摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
引言 | 第11-13页 |
上篇 文献综述 | 第13-58页 |
第一章 植物免疫系统 | 第14-38页 |
1 植物免疫系统 | 第14-23页 |
·PAMPs引发的植物免疫反应及信号传导 | 第17-20页 |
·Effectors触发的植物免疫反应及信号传导 | 第20-23页 |
2 植物病原细菌效应分子的主要功能及研究进展 | 第23-28页 |
·T3SEs抑制PAMP介导的免疫反应 | 第25-26页 |
·T3SEs调控不同的寄主抗性过程 | 第26-28页 |
参考文献 | 第28-38页 |
第二章 植物病原卵菌效应分子的研究进展 | 第38-58页 |
1 植物病原卵菌效应分子的主要分类及研究进展 | 第39-45页 |
·质外体效应分子(apoplastic effectors) | 第40-42页 |
·细胞质效应分子(cytoplasmic effectors) | 第42-45页 |
2 RxLR效应分子的研究进展 | 第45-50页 |
·RxLR效应分子的转运机制 | 第45-46页 |
·RxLR效应分子毒性机理的研究进展 | 第46-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
下篇 研究内容 | 第58-150页 |
第一章 大豆疫霉RxLR效应分子的亚细胞定位 | 第60-82页 |
摘要 | 第60-63页 |
1 材料与方法 | 第63-68页 |
·供试植物和供试菌株的保存和培养 | 第63页 |
·大豆疫霉RxLR效应分子基因的克隆及重组质粒的构建 | 第63-66页 |
·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备 | 第66页 |
·农杆菌GV3101感受态细胞的制备和转化方法 | 第66-67页 |
·洋葱表皮基因枪瞬时表达基因的亚细胞定位观察 | 第67页 |
·烟草中瞬时表达基因的亚细胞定位观察 | 第67-68页 |
2 结果与分析 | 第68-76页 |
·对大豆疫霉的效应分子进行初步筛选和分析 | 第68-71页 |
·RxLR效应分子的亚细胞定位 | 第71-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-82页 |
第二章 RxLR效应分子Avh241的定位和功能分析 | 第82-112页 |
摘要 | 第82-85页 |
1 材料与方法 | 第85-94页 |
·供试植物和供试菌株的保存和培养 | 第85页 |
·大豆疫霉菌丝基因组DNA的提取 | 第85-86页 |
·效应分子Avh241及突变体重组质粒的构建 | 第86-88页 |
·农杆菌GV3101感受态细胞的制备和转化方法 | 第88页 |
·拟南芥原生质体转化 | 第88-90页 |
·目的基因在烟草中瞬时表达蛋白的检测 | 第90-94页 |
·植物基因枪瞬时表达 | 第94页 |
·烟草叶片离子渗漏测定 | 第94页 |
2 结果与分析 | 第94-105页 |
·大豆疫霉效应分子Avh241的多态性分析 | 第94-96页 |
·Avh241引起多种植物细胞死亡 | 第96-98页 |
·Avh241在植物中的亚细胞定位分析 | 第98-100页 |
·Avh241引起细胞死亡的功能域分析 | 第100-101页 |
·Avh241不同功能域突变体的定位分析 | 第101页 |
·决定Avh241亚细胞定位的功能域分析 | 第101-105页 |
3 讨论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-112页 |
第三章 Avh241引起植物细胞死亡信号通路的分析 | 第112-128页 |
摘要 | 第112-115页 |
1 材料与方法 | 第115-116页 |
·供试植物材料的处理 | 第115页 |
·通过基因枪在大豆叶片中瞬时表达目的基因 | 第115页 |
·基因沉默载体 | 第115页 |
·农杆菌菌株及转化 | 第115页 |
·病毒介导的基因沉默 | 第115页 |
·拟南芥原生质体转化 | 第115-116页 |
·离子渗漏技术测定烟草叶片细胞死亡程度 | 第116页 |
2 结果与分析 | 第116-120页 |
·Avh241引起细胞死亡不依赖于抗病基因 | 第116-117页 |
·Avh241引起细胞死亡信号通路依赖烟草的MEK2和WIPK | 第117-120页 |
3 讨论 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-128页 |
第四章 效应分子Avh241的毒性功能分析 | 第128-150页 |
摘要 | 第128-131页 |
1 材料与方法 | 第131-138页 |
·供试大豆疫霉菌株和植物的培养 | 第131页 |
·大豆疫霉游动孢子接种黄豆苗 | 第131页 |
·Q-RT PCR分析Avh241在大豆疫霉生活史阶段的表达 | 第131-132页 |
·RNA的提取及反转录 | 第132-133页 |
·逆转录合成sscDNA | 第133页 |
·Real-Time PCR | 第133-134页 |
·基因组的提取 | 第134页 |
·Q-PCR相对定量烟草中的辣椒疫霉菌丝量 | 第134页 |
·载体的构建 | 第134-135页 |
·大豆疫霉PEG介导的原生质体转化 | 第135-137页 |
·辣椒疫霉接种烟草叶片 | 第137页 |
·台盼蓝染色菌丝 | 第137-138页 |
2 结果与分析 | 第138-145页 |
·Avh241在大豆疫霉生活史阶段基因表达 | 第138-139页 |
·Avh241在大豆疫霉侵染寄主过程中的毒性功能 | 第139-140页 |
·Avh241蛋白能够促进辣椒疫霉侵染烟草 | 第140-143页 |
·Avh241的毒性功能与定位的关系 | 第143-145页 |
3 讨论 | 第145-147页 |
参考文献 | 第147-150页 |
全文总结及创新点 | 第150-152页 |
攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第152-154页 |
致谢 | 第154页 |