摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
致谢 | 第9-13页 |
插图清单 | 第13-15页 |
表格清单 | 第15-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-26页 |
·重金属镉(Cd)与植物 | 第16-21页 |
·重金属对植物的损伤 | 第16-18页 |
·重金属镉进入植物体的途径 | 第18页 |
·重金属镉在植物体内的运输途径 | 第18-19页 |
·重金属镉在植物体内的积累 | 第19页 |
·植物对重金属的耐受机制 | 第19-21页 |
·细胞壁与重金属 | 第21-23页 |
·细胞壁的组分 | 第21-22页 |
·植物细胞壁对金属离子的抗性机制 | 第22-23页 |
·甘露聚糖酶 | 第23-25页 |
·甘露聚糖 | 第23页 |
·甘露聚糖酶 | 第23-25页 |
·研究的目的和意义 | 第25-26页 |
第二部分 材料和方法 | 第26-50页 |
·实验材料 | 第26页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌体和质粒载体 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-32页 |
·常用分子生物学试剂盒 | 第26页 |
·常用酶类 | 第26-27页 |
·常用生化试剂 | 第27页 |
·常用溶液与试剂的配制 | 第27-32页 |
·主要仪器与设备 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-50页 |
·XCD1 基因 pET-32a(+)原核表达载体构建 | 第33-35页 |
·EasyTaq Polymerase PCR 反应 | 第35页 |
·质粒 DNA 提取(Kit) | 第35-37页 |
·DNA 产物纯化(Kit) | 第37-38页 |
·琼脂糖凝胶电泳(Agarose gel electrophoresis)检测核酸 | 第38页 |
·目的条带 DNA 的回收与纯化(Kit) | 第38-39页 |
·蛋白质的电泳检测 | 第39-40页 |
·原核表达蛋白的条件优化 | 第40-41页 |
·原核表达蛋白的可溶性鉴定 | 第41页 |
·原核表达蛋白的大量诱导表达 | 第41页 |
·原核表达蛋白的纯化 | 第41-42页 |
·CTAB 法提取拟南芥全基因组 DNA | 第42页 |
·DH5α感受态细胞制备 | 第42-43页 |
·E.coli 感受态细胞的转化 | 第43页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第43页 |
·农杆菌感受态细胞的电击转化 | 第43-44页 |
·花序侵染法转化拟南芥 | 第44页 |
·GUS 染色 | 第44-45页 |
·拟南芥根部细胞壁的提取 | 第45页 |
·细胞壁组分分离 | 第45-46页 |
·果胶含量的测定 | 第46页 |
·苯酚-硫酸法测量多糖含量 | 第46-47页 |
·Cd 含量的测定 | 第47页 |
·β-甘露聚糖酶酶活性的测定 | 第47-48页 |
·拟南芥的种植培养 | 第48页 |
·灭菌 | 第48-50页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第50-81页 |
·XCD1 基因敲除突变体的功能验证 | 第50-52页 |
·XCD1 基因启动子的 GUS 分析 | 第52-53页 |
·XCD1(promoter):GUS 转基因植株的筛选 | 第52页 |
·XCD1(promoter):GUS 转基因植株的鉴定 | 第52-53页 |
·GUS 染色 | 第53页 |
·XCD1 基因编码蛋白的亚细胞定位 | 第53-56页 |
·XCD1-GFP 重组载体转入农杆菌 | 第53-55页 |
·带有重组载体的农杆菌注射小叶烟草 | 第55页 |
·XCD1 蛋白亚细胞定位观察 | 第55-56页 |
·XCD1 基因编码一个β-甘露聚糖水解酶 | 第56-68页 |
·XCD1 基因原核表达载体的构建 | 第56-62页 |
·XCD1 蛋白的诱导表达和纯化 | 第62-66页 |
·XCD1 纯化蛋白的酶活性分析 | 第66-68页 |
·XCD1 基因影响植株体内镉的积累 | 第68-69页 |
·XCD1 基因突变导致植株根部细胞壁镉积累增加 | 第69-70页 |
·XCD1 基因突变改变细胞壁中β-甘露聚糖酶活性 | 第70页 |
·XCD1 基因影响细胞壁各组分含量的变化 | 第70-74页 |
·细胞壁中纤维素的含量 | 第71-72页 |
·细胞壁中果胶的含量 | 第72-73页 |
·细胞壁中半纤维素的含量 | 第73-74页 |
·XCD1 基因突变导致植物细胞壁各组分中 Cd 含量变化 | 第74-75页 |
·外源甘露糖处理导致镉胁迫耐受增加 | 第75-80页 |
·甘露糖缓解镉胁迫的表型 | 第76-77页 |
·甘露糖缓解镉胁迫的根长鲜重分析 | 第77-78页 |
·镉胁迫下加入甘露糖后植株体内的镉含量 | 第78-79页 |
·外源甘露糖影响根部细胞壁镉含量 | 第79-80页 |
·甘露糖与镉的直接作用 | 第80-81页 |
第四部分 讨论 | 第81-84页 |
参考文献 | 第84-91页 |
附录:硕士期间发明专利与发表论文 | 第91-92页 |