摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
·IFN-λs的概况 | 第8页 |
·白细胞介素-29 的基因构成 | 第8页 |
·白细胞介素-29 的蛋白质结构 | 第8-10页 |
·白细胞介素-29 的来源和表达 | 第10-11页 |
·白细胞介素-29 的受体和靶细胞 | 第11页 |
·白细胞介素-29 的信号传导 | 第11-13页 |
·白细胞介素-29 的生物学活性 | 第13-14页 |
·白细胞介素-29 的抗病毒活性 | 第13页 |
·白细胞介素-29 的抗增殖活性 | 第13-14页 |
·白细胞介素-29 免疫调节活性 | 第14页 |
·白细胞介素-29 的克隆表达和应用 | 第14-15页 |
·立题意义和主要内容 | 第15-17页 |
·立题意义 | 第15页 |
·主要内容 | 第15-17页 |
第二章 人白介素-29 变异体基因(hIL-29mut)的克隆表达 | 第17-40页 |
·引言 | 第17页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·质粒与菌株 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17页 |
·主要仪器 | 第17-18页 |
·常用试剂的配制 | 第18页 |
·培养基 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-29页 |
·hIL-29 变异体突变位点的确定 | 第19页 |
·引物的设计与合成 | 第19-20页 |
·hIL-29 变异体成熟肽基因的扩增 | 第20-21页 |
·重组克隆载体pUCm-T-hIL-29mut的构建 | 第21-22页 |
·重组表达载体pPIC9KM-hIL-29mut的构建 | 第22-24页 |
·毕赤酵母的转化 | 第24页 |
·重组毕赤酵母转化子的筛选 | 第24-26页 |
·重组毕赤酵母转化子的鉴定 | 第26页 |
·重组毕赤酵母的诱导条件优化 | 第26-27页 |
·重组蛋白rhIL-29mut的分离纯化 | 第27-29页 |
·结果与讨论 | 第29-40页 |
·hIL-29 变异体突变位点的确定 | 第29-31页 |
·hIL-29 变异体成熟肽基因的扩增 | 第31-32页 |
·重组克隆载体pUCm-T-hIL-29mut的构建 | 第32页 |
·重组表达载体pPIC9KM-hIL-29mut的构建 | 第32-33页 |
·重组毕赤酵母菌株的筛选 | 第33页 |
·重组毕赤酵母转化子的鉴定 | 第33-34页 |
·重组毕赤酵母的诱导条件优化 | 第34-37页 |
·重组蛋白rhIL-29mut的分离纯化 | 第37-40页 |
第三章 人白介素-29 变异体(rhIL-29mut)的抗肿瘤活性分析 | 第40-47页 |
·引言 | 第40页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·细胞株 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-42页 |
·细胞的复苏 | 第41页 |
·细胞的消化 | 第41页 |
·细胞的传代培养 | 第41页 |
·细胞计数 | 第41-42页 |
·细胞冻存 | 第42页 |
·抗肿瘤活性的测定 | 第42页 |
·结果与讨论 | 第42-47页 |
·rhIL-29mut对BEL-7402 细胞的抗肿瘤作用 | 第42-44页 |
·rhIL-29mut对HCT-8 细胞的抗肿瘤作用 | 第44-45页 |
·rhIL-29mut对SGC-7901 细胞的抗肿瘤作用 | 第45-47页 |
主要结论与展望 | 第47-49页 |
主要结论 | 第47-48页 |
展望 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
附录A:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55-56页 |
附录B:重组变异体蛋白的分离纯化结果 | 第56-57页 |
附录C:Cell Counting Kit-8 试剂盒说明书 | 第57-58页 |