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基于质谱的疾病标记物高灵敏度生物传感新方法研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 绪论第13-25页
    1.1 软电离方式第13-15页
        1.1.1 大气压离子化第13-14页
        1.1.2 基质辅助激光解吸电离第14-15页
    1.2 质量分析器第15-17页
        1.2.1 四极杆质谱仪第15页
        1.2.2 离子阱质谱仪第15-16页
        1.2.3 飞行时间质谱仪(TOF)第16页
        1.2.4 静电场轨道阱质谱仪(Orbitrap)第16-17页
    1.3 质谱在核酸分析中的应用第17-21页
        1.3.1 样品处理第18页
        1.3.2 样品预分离第18页
        1.3.3 碱基加合物的鉴定第18-20页
        1.3.4 核酸测序第20-21页
    1.4 质谱在蛋白质分析中的应用第21-24页
        1.4.1 蛋白质结构鉴定第21-22页
        1.4.2 蛋白质定量方法第22-23页
        1.4.3 蛋白质疾病标记物第23-24页
    1.5 本论文研究的构想第24-25页
第2章 目标链DNA甲基化的超灵敏质谱检测第25-38页
    2.1 前言第25-26页
    2.2 实验部分第26-28页
        2.2.1 试剂耗材第26-27页
        2.2.2 仪器第27页
        2.2.3 基因组DNA的提取纯化第27页
        2.2.4 目标DNA的捕获及水解第27页
        2.2.5 质谱分析第27页
        2.2.6 甲基化特异性PCR第27-28页
    2.3 结果与讨论第28-37页
        2.3.1 工作原理第28-29页
        2.3.2 可行性分析第29-32页
        2.3.3 方法验证第32-33页
        2.3.4 准确度及重现性第33-34页
        2.3.5 临床组织样品分析第34-37页
    2.4 小结第37-38页
第3章 三核苷酸重复序列的高灵敏度质谱检测第38-51页
    3.1 前言第38-39页
    3.2 实验部分第39-42页
        3.2.1 试剂耗材第39页
        3.2.2 仪器第39-40页
        3.2.3 基因组DNA的提取纯化第40-41页
        3.2.4 PCR扩增体系及电泳表征第41页
        3.2.5 目标DNA的捕获及水解第41-42页
        3.2.6 质谱检测第42页
    3.3 结果与讨论第42-50页
        3.3.1 工作原理第42-43页
        3.3.2 可行性分析第43-45页
        3.3.3 质谱条件优化第45-47页
        3.3.4 标准曲线的建立第47-49页
        3.3.5 临床样品检测第49-50页
    3.4 小结第50-51页
第4章 基于纳米粒子编码的蛋白质免疫质谱分析第51-65页
    4.1 前言第51-52页
    4.2 实验部分第52-54页
        4.2.1 试剂耗材第52页
        4.2.2 仪器第52页
        4.2.3 脂质体标记检测抗体第52-53页
        4.2.4 磁珠标记捕获抗体第53页
        4.2.5 目标蛋白的捕获及脂质体免疫复合物的形成第53页
        4.2.6 MADLI-TOF-MS检测第53-54页
    4.3 结果与讨论第54-63页
        4.3.1 工作原理第54页
        4.3.2 脂质体的表征第54-58页
        4.3.3 方法可行性第58-61页
        4.3.4 标准曲线的建立第61-62页
        4.3.5 临床样品检测第62-63页
    4.4 小结第63-65页
第5章 基于脂质体信号放大的单分子核酸质谱分析第65-85页
    5.1 前言第65-66页
    5.2 实验部分第66-68页
        5.2.1 试剂耗材第66页
        5.2.2 仪器第66页
        5.2.3 脂质体制备第66-67页
        5.2.4 脂质体标记检测探针第67页
        5.2.5 磁珠上标记捕获探针第67-68页
        5.2.6 病毒核酸提取及超声处理第68页
        5.2.7 目标核酸的捕获及脂质体的释放第68页
        5.2.8 质谱检测第68页
    5.3 结果与讨论第68-84页
        5.3.1 工作原理第68-69页
        5.3.2 脂质体的表征第69-72页
        5.3.3 脂质体粒径的选择第72-74页
        5.3.4 PEG添加量的影响第74-75页
        5.3.5 粒子数的验证第75-77页
        5.3.6 不同浓度脂质体的ESI-MS检测第77-79页
        5.3.7 DNA目标链检测第79-82页
        5.3.8 HCV病毒核酸的检测第82-84页
    5.4 小结第84-85页
结论第85-87页
参考文献第87-111页
附录A 攻读博士学位期间发表的学术论文目录第111-112页
致谢第112页

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