| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略语表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-24页 |
| ·重组蛋白的体外表达系统 | 第10-12页 |
| ·原核表达系统 | 第10页 |
| ·真核表达系统 | 第10-11页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统 | 第11-12页 |
| ·其它表达系统 | 第12页 |
| ·三种白细胞介素 1（IL-1）的结构和功能 | 第12-17页 |
| ·IL-1α的来源、结构、性质和作用 | 第13-14页 |
| ·IL-1β的来源、结构、性质和作用 | 第14-15页 |
| ·IL-1Ra 的来源、结构、性质和作用 | 第15-16页 |
| ·IL-1α、IL-1β、IL-1Ra 的结构与功能比较 | 第16-17页 |
| ·三种白细胞介素 1（IL-1）的毕赤酵母表达 | 第17-24页 |
| ·毕赤酵母表达系统的特点和优点 | 第17-18页 |
| ·毕赤酵母菌株 | 第18-19页 |
| ·毕赤酵母表达载体 | 第19页 |
| ·毕赤酵母的转化 | 第19-21页 |
| ·毕赤酵母工程菌株的筛选及鉴定 | 第21-23页 |
| ·影响重组 IL-1α、IL-1β、IL-1Ra 表达的因素 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-42页 |
| ·生物材料 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·溶液及其配制 | 第25-27页 |
| ·培养基 | 第27-29页 |
| ·实验方法 | 第29-42页 |
| ·IL-1α、IL-1β、IL-1Ra 的基因序列查找与合成 | 第29-30页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第30-32页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第32-34页 |
| ·毕赤酵母感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·重组质粒的线性化 | 第34-35页 |
| ·转化细胞的筛选及转化 | 第35-37页 |
| ·转化细胞的鉴定 | 第37-38页 |
| ·阳性重组子的诱导表达 | 第38页 |
| ·用 SDS-PAGE 检测重组菌的表达产物 | 第38-39页 |
| ·蛋白的灰度扫描定量 | 第39-40页 |
| ·蛋白的免疫印迹鉴定 | 第40页 |
| ·蛋白的氨基酸序列鉴定 | 第40-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-66页 |
| ·毕赤酵母工程菌表达 rhIL-1α | 第42-49页 |
| ·rhIL-1α的表达质粒 | 第42-45页 |
| ·rhIL-1α毕赤酵母工程菌 | 第45-46页 |
| ·不同载体-受体组合对 rhIL-1α表达量的影响 | 第46-48页 |
| ·不同载体-受体组合与 rhIL-1α表达量的相关性 | 第48-49页 |
| ·毕赤酵母工程菌表达 rhIL-1β | 第49-56页 |
| ·rhIL-1β的表达质粒 | 第49-52页 |
| ·rhIL-1β毕赤酵母工程菌 | 第52-53页 |
| ·不同载体-受体组合时 rhIL-1β表达量 | 第53-55页 |
| ·不同载体-受体组合与 rhIL-1β表达量的相关性 | 第55-56页 |
| ·毕赤酵母工程菌表达 rhIL-1Ra | 第56-63页 |
| ·rhIL-1Ra 的表达质粒 | 第56-59页 |
| ·rhIL-1Ra 毕赤酵母工程菌 | 第59-60页 |
| ·不同载体-受体组合时 rhIL-1Ra 表达量 | 第60-62页 |
| ·不同载体-受体组合与 rhIL-1Ra 表达量的相关性 | 第62-63页 |
| ·不同载体-受体组合与 rhIL-1 表达量的相关性比较 | 第63-66页 |
| 4 讨论 | 第66-72页 |
| 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目及已发表的论文 | 第82-83页 |
