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大豆疫霉RxLR效应分子Avh241的功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
引言第11-13页
上篇 文献综述第13-58页
 第一章 植物免疫系统第14-38页
  1 植物免疫系统第14-23页
   ·PAMPs引发的植物免疫反应及信号传导第17-20页
   ·Effectors触发的植物免疫反应及信号传导第20-23页
  2 植物病原细菌效应分子的主要功能及研究进展第23-28页
   ·T3SEs抑制PAMP介导的免疫反应第25-26页
   ·T3SEs调控不同的寄主抗性过程第26-28页
  参考文献第28-38页
 第二章 植物病原卵菌效应分子的研究进展第38-58页
  1 植物病原卵菌效应分子的主要分类及研究进展第39-45页
   ·质外体效应分子(apoplastic effectors)第40-42页
   ·细胞质效应分子(cytoplasmic effectors)第42-45页
  2 RxLR效应分子的研究进展第45-50页
   ·RxLR效应分子的转运机制第45-46页
   ·RxLR效应分子毒性机理的研究进展第46-50页
  参考文献第50-58页
下篇 研究内容第58-150页
 第一章 大豆疫霉RxLR效应分子的亚细胞定位第60-82页
  摘要第60-63页
  1 材料与方法第63-68页
   ·供试植物和供试菌株的保存和培养第63页
   ·大豆疫霉RxLR效应分子基因的克隆及重组质粒的构建第63-66页
   ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备第66页
   ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备和转化方法第66-67页
   ·洋葱表皮基因枪瞬时表达基因的亚细胞定位观察第67页
   ·烟草中瞬时表达基因的亚细胞定位观察第67-68页
  2 结果与分析第68-76页
   ·对大豆疫霉的效应分子进行初步筛选和分析第68-71页
   ·RxLR效应分子的亚细胞定位第71-76页
  3 讨论第76-78页
  参考文献第78-82页
 第二章 RxLR效应分子Avh241的定位和功能分析第82-112页
  摘要第82-85页
  1 材料与方法第85-94页
   ·供试植物和供试菌株的保存和培养第85页
   ·大豆疫霉菌丝基因组DNA的提取第85-86页
   ·效应分子Avh241及突变体重组质粒的构建第86-88页
   ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备和转化方法第88页
   ·拟南芥原生质体转化第88-90页
   ·目的基因在烟草中瞬时表达蛋白的检测第90-94页
   ·植物基因枪瞬时表达第94页
   ·烟草叶片离子渗漏测定第94页
  2 结果与分析第94-105页
   ·大豆疫霉效应分子Avh241的多态性分析第94-96页
   ·Avh241引起多种植物细胞死亡第96-98页
   ·Avh241在植物中的亚细胞定位分析第98-100页
   ·Avh241引起细胞死亡的功能域分析第100-101页
   ·Avh241不同功能域突变体的定位分析第101页
   ·决定Avh241亚细胞定位的功能域分析第101-105页
  3 讨论第105-107页
  参考文献第107-112页
 第三章 Avh241引起植物细胞死亡信号通路的分析第112-128页
  摘要第112-115页
  1 材料与方法第115-116页
   ·供试植物材料的处理第115页
   ·通过基因枪在大豆叶片中瞬时表达目的基因第115页
   ·基因沉默载体第115页
   ·农杆菌菌株及转化第115页
   ·病毒介导的基因沉默第115页
   ·拟南芥原生质体转化第115-116页
   ·离子渗漏技术测定烟草叶片细胞死亡程度第116页
  2 结果与分析第116-120页
   ·Avh241引起细胞死亡不依赖于抗病基因第116-117页
   ·Avh241引起细胞死亡信号通路依赖烟草的MEK2和WIPK第117-120页
  3 讨论第120-122页
  参考文献第122-128页
 第四章 效应分子Avh241的毒性功能分析第128-150页
  摘要第128-131页
  1 材料与方法第131-138页
   ·供试大豆疫霉菌株和植物的培养第131页
   ·大豆疫霉游动孢子接种黄豆苗第131页
   ·Q-RT PCR分析Avh241在大豆疫霉生活史阶段的表达第131-132页
   ·RNA的提取及反转录第132-133页
   ·逆转录合成sscDNA第133页
   ·Real-Time PCR第133-134页
   ·基因组的提取第134页
   ·Q-PCR相对定量烟草中的辣椒疫霉菌丝量第134页
   ·载体的构建第134-135页
   ·大豆疫霉PEG介导的原生质体转化第135-137页
   ·辣椒疫霉接种烟草叶片第137页
   ·台盼蓝染色菌丝第137-138页
  2 结果与分析第138-145页
   ·Avh241在大豆疫霉生活史阶段基因表达第138-139页
   ·Avh241在大豆疫霉侵染寄主过程中的毒性功能第139-140页
   ·Avh241蛋白能够促进辣椒疫霉侵染烟草第140-143页
   ·Avh241的毒性功能与定位的关系第143-145页
  3 讨论第145-147页
  参考文献第147-150页
全文总结及创新点第150-152页
攻读博士学位期间发表的研究论文第152-154页
致谢第154页

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