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单增李斯特菌双组分系统应答调节蛋白基因RS11565的功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表(Abbreviation)第10-11页
1 文献综述第11-20页
   ·单增李斯特菌简介第11-13页
     ·基本特性第11页
     ·流行病学特征第11-12页
     ·临床症状第12-13页
     ·治疗与防治第13页
   ·单增李斯特菌毒力因子与侵染细胞机制第13-15页
     ·毒力因子第13-14页
     ·侵染细胞机制第14-15页
   ·单增李斯特菌双组分信号转导系统第15-18页
     ·双组分信号转导系统的基本特性第15-16页
     ·双组分信号转导系统的调控机制第16-17页
     ·双组分信号转导系统的网络调控第17页
     ·单增李斯特菌双组分信号转导系统的研究现状第17-18页
   ·生物信息学在细菌双组分系统研究中的应用第18-19页
   ·秀丽隐杆线虫在Lm致病性和毒力研究中的应用第19-20页
2 研究目的和意义第20-21页
3 材料与方法第21-34页
   ·材料第21-25页
     ·菌种和质粒第21页
     ·实验动物和细胞系第21-22页
     ·主要器材第22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·主要溶液配制第23-24页
     ·生物信息学分析软件第24页
     ·引物第24-25页
   ·方法第25-34页
     ·LM201双组分信号转导系统预测第25页
     ·LM201的RS11565基因左右臂的克隆与鉴定第25-27页
     ·重组自杀性质粒的构建第27-29页
     ·Δ RS11565突变菌株的构建第29-31页
     ·Δ RS11565突变菌株生长曲线的测定第31页
     ·Δ RS11565突变菌株生化特性的鉴定第31页
     ·Δ RS11565突变菌株对C. elegans N2的毒力测定第31页
     ·Δ RS11565突变菌株对小鼠的毒力测定第31-32页
     ·Δ RS11565突变菌株对Caco-2 细胞的黏附和侵袭实验第32-33页
     ·RAW264.7 细胞对Δ RS11565突变菌株的吞噬实验第33-34页
4 结果与分析第34-56页
   ·LM201中TCS的生物信息学分析第34-44页
     ·LM201中TCSs的统计第34-36页
     ·LM201中组氨酸激酶HK的系统进化树的构建与分析第36-37页
     ·LM201中应答调节蛋白RR的系统进化树的构建与分析第37-38页
     ·LM201中组氨酸激酶HK的结构域组成与分类第38-41页
     ·LM201中应答调节蛋白RR的结构域组成与分类第41-42页
     ·LM201的TCSs的功能预测第42-44页
   ·LM201中RS11570/RS11565基因结构特征分析第44-48页
   ·Δ RS11565突变菌株的构建第48-50页
     ·同源臂的克隆和氯霉素抗性基因(cat)的扩增第48页
     ·同源臂与cat基因片段的连接第48-49页
     ·重组自杀质粒p3007的构建与鉴定第49页
     ·Δ RS11565突变菌株的鉴定第49-50页
   ·Δ RS11565突变菌株生长曲线的测定第50-51页
   ·Δ RS11565突变菌株生化特性的鉴定第51页
   ·Δ RS11565突变菌株对C. elegans N2的毒力测定第51-53页
   ·Δ RS11565突变菌株对小鼠的毒力测定第53-54页
     ·小鼠半数致死量(LD50)的测定第53页
     ·组织载菌量的测定第53-54页
   ·Δ RS11565突变菌株对Caco-2 细胞的黏附和侵袭试验结果第54-55页
   ·RAW264.7 细胞吞噬试验结果第55-56页
5 讨论第56-59页
   ·突变菌株的构建第56页
   ·RS11565基因的缺失对LM201毒力的影响第56-57页
   ·RS11570/RS11565双组分系统的后续研究展望第57-59页
6 结论第59-60页
参考文献第60-68页
致谢第68页

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