摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第13-25页 |
1.1 软电离方式 | 第13-15页 |
1.1.1 大气压离子化 | 第13-14页 |
1.1.2 基质辅助激光解吸电离 | 第14-15页 |
1.2 质量分析器 | 第15-17页 |
1.2.1 四极杆质谱仪 | 第15页 |
1.2.2 离子阱质谱仪 | 第15-16页 |
1.2.3 飞行时间质谱仪(TOF) | 第16页 |
1.2.4 静电场轨道阱质谱仪(Orbitrap) | 第16-17页 |
1.3 质谱在核酸分析中的应用 | 第17-21页 |
1.3.1 样品处理 | 第18页 |
1.3.2 样品预分离 | 第18页 |
1.3.3 碱基加合物的鉴定 | 第18-20页 |
1.3.4 核酸测序 | 第20-21页 |
1.4 质谱在蛋白质分析中的应用 | 第21-24页 |
1.4.1 蛋白质结构鉴定 | 第21-22页 |
1.4.2 蛋白质定量方法 | 第22-23页 |
1.4.3 蛋白质疾病标记物 | 第23-24页 |
1.5 本论文研究的构想 | 第24-25页 |
第2章 目标链DNA甲基化的超灵敏质谱检测 | 第25-38页 |
2.1 前言 | 第25-26页 |
2.2 实验部分 | 第26-28页 |
2.2.1 试剂耗材 | 第26-27页 |
2.2.2 仪器 | 第27页 |
2.2.3 基因组DNA的提取纯化 | 第27页 |
2.2.4 目标DNA的捕获及水解 | 第27页 |
2.2.5 质谱分析 | 第27页 |
2.2.6 甲基化特异性PCR | 第27-28页 |
2.3 结果与讨论 | 第28-37页 |
2.3.1 工作原理 | 第28-29页 |
2.3.2 可行性分析 | 第29-32页 |
2.3.3 方法验证 | 第32-33页 |
2.3.4 准确度及重现性 | 第33-34页 |
2.3.5 临床组织样品分析 | 第34-37页 |
2.4 小结 | 第37-38页 |
第3章 三核苷酸重复序列的高灵敏度质谱检测 | 第38-51页 |
3.1 前言 | 第38-39页 |
3.2 实验部分 | 第39-42页 |
3.2.1 试剂耗材 | 第39页 |
3.2.2 仪器 | 第39-40页 |
3.2.3 基因组DNA的提取纯化 | 第40-41页 |
3.2.4 PCR扩增体系及电泳表征 | 第41页 |
3.2.5 目标DNA的捕获及水解 | 第41-42页 |
3.2.6 质谱检测 | 第42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-50页 |
3.3.1 工作原理 | 第42-43页 |
3.3.2 可行性分析 | 第43-45页 |
3.3.3 质谱条件优化 | 第45-47页 |
3.3.4 标准曲线的建立 | 第47-49页 |
3.3.5 临床样品检测 | 第49-50页 |
3.4 小结 | 第50-51页 |
第4章 基于纳米粒子编码的蛋白质免疫质谱分析 | 第51-65页 |
4.1 前言 | 第51-52页 |
4.2 实验部分 | 第52-54页 |
4.2.1 试剂耗材 | 第52页 |
4.2.2 仪器 | 第52页 |
4.2.3 脂质体标记检测抗体 | 第52-53页 |
4.2.4 磁珠标记捕获抗体 | 第53页 |
4.2.5 目标蛋白的捕获及脂质体免疫复合物的形成 | 第53页 |
4.2.6 MADLI-TOF-MS检测 | 第53-54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-63页 |
4.3.1 工作原理 | 第54页 |
4.3.2 脂质体的表征 | 第54-58页 |
4.3.3 方法可行性 | 第58-61页 |
4.3.4 标准曲线的建立 | 第61-62页 |
4.3.5 临床样品检测 | 第62-63页 |
4.4 小结 | 第63-65页 |
第5章 基于脂质体信号放大的单分子核酸质谱分析 | 第65-85页 |
5.1 前言 | 第65-66页 |
5.2 实验部分 | 第66-68页 |
5.2.1 试剂耗材 | 第66页 |
5.2.2 仪器 | 第66页 |
5.2.3 脂质体制备 | 第66-67页 |
5.2.4 脂质体标记检测探针 | 第67页 |
5.2.5 磁珠上标记捕获探针 | 第67-68页 |
5.2.6 病毒核酸提取及超声处理 | 第68页 |
5.2.7 目标核酸的捕获及脂质体的释放 | 第68页 |
5.2.8 质谱检测 | 第68页 |
5.3 结果与讨论 | 第68-84页 |
5.3.1 工作原理 | 第68-69页 |
5.3.2 脂质体的表征 | 第69-72页 |
5.3.3 脂质体粒径的选择 | 第72-74页 |
5.3.4 PEG添加量的影响 | 第74-75页 |
5.3.5 粒子数的验证 | 第75-77页 |
5.3.6 不同浓度脂质体的ESI-MS检测 | 第77-79页 |
5.3.7 DNA目标链检测 | 第79-82页 |
5.3.8 HCV病毒核酸的检测 | 第82-84页 |
5.4 小结 | 第84-85页 |
结论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-111页 |
附录A 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第111-112页 |
致谢 | 第112页 |