摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-18页 |
·研究背景 | 第7-16页 |
·内部核糖体进入位点(IRES)研究进展 | 第7-14页 |
·人转录激活因子(ATF/CREB)家族 | 第14-16页 |
·ATF/CREB家族转录因子与细胞IRES的关系 | 第16页 |
·课题研究意义 | 第16-17页 |
·课题研究内容 | 第17-18页 |
第二章 ATF/CREB家族转录因子IRES活性的鉴定及活性中心域探究 | 第18-36页 |
·引言 | 第18页 |
·实验材料 | 第18-19页 |
·质粒及宿主菌株 | 第18页 |
·细胞株 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·仪器与设备 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-26页 |
·主要试剂配置方法 | 第19-20页 |
·质粒抽提步骤 | 第20页 |
·PCR产物回收步骤 | 第20-21页 |
·割胶回收酶切产物步骤 | 第21-22页 |
·琼脂糖凝胶电泳步骤 | 第22页 |
·连接及转化步骤 | 第22页 |
·质粒构建 | 第22-25页 |
·细胞转染 | 第25页 |
·双荧光素酶活性检测 | 第25-26页 |
·实验结果与讨论 | 第26-35页 |
·质粒构建 | 第26-29页 |
·ATF/CREB家族转录因子IRES活性初步检测 | 第29-31页 |
·ATF/CREB家族转录因子IRES活性的确证 | 第31-32页 |
·ATF1 和ATF2 IRES活性中心域的探究 | 第32-35页 |
·实验小结 | 第35-36页 |
第三章 ATF/CREB家族转录因子IRES所需的反式作用因子的探究 | 第36-42页 |
·引言 | 第36页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·质粒及细胞株 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36-37页 |
·仪器与设备 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-39页 |
·主要试剂配置方法 | 第37-38页 |
·细胞转染 | 第38页 |
·RNA-蛋白免疫共沉淀实验步骤 | 第38页 |
·逆转录PCR(RT-PCR) | 第38-39页 |
·琼脂糖凝胶电泳步骤 | 第39页 |
·实验结果与讨论 | 第39-41页 |
·ATF15’UTR与四种ITAFs的结合 | 第39-40页 |
·ATF25’UTR与四种ITAFs的结合 | 第40-41页 |
·实验小结 | 第41-42页 |
第四章 ATF/CREB家族转录因子IRES活性生理学意义的初步探究 | 第42-50页 |
·引言 | 第42页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·质粒及细胞株 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·仪器与设备 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-44页 |
·主要试剂配置方法 | 第43页 |
·细胞转染 | 第43页 |
·Western Blot | 第43-44页 |
·逆转录PCR(RT-PCR) | 第44页 |
·琼脂糖凝胶电泳步骤 | 第44页 |
·双荧光素酶检测步骤 | 第44页 |
·实验结果与讨论 | 第44-48页 |
·药物处理Bel7402 细胞后ATF1 的表达 | 第44-45页 |
·药物处理Bel7402 细胞后ATF2 的表达 | 第45-47页 |
·药物处理Bel7402 细胞对ATF2 的IRES活性的影响 | 第47-48页 |
·实验小结 | 第48-50页 |
主要结论与展望 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |