| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-32页 |
| ·龙牙楤木的研究概况 | 第14-20页 |
| ·龙牙楤木的简介 | 第14-16页 |
| ·龙牙楤木的价值 | 第16-17页 |
| ·龙牙楤木的资源情况以及弥补办法 | 第17-20页 |
| ·龙牙楤木主要活性成分三萜皂苷的研究概况 | 第20-22页 |
| ·皂苷的研究概况 | 第20-21页 |
| ·龙牙楤木的化学成分 | 第21-22页 |
| ·龙牙楤木的药理作用 | 第22-25页 |
| ·保肝作用 | 第22-23页 |
| ·对心血管系统的作用 | 第23-24页 |
| ·抗癌作用 | 第24页 |
| ·抗衰老、降血糖血脂的作用 | 第24-25页 |
| ·植物三萜皂苷代谢途径 | 第25-32页 |
| ·龙牙楤木代谢途径的研究进展 | 第25-26页 |
| ·鲨烯合酶基因的研究进展 | 第26-30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30页 |
| ·展望 | 第30-32页 |
| 第2章 鲨烯合酶基因的克隆与原核表达 | 第32-66页 |
| ·材料与仪器 | 第32-36页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌株与质粒 | 第32-33页 |
| ·酶和生化试剂 | 第33-34页 |
| ·实验所需试剂及培养基的配制 | 第34-36页 |
| ·特异和简并引物 | 第36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-51页 |
| ·龙牙楤木高质量总RNA 的提取 | 第36-38页 |
| ·龙牙楤木SS 基因保守序列的克隆 | 第38-39页 |
| ·龙牙楤木SS 基因3'端序列的PCR 扩增 | 第39-40页 |
| ·目的片段的回收 | 第40-41页 |
| ·目的片段与克隆载体连接 | 第41页 |
| ·制备大肠杆菌DH5α 感受态细胞（CaCl_2法） | 第41页 |
| ·重组质粒的转化 | 第41-42页 |
| ·质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第43页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·测序 | 第44页 |
| ·龙牙楤木SS 基因全长的PCR 扩增 | 第44页 |
| ·琼脂糖凝胶回收、与pGM-T 载体的连接和测序 | 第44-45页 |
| ·生物信息学分析 | 第45页 |
| ·龙牙楤木SS 基因原核表达载体的构建 | 第45-49页 |
| ·龙牙楤木 SS 基因的原核表达 | 第49-51页 |
| ·结果分析 | 第51-62页 |
| ·高质量总RNA 的提取 | 第51-52页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第52页 |
| ·龙牙楤木SS 基因保守序列的扩增结果 | 第52-53页 |
| ·测序结果分析 | 第53页 |
| ·龙牙楤木SS 基因3'端序列的PCR 扩增 | 第53页 |
| ·龙牙楤木SS 基因3'端序列的回收 | 第53-54页 |
| ·重组质粒的PCR、酶切鉴定 | 第54页 |
| ·龙牙楤木SS 基因全长的扩增 | 第54页 |
| ·龙牙楤木SS 基因的回收、重组质粒的酶切和PCR 鉴定 | 第54-55页 |
| ·龙牙楤木SS 基因的测序结果分析 | 第55页 |
| ·生物信息学分析 | 第55-59页 |
| ·AeSS 基因原核表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·目的蛋白SDS-PAGE 分析 | 第60-61页 |
| ·目的蛋白的Western blot 分析 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-66页 |
| 第3章 AeSS 在不同器官的表达与三萜皂苷含量测定 | 第66-80页 |
| ·材料与仪器 | 第66-68页 |
| ·植物材料 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66-67页 |
| ·仪器 | 第67页 |
| ·试剂及培养基的配置 | 第67-68页 |
| ·方法 | 第68-71页 |
| ·供试样品的制备 | 第68-69页 |
| ·齐墩果酸的含量测定 | 第69-70页 |
| ·AeSS 基因在侧根、茎、叶、花中的表达分析 | 第70-71页 |
| ·结果分析 | 第71-77页 |
| ·龙牙楤木愈伤组织的获得 | 第71-73页 |
| ·不同材料的HPLC 测定 | 第73-75页 |
| ·Real-time PCR 结果分析 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-80页 |
| 第4章 龙牙楤木鲨烯合酶基因的真核表达 | 第80-98页 |
| ·材料与仪器 | 第80-83页 |
| ·植物材料 | 第80页 |
| ·菌株和表达载体 | 第80-81页 |
| ·试剂 | 第81页 |
| ·主要试剂的配置 | 第81-83页 |
| ·主要仪器 | 第83页 |
| ·方法 | 第83-92页 |
| ·龙牙楤木总RNA 的提取 | 第83页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第83-84页 |
| ·目的基因的扩增 | 第84页 |
| ·目的片段的回收、与pGM-T 载体的连接、重组质粒的转化和提取 | 第84页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第84-85页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第85页 |
| ·测序 | 第85页 |
| ·龙牙楤木植物表达载体的构建 | 第85页 |
| ·pBI121-SS 质粒转化农杆菌 | 第85-86页 |
| ·农杆菌介导SS 基因转化烟草 | 第86-88页 |
| ·重组酵母表达载体的构建 | 第88-92页 |
| ·结果与分析 | 第92-96页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第92页 |
| ·叶盘转化法 | 第92-93页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第93-94页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第94-95页 |
| ·酵母转化子的PCR 鉴定 | 第95页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第95-96页 |
| ·讨论 | 第96-98页 |
| 第5章 全文结论 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-113页 |
| 作者简介及科研成果 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
