中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩写词表 | 第8-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-34页 |
·水稻稻瘟菌研究综述 | 第16-28页 |
·稻瘟菌概述 | 第16-17页 |
·稻瘟菌侵染循环 | 第17-20页 |
·稻瘟菌遗传转化体系的建立 | 第20-22页 |
·稻瘟菌功能基因研究进展 | 第22-27页 |
·ROS在宿主植物与病原菌互作过程中的功能研究进展 | 第27-28页 |
·线粒体ATP依赖型Lon蛋白酶的功能研究概述 | 第28-34页 |
·Lon蛋白酶家族 | 第29页 |
·Lon蛋白酶的活性及表达调控 | 第29-30页 |
·Lon蛋白酶在胞内一系列过程中所起的作用 | 第30-31页 |
·细胞循环与分化 | 第31-34页 |
第2章 稻瘟菌T-DNA插入突变体库的构建及致病力减弱突变体的筛选 | 第34-48页 |
·材料与方法 | 第35-44页 |
·供试菌株与载体 | 第35页 |
·培养基 | 第35-37页 |
·稻瘟菌转化用培养基 | 第37-38页 |
·稻瘟菌分生孢子的制备 | 第38页 |
·农杆菌感受态细胞的制备以及转化 | 第38-40页 |
·稻瘟菌的遗传转化 | 第40-41页 |
·稻瘟菌基因组DNA的提取 | 第41-42页 |
·稻瘟菌转化子的PCR检测 | 第42-43页 |
·转化子潮霉素抗性稳定性检测 | 第43页 |
·致病力减弱突变体的筛选 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-48页 |
·构建了稻瘟菌T-DNA插入突变体库 | 第44页 |
·转化子的PCR鉴定 | 第44-45页 |
·阳性转化子潮霉素抗性遗传稳定 | 第45-46页 |
·ATMTlj-22号转化子致病性降低 | 第46-48页 |
第3章 ATMTlj-22 转化子 T-DNA 插入位点基因的验证与克隆 | 第48-69页 |
·材料与方法 | 第48-63页 |
·供试菌株 | 第48页 |
·试验用培养基以及菌株的培养条件 | 第48页 |
·稻瘟菌基因组DNA的提取 | 第48页 |
·稻瘟菌基因组RNA的提取 | 第48-50页 |
·cDNA的合成 | 第50-51页 |
·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第51页 |
·Souther-bloting分析(DIG) | 第51-59页 |
·交错式热不对称PCR | 第59-60页 |
·DNA胶回收 | 第60-61页 |
·T-DNA插入拷贝数鉴定 | 第61页 |
·插入位点鉴定 | 第61-62页 |
·目的基因的生物信息学分析 | 第62页 |
·MAP1基因在稻瘟菌不同时期的表达模式 | 第62-63页 |
·结果与分析 | 第63-69页 |
·ATMTlj-22转化子为T-DNA单拷贝插入 | 第63页 |
·T-DNA插入到 MAP1 基因启动子区域 | 第63-65页 |
·MAP1基因的生物信息学分析 | 第65-67页 |
·稻瘟菌不同时期 MAP1 基因的表达分析 | 第67-69页 |
第4章 MAP1 基因的敲除 | 第69-79页 |
·材料与方法 | 第69-76页 |
·菌株与载体 | 第69页 |
·培养基以及菌株的培养条件 | 第69页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备以及转化 | 第69-71页 |
·质粒DNA的提取 | 第71-72页 |
·质粒DNA的酶切与连接 | 第72页 |
·PCR和RT-PCR反应 | 第72-73页 |
·MAP1基因敲除突变体的获得 | 第73-75页 |
·互补转化 | 第75-76页 |
·结果与分析 | 第76-79页 |
·敲除载体的构建 | 第76-77页 |
·MAP1敲除转化子的获得 | 第77-78页 |
·互补转化子的获得 | 第78-79页 |
第5章 MAP1 基因在稻瘟菌逆境自我保护以及致病过程中的功能分析 | 第79-115页 |
·材料与方法 | 第79-88页 |
·供试菌株与寄主 | 第79页 |
·试验用培养基以及菌株的培养条件 | 第79-80页 |
·营养生长与菌落形态观察 | 第80-81页 |
·碳源利用分析 | 第81页 |
·产孢分析 | 第81页 |
·孢子萌发以及附着胞形成分析 | 第81-82页 |
·菌丝疏水性以及疏水相关基因的表达分析 | 第82-83页 |
·△MAP1 对水稻以及大麦的致病力分析 | 第83页 |
·洋葱表皮细胞侵染观察 | 第83页 |
·水稻叶鞘细胞侵染观察 | 第83-84页 |
·H_2O_2敏感性测定 | 第84页 |
·水稻汁液诱导条件下 MAP1 基因的表达模式研究 | 第84-85页 |
·山梨醇和NaCl敏感性研究 | 第85页 |
·细胞壁完整性研究 | 第85-86页 |
·MAP1基因在不同温度条件下的表达变化 | 第86页 |
·稻瘟菌活性氧积累相关基因表达量分析 | 第86-87页 |
·MAP1基因亚细胞定位分析 | 第87页 |
·透射电镜观察 | 第87-88页 |
·结果与分析 | 第88-110页 |
·MAP1缺失不影响稻瘟菌的营养生长 | 第88-90页 |
·MAP1缺失不影响稻瘟菌对碳源的利用 | 第90-91页 |
·MAP1参与稻瘟菌分生孢子的形态建成 | 第91-93页 |
·MAP1缺失影响稻瘟菌气生菌丝的疏水性 | 第93-95页 |
·MAP1调控稻瘟菌附着胞的形成 | 第95-96页 |
·MAP1的缺失影响稻瘟菌附着胞的完整性 | 第96-97页 |
·MAP1基因缺失影响稻瘟菌细胞壁完整性 | 第97-99页 |
·MAP1基因缺失对稻瘟菌细胞壁厚度的影响 | 第99-100页 |
·△MAP1 菌丝细胞内活性氧水平降低 | 第100-101页 |
·△MAP1 对 H2O2的敏感性增强 | 第101-102页 |
·△MAP1 对渗透压影响因子的敏感性增强 | 第102-103页 |
·不同温度下的 MAP1 基因表达研究 | 第103-104页 |
·水稻汁液诱导下 MAP1 基因表达研究 | 第104页 |
·MAP1的缺失影响稻瘟菌在洋葱表皮细胞内的扩展 | 第104-105页 |
·MAP1基因参与稻瘟菌侵染性菌丝扩展过程 | 第105-107页 |
·MAP1定位于线粒体内 | 第107-108页 |
·MAP1基因与逆境条件下线粒体形态完整性保持有关.. | 第108-110页 |
·结论与讨论 | 第110-115页 |
第6章 研究结论 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-133页 |
附表 | 第133-135页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第135-137页 |
致谢 | 第137页 |