病基因的结构特点与分类第14-16页
    1.3 植物抗病基因主要结构域NBS与LRR第16-17页
    1.4 植物抗病基因的分子进化第17-18页
    1.5 植物抗病基因的克隆与分离方法第18-25页
        1.5.1 转座子标签法第19-20页
        1.5.2 图位克隆法第20-24页
        1.5.3 抗病基因同源序列法(RGA法)第24-25页
    1.6 水稻抗稻瘟病基因的研究进展第25-30页
        1.6.1 水稻稻瘟病第25-27页
        1.6.2 水稻抗稻瘟病基因的研究现状第27-29页
        1.6.3 水稻稻瘟病抗性基因的克隆新思路第29-30页
    1.7 合成生物学技术与基因的人工进化技术第30-38页
        1.7.1 合成生物学技术第30-34页
        1.7.2 基因的体外人工进化技术第34-38页
    1.8 本研究的目的与意义第38-40页
第二章 抗稻瘟病基因快速演化位点的克隆、鉴定与遗传分析第40-93页
    2.1 引言第40-42页
    2.2 材料与方法第42-68页
        2.2.1 实验材料第42-44页
        2.2.2 水稻NBS-LRR抗病基因的选择第44页
        2.2.3 水稻NBS-LRR抗病基因的克隆流程第44-55页
        2.2.4 候选NBS-LRR基因转化到土壤农杆菌第55-57页
        2.2.5 候选NBS-LRR基因对水稻感病材料的遗传转化第57-63页
        2.2.6 水稻转化植株的遗传与稻瘟病抗性鉴定第63-67页
        2.2.7 克隆基因的序列比对与进化分析第67-68页
    2.3 结果第68-89页
        2.3.1 候选NBS-LRR基因的选择第68-70页
        2.3.2 候选NBS-LRR基因的初步分析第70-71页
        2.3.3 候选NBS-LRR基因的引物设计第71-72页
        2.3.4 候选NBS-LRR基因的克隆第72页
        2.3.5 候选NBS-LRR基因对水稻感病材料的遗传转化第72-74页
        2.3.6 水稻转化植株的遗传鉴定第74-75页
        2.3.7 水稻转化系的稻瘟病抗性鉴定第75-80页
        2.3.8 水稻转化系的抗谱分析第80-81页
        2.3.9 克隆基因的遗传进化分析第81-89页
    2.4 讨论第89-92页
        2.4.1 NBS结构域在抗性建立过程中的潜在作用第90-91页
        2.4.2 水稻稻瘟病抗性的两种潜在的进化策略第91-92页
    2.5 小结第92-93页
第三章 稻瘟病抗性基因的人工进化技术体系的建立第93-129页
    3.1 引言第93-95页
    3.2 材料与方法第95-101页
        3.2.1 实验材料第95-96页
        3.2.2 靶标NBS-LRR基因的选择第96-97页
        3.2.3 靶标NBS-LRR基因的人工进化流程第97-100页
        3.2.4 合成基因的序列比对与进化分析第100-101页
    3.3 结果第101-123页
        3.3.1 候选NBS-LRR基因的选择第101-103页
        3.3.2 候选NBS-LRR基因的克隆与抗性鉴定第103-104页
        3.3.3 候选NBS-LRR基因的表达载体构建第104-108页
        3.3.4 候选NBS-LRR基因NBS与LRR供体序列的选择第108-114页
        3.3.5 候选NBS-LRR基因供体序列的分段克隆第114-116页
        3.3.6 各LRR片段的人工诱变与体外重组第116-118页
        3.3.7 各基因片段的逐级组装第118页
        3.3.8 各组装片段与表达载体的连接第118页
        3.3.9 重组载体的转化、阳性筛选与测序验证第118-122页
        3.3.10 阳性重组载体对水稻感病材料的遗传转化与抗性鉴定第122-123页
    3.4 讨论第123-128页
        3.4.1 基因不同结构域的改造策略的选择第124-125页
        3.4.2 基因改造中供体材料的选择第125-126页
        3.4.3 基因改造体外重组技术的影响第126页
        3.4.4 水稻抗病基因资源库的建立第126-128页
    3.5 小结第128-129页
全文结论第129-130页
参考文献第130-137页
附录A: 水稻遗传转化培养基的基本组分配方第137-140页
附录B: 合成基因的LRR系统进化树第140-149页
附录C: 合成基因转化系的稻瘟病抗性鉴定第149-154页
博士期间发表的论文第154-155页
致谢第155-156页

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