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乳酸菌细菌素LLC518的分离纯化及制备

中文摘要第1-4页
Abstract第4-5页
缩略词第5-9页
文献综述第9-18页
1 引言第18-20页
   ·研究意义与理论依据第18-19页
   ·本研究拟解决的问题第19-20页
2 材料与方法第20-34页
   ·材料第20-23页
     ·菌株第20页
     ·培养基第20页
     ·主要试剂第20-21页
     ·试剂的配制第21-22页
       ·Lowry 法测蛋白浓度试剂的配制第21页
       ·缓冲液的配制第21-22页
       ·Tricine-SDS-PAGE 电泳试剂的配制第22页
       ·电泳样品缓冲液与低分子量蛋白质标准品第22页
     ·主要仪器第22-23页
   ·方法第23-34页
     ·乳酸乳球菌 LLC518 种子液的制备第23页
     ·乳酸乳球菌 LLC518 发酵液的制备第23页
     ·指示菌液的制备第23页
     ·抑菌作用的测定第23-24页
       ·抑菌作用测定第23页
       ·细菌素效价的测定第23-24页
     ·蛋白浓度的测定(Lowry 法)第24页
       ·蛋白质浓度标准曲线的制作第24页
       ·样品蛋白质浓度的测定第24页
     ·细菌素对 pH 稳定性的测定第24页
     ·细菌素作用方式的测定第24页
     ·乳酸乳球菌 LLC518 生理曲线的测定第24-25页
     ·pH 对乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 吸附率影响第25页
       ·排除缓冲液的干扰第25页
       ·空载细胞对细菌素的吸附作用第25页
       ·发酵液中 Lacticin LLC518 对菌体细胞的吸附作用第25页
     ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的分离第25-26页
       ·硫酸铵沉淀法分离乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518第25-26页
       ·pH 吸附法分离乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518第26页
     ·硫酸铵沉淀法及 pH 吸附法分离效果的检测第26-27页
       ·凝胶层析第26页
       ·离子交换层析第26页
       ·疏水层析第26-27页
     ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的纯化第27-30页
       ·pH 吸附样品的纯化第27页
       ·硫酸铵沉淀样品的纯化第27-29页
       ·Tricine-SDS-PAGE第29-30页
     ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的大规模制备第30-33页
       ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的膜过滤第30页
       ·排除辅料的干扰第30页
       ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 喷雾干燥条件的优化第30-33页
     ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的毒理学特性检测第33-34页
       ·半数致死量(LD50)的检测第33页
       ·最大耐受量的测定第33-34页
3 结果与分析第34-58页
   ·Lowery 法测蛋白浓度标准曲线第34-35页
   ·Lacticin LLC518 的 pH 稳定性第35页
   ·Lacticin LLC518 的作用方式第35-36页
     ·作用方式第35-36页
   ·乳酸乳球菌 LLC518 的生理曲线第36-37页
   ·pH 对乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 吸附与解吸附的影响第37-38页
     ·缓冲液的抑菌作用第37页
     ·吸附细胞的制备第37页
     ·离心机转速的设定第37-38页
     ·pH 对乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 吸附性的影响第38页
   ·硫酸铵沉淀样品及 pH 吸附样品的分析第38-40页
     ·凝胶层析(Sephadex G-50)第38-39页
     ·离子交换层析(DEAE Sepharose Fast Flow)第39-40页
     ·疏水层析第40页
   ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的纯化第40-47页
     ·pH 吸附样品的纯化第40-42页
       ·RP-HPLC第40-41页
       ·Lacticin LLC518 的纯化表第41页
       ·Tricin-SDS-PAGE 电泳检测第41-42页
     ·硫酸铵沉淀样品的纯化第42-47页
       ·制备型 RP-HPLC第42-43页
       ·分析型 RP-HPLC第43-45页
       ·硫酸铵沉淀样品的纯化表第45页
       ·LC-MS 分析第45-46页
       ·MALDI-TOF-TOF-MS 分析第46-47页
   ·不同分离方法对于 Lacticin LLC518 的分离效果第47-49页
   ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 喷雾干燥条件的优化第49-57页
     ·辅料对乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 品质的影响第49-50页
     ·辅料对 Lacticin LLC518 得率及活力的影响第50-51页
     ·进风温度对 Lacticin LLC518 得率及活力的影响第51页
     ·出风温度对 Lacticin LLC518 得率及活力的影响第51-52页
     ·风机对 Lacticin LLC518 得率及活力的影响第52-53页
     ·蠕动泵对 Lacticin LLC518 得率及活力的影响第53页
     ·Plackett-Burman 实验第53-54页
     ·Box-Benhnken 实验第54-57页
     ·模型的验证第57页
   ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的毒理学特性第57-58页
4 讨论第58-61页
   ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的 pH 稳定性第58页
   ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的吸附性第58页
   ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的纯化第58-60页
   ·乳酸乳球菌素 Lacticin LLC518 的制备第60-61页
5 结论第61-62页
参考文献第62-71页
附录 A 喷雾干燥样品图第71-72页
附录 B 喷雾干燥样品抑菌作用图第72-74页
致谢第74-75页
个人简介第75页
硕士期间的研究成果第75-76页

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