| 目录 | 第1-8页 |
| CONTENTS | 第8-12页 |
| 中文摘要 | 第12-16页 |
| ABSTRACT | 第16-20页 |
| 符号说明 | 第20-22页 |
| 第一章 绪论 | 第22-61页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·固定化酶 | 第22-32页 |
| ·酶 | 第22-23页 |
| ·固定化酶概述 | 第23页 |
| ·酶的固定化方法 | 第23-27页 |
| ·酶的固定化载体 | 第27-28页 |
| ·固定化酶的制备原则 | 第28页 |
| ·固定化酶的性质 | 第28-30页 |
| ·定向固定化 | 第30-32页 |
| ·漆酶 | 第32-41页 |
| ·漆酶的结构和性质 | 第32-35页 |
| ·漆酶的催化机理 | 第35-36页 |
| ·漆酶的应用 | 第36-39页 |
| ·漆酶的固定化研究进展 | 第39-41页 |
| ·本论文的立题依据及研究内容 | 第41-43页 |
| ·立题依据 | 第41-42页 |
| ·研究内容 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-61页 |
| 第二章 Cys-(His×6)标签重组漆酶的构建及在毕赤酵母中的高效表达 | 第61-77页 |
| ·引言 | 第61-62页 |
| ·实验材料和方法 | 第62-72页 |
| ·菌株和载体 | 第62页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第62页 |
| ·培养基 | 第62-63页 |
| ·引物 | 第63页 |
| ·重组漆酶基因表达载体的构建 | 第63-65页 |
| ·酶的生产和纯化 | 第65-66页 |
| ·酶活力和生物量测定 | 第66-67页 |
| ·结果与讨论 | 第67页 |
| ·cDNA序列分析 | 第67-69页 |
| ·毕赤酵母的诱导表达 | 第69-70页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第70-71页 |
| ·酶学性质 | 第71-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 第三章 重组漆酶在金电极上定向固定化及直接电化学研究 | 第77-90页 |
| ·引言 | 第77-78页 |
| ·实验部分 | 第78-80页 |
| ·酶电极的制备 | 第78页 |
| ·酶在电极表面上载量测定 | 第78-79页 |
| ·循环伏安曲线记录 | 第79页 |
| ·H_2O_2的测定 | 第79-80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-86页 |
| ·固定化原理 | 第80-81页 |
| ·rLacA在金电极的上载量和比活力 | 第81页 |
| ·两种rLacA修饰金电极的直接电化学 | 第81-83页 |
| ·两种rLacA修饰金电极生物电催化氧化O_2 | 第83-86页 |
| ·小结 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-90页 |
| 第四章 重组漆酶在Ni~(2+)-NTA-琼脂糖载体上定向固定化及酶学性质研究 | 第90-104页 |
| ·引言 | 第90页 |
| ·实验部分 | 第90-93页 |
| ·仪器与试剂 | 第90-91页 |
| ·重组漆酶在Ni~(2+)-NTA-琼脂糖载体上的自组装 | 第91页 |
| ·酶活力的测定 | 第91-92页 |
| ·酶上载量的测定 | 第92页 |
| ·圆二色谱 | 第92页 |
| ·固定化酶催化染料脱色 | 第92-93页 |
| ·固定化酶稳定性及重复利用性 | 第93页 |
| ·Ni~(2+)-NTA-琼脂糖载体再生 | 第93页 |
| ·结果与讨论 | 第93-101页 |
| ·重组漆酶在Ni~(2+)-NTA-琼脂糖载体上的自组装原理 | 第93-96页 |
| ·两种重组漆酶在Ni~(2+)-NTA-琼脂糖载体上的酶学性质 | 第96页 |
| ·圆二色谱表征酶的结构 | 第96-97页 |
| ·固定化rLacA-N催化染料脱色 | 第97-98页 |
| ·固定化rLacA-N的热稳定性及重复利用性 | 第98-101页 |
| ·小结 | 第101页 |
| 参考文献 | 第101-104页 |
| 第五章 漆酶和辣根过氧化物酶在单壁碳纳米管上高效固定化研究 | 第104-124页 |
| ·引言 | 第104-106页 |
| ·实验部分 | 第106-109页 |
| ·仪器与试剂 | 第106页 |
| ·酶在碳纳米管上的固定化 | 第106-107页 |
| ·单壁碳纳米管-烷基糖苷-伴刀豆蛋白-糖蛋白酶自组装体的构建 | 第107页 |
| ·酶活力测定 | 第107-108页 |
| ·圆二色谱 | 第108页 |
| ·荧光光谱 | 第108页 |
| ·HRP催化氧化DBT | 第108-109页 |
| ·HPLC测量DBT含量 | 第109页 |
| ·结果与讨论 | 第109-118页 |
| ·自组装酶固定化原理 | 第109-111页 |
| ·酶的固载量 | 第111-113页 |
| ·固定化酶的比活力 | 第113页 |
| ·固定化酶的热稳定性 | 第113-114页 |
| ·固定化酶结构 | 第114-117页 |
| ·固定化酶催化氧化DBT | 第117-118页 |
| ·小结 | 第118页 |
| 参考文献 | 第118-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 附录 攻读博士学位期间发表学术论文 | 第125-127页 |
| 附件 | 第127-138页 |
| 学位论文评阅及答辩情况* | 第138页 |