| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 缩略词 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-42页 |
| 1 苏云金芽孢杆菌及Bt毒素的研究进展 | 第16-22页 |
| ·苏云金芽孢杆菌 | 第16页 |
| ·Bt毒素 | 第16-19页 |
| ·Bt毒素的应用 | 第19-21页 |
| ·Bt毒素检测方法 | 第21-22页 |
| 2 Bt毒素免疫分析技术 | 第22-39页 |
| ·免疫分析技术基本原理 | 第22-29页 |
| ·噬菌体单链抗体的研究进展 | 第29-37页 |
| ·免疫分析法在Bt毒素检测中的应用 | 第37-39页 |
| 3 选题依据及研究内容 | 第39-42页 |
| 第二章 天然鼠源单链抗体库的构建 | 第42-58页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| 1 材料与方法 | 第43-49页 |
| ·试验材料 | 第43-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第44页 |
| ·scFv的合成 | 第44-46页 |
| ·单链抗体库的构建 | 第46-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-55页 |
| ·总RNA提取 | 第49页 |
| ·PCR扩增抗体V_H、V_L | 第49-51页 |
| ·SOE-PCR拼接scFv抗体基因 | 第51-52页 |
| ·转化子的鉴定 | 第52-53页 |
| ·噬菌体抗体库的构建、筛选及初步鉴定 | 第53-54页 |
| ·单链抗体表达及鉴定 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-58页 |
| 第三章 抗-Cry1C单链抗体的制备及间接ELISA检测技术 | 第58-76页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| 1 材料与方法 | 第59-66页 |
| ·试验材料及仪器 | 第59-61页 |
| ·抗-Cry1C单链抗体的筛选及鉴定 | 第61-64页 |
| ·可溶性单链抗体的表达及亲和常数的测定 | 第64-65页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-73页 |
| ·抗体库的筛选 | 第66-67页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第67-68页 |
| ·可溶性单链抗体的表达及条件优化 | 第68-71页 |
| ·可溶性单链抗体的相对亲和常数 | 第71-72页 |
| ·交叉反应率的计算 | 第72页 |
| ·间接ELISA | 第72-73页 |
| ·添加回收实验 | 第73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| 第四章 抗-Cry1Ac单链抗体的制备及三维结构模拟 | 第76-90页 |
| 摘要 | 第76-78页 |
| 1 材料与方法 | 第78-79页 |
| ·试验材料 | 第78页 |
| ·单链抗体的筛选及鉴定 | 第78-79页 |
| ·可溶性单链抗体的表达及亲和常数的测定 | 第79页 |
| ·结构模拟及分子对接 | 第79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-87页 |
| ·抗体库的筛选及阳性克隆的鉴定 | 第79-81页 |
| ·可溶性单链抗体的表达及纯化 | 第81-82页 |
| ·可溶性单链抗体的相对亲和常数及特异性的测定 | 第82-84页 |
| ·结构预测 | 第84-87页 |
| 3 讨论 | 第87-90页 |
| 第五章 抗-Cry1Ac多克隆抗体制备及时间分辨荧光免疫检测技术 | 第90-100页 |
| 摘要 | 第90页 |
| 1 材料与方法 | 第90-94页 |
| ·试验材料及仪器 | 第90-92页 |
| ·多克隆抗体制备及鉴定 | 第92-93页 |
| ·时间分辨检测方法的建立 | 第93-94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-98页 |
| ·抗血清的制备 | 第94-95页 |
| ·标准曲线的建立及灵敏度测定 | 第95页 |
| ·特异性检测 | 第95-96页 |
| ·基质效应分析 | 第96页 |
| ·回收率实验结果 | 第96-97页 |
| ·方法学比较 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98-100页 |
| 第六章 Cry1Ac抗体检测技术 | 第100-116页 |
| 摘要 | 第100-102页 |
| 1 材料与方法 | 第102-106页 |
| ·材料及仪器 | 第102页 |
| ·基于融合型scFv的免疫PCR检测方法 | 第102-103页 |
| ·基于可溶型scFv和多抗的双抗夹心ELISA检测方法 | 第103-104页 |
| ·基于可溶型scFv和多抗的胶体金免疫层析检测方法 | 第104-106页 |
| 2 结果与分析 | 第106-113页 |
| ·免疫PCR检测方法 | 第106-109页 |
| ·双抗夹心ELISA检测方法 | 第109-111页 |
| ·胶体金免疫层析检测方法 | 第111-113页 |
| 3 讨论 | 第113-116页 |
| ·免疫PCR检测技术 | 第113-114页 |
| ·双抗夹心ELISA检测技术 | 第114-115页 |
| ·胶体金免疫层析技术 | 第115-116页 |
| 全文总结 | 第116-118页 |
| 论文创新说明 | 第118-120页 |
| 研究展望 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-136页 |
| 附录 | 第136-144页 |
| 博士期间发表的论文 | 第144页 |
| 专利申请 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
