| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| Abbreviations | 第8-9页 |
| Gene Symbol | 第9页 |
| Amino Add Abbreviation | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-23页 |
| ·链霉菌概述 | 第10-12页 |
| ·链霉菌的基本特征 | 第10-11页 |
| ·链霉菌的基因组特征 | 第11-12页 |
| ·核苷肽类抗生素概述 | 第12-14页 |
| ·尼可霉素的生物合成及其分子调控 | 第14-20页 |
| ·尼可霉素的生物合成 | 第15-17页 |
| ·尼可霉素的生物合成调控 | 第17-19页 |
| ·尼可霉素与其他核苷肽类抗生素的组合生物合成研究 | 第19-20页 |
| ·异源表达 | 第20-22页 |
| ·本论文的研究内容及意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| ·实验材料 | 第23-30页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第23-25页 |
| ·酶及常用试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器和设备 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·缓冲液 | 第28-30页 |
| ·各种抗生素的贮存浓度和使用浓度 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-39页 |
| ·大肠杆菌及链霉菌质粒的小量提取 | 第30-31页 |
| ·链霉菌总DNA的少量制备及PCR扩增条件 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第32-33页 |
| ·PCR targeting | 第33-34页 |
| ·链霉菌大肠杆菌之间的接合转移 | 第34页 |
| ·链霉菌RNA的提取及RT-PCR | 第34-37页 |
| ·发酵产物的生物活性检测 | 第37页 |
| ·发酵产物的HPLC分析 | 第37-38页 |
| ·发酵产物的分离、纯化 | 第38-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-59页 |
| ·重组质粒pNIKm的构建及酶切验证 | 第39-43页 |
| ·重组质粒pBS-HIhF的构建 | 第39页 |
| ·重组质粒pSET152-hGX的构建 | 第39-41页 |
| ·重组质粒pNIKm的构建及酶切验证 | 第41-43页 |
| ·异源表达菌株M1146-NIK和M1146-NIKm的构建及PCR验证 | 第43-44页 |
| ·尼可霉素的异源表达对基因簇内关键基因的转录影响 | 第44-47页 |
| ·RNA质量检测 | 第44-46页 |
| ·基因簇内关键基因的转录情况 | 第46-47页 |
| ·发酵产物的抗真菌活性检测 | 第47-48页 |
| ·发酵产物的巴比妥酸显色反应的检测 | 第48-49页 |
| ·发酵产物的分离和纯化 | 第49-54页 |
| ·发酵产物的鉴定 | 第54-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 5 展望 | 第60-61页 |
| 6 参考文献 | 第61-70页 |
| 7 攻读硕士期间发表论文情况 | 第70-71页 |
| 8 致谢 | 第71-72页 |