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重组人白介素-29变异体在毕赤酵母中的表达及体外抗肿瘤活性初步分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·IFN-λs的概况第8页
   ·白细胞介素-29 的基因构成第8页
   ·白细胞介素-29 的蛋白质结构第8-10页
   ·白细胞介素-29 的来源和表达第10-11页
   ·白细胞介素-29 的受体和靶细胞第11页
   ·白细胞介素-29 的信号传导第11-13页
   ·白细胞介素-29 的生物学活性第13-14页
     ·白细胞介素-29 的抗病毒活性第13页
     ·白细胞介素-29 的抗增殖活性第13-14页
     ·白细胞介素-29 免疫调节活性第14页
   ·白细胞介素-29 的克隆表达和应用第14-15页
   ·立题意义和主要内容第15-17页
     ·立题意义第15页
     ·主要内容第15-17页
第二章 人白介素-29 变异体基因(hIL-29mut)的克隆表达第17-40页
   ·引言第17页
   ·实验材料第17-19页
     ·质粒与菌株第17页
     ·主要试剂第17页
     ·主要仪器第17-18页
     ·常用试剂的配制第18页
     ·培养基第18-19页
   ·实验方法第19-29页
     ·hIL-29 变异体突变位点的确定第19页
     ·引物的设计与合成第19-20页
     ·hIL-29 变异体成熟肽基因的扩增第20-21页
     ·重组克隆载体pUCm-T-hIL-29mut的构建第21-22页
     ·重组表达载体pPIC9KM-hIL-29mut的构建第22-24页
     ·毕赤酵母的转化第24页
     ·重组毕赤酵母转化子的筛选第24-26页
     ·重组毕赤酵母转化子的鉴定第26页
     ·重组毕赤酵母的诱导条件优化第26-27页
     ·重组蛋白rhIL-29mut的分离纯化第27-29页
   ·结果与讨论第29-40页
     ·hIL-29 变异体突变位点的确定第29-31页
     ·hIL-29 变异体成熟肽基因的扩增第31-32页
     ·重组克隆载体pUCm-T-hIL-29mut的构建第32页
     ·重组表达载体pPIC9KM-hIL-29mut的构建第32-33页
     ·重组毕赤酵母菌株的筛选第33页
     ·重组毕赤酵母转化子的鉴定第33-34页
     ·重组毕赤酵母的诱导条件优化第34-37页
     ·重组蛋白rhIL-29mut的分离纯化第37-40页
第三章 人白介素-29 变异体(rhIL-29mut)的抗肿瘤活性分析第40-47页
   ·引言第40页
   ·实验材料第40-41页
     ·细胞株第40页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器第40-41页
   ·实验方法第41-42页
     ·细胞的复苏第41页
     ·细胞的消化第41页
     ·细胞的传代培养第41页
     ·细胞计数第41-42页
     ·细胞冻存第42页
     ·抗肿瘤活性的测定第42页
   ·结果与讨论第42-47页
     ·rhIL-29mut对BEL-7402 细胞的抗肿瘤作用第42-44页
     ·rhIL-29mut对HCT-8 细胞的抗肿瘤作用第44-45页
     ·rhIL-29mut对SGC-7901 细胞的抗肿瘤作用第45-47页
主要结论与展望第47-49页
 主要结论第47-48页
 展望第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-55页
附录A:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第55-56页
附录B:重组变异体蛋白的分离纯化结果第56-57页
附录C:Cell Counting Kit-8 试剂盒说明书第57-58页

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