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小菜蛾对多杀霉素和氯虫苯甲酰胺抗性的特征及机理

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
第一章 文献综述第16-52页
 1 小菜蛾抗药性研究概述第16-27页
   ·小菜蛾的发生与为害第16-17页
   ·小菜蛾抗药性现状第17-18页
   ·小菜蛾的抗性机理第18-26页
     ·表皮穿透率下降第18页
     ·解毒代谢酶活力增强第18-19页
     ·靶标抗性第19-26页
   ·小菜蛾抗性的化学治理第26-27页
 2 多杀霉素抗性研究概况第27-35页
   ·多杀霉素的杀虫活性和作用机制第28-29页
   ·昆虫对多杀霉素的抗药性现状第29-31页
   ·多杀霉素的交互抗性第31-33页
   ·多杀霉素的抗性遗传与适合度第33-34页
   ·多杀霉素的抗性机理第34-35页
 3 新型二酰胺类杀虫剂及其抗药性第35-49页
   ·新型二酰胺类杀虫剂的研发和性能第35-41页
     ·邻苯二甲酰胺类杀虫剂第36-38页
     ·邻甲酰胺基苯甲酰胺类杀虫剂第38-41页
   ·鱼尼丁受体第41-48页
     ·鱼尼丁受体的结构和类型第41-42页
     ·鱼尼丁受体的功能第42-44页
     ·鱼尼丁受体的调节第44-45页
     ·昆虫鱼尼丁受体与二酰胺类杀虫剂第45-48页
   ·新型二酰胺类杀虫剂的抗性演化第48-49页
 4 本研究的目的和意义第49-52页
第二章 小菜蛾抗多杀霉素品系的选育及稳定性第52-58页
 摘要第52-53页
 1 材料与方法第53-54页
   ·供试昆虫第53页
   ·供试药剂第53页
   ·室内毒力测定方法第53-54页
   ·抗性选育方法第54页
 2 结果与分析第54-56页
   ·抗性选育及毒力测定第54-55页
   ·抗多杀霉素品系的抗性稳定性第55页
   ·小菜蛾对多杀霉素的抗性发展和衰退趋势第55-56页
 3 讨论第56-58页
第三章 小菜蛾抗多杀霉素品系的交互抗性和抗性遗传第58-72页
 摘要第58-59页
 1 材料与方法第59-60页
   ·供试昆虫第59页
   ·供试药剂第59页
   ·交互抗性测定方法第59页
   ·正反交实验设计第59-60页
     ·抗性的显隐性分析第60页
     ·抗性等位基因数目的计算第60页
 2 结果与分析第60-70页
   ·交互抗性谱第60-62页
   ·小菜蛾对多杀霉素的抗性遗传方式第62-66页
   ·抗多杀霉素品系对阿维菌素抗性的特征第66-70页
     ·SZ-Spin83品系对阿维菌素的抗性稳定性第66页
     ·PBO在SZ-Spin83品系中对阿维菌素毒力的增效作用第66-67页
     ·SZ-Spin83品系对阿维菌素交互抗性的遗传方式第67-70页
 3 讨论第70-72页
第四章 小菜蛾抗多杀霉素的生化和靶标抗性机制第72-102页
 摘要第72-73页
 1 材料与方法第73-82页
   ·供试昆虫第73页
   ·主要生化试验试剂第73-74页
   ·主要分子试验试剂第74页
   ·主要仪器设备第74页
   ·增效剂活体增效试验第74页
   ·酶活力测定第74-76页
     ·多功能氧化酶(MFO)活力测定第74-75页
     ·谷胱甘肽S-转移酶活力(GST)测定第75页
     ·酯酶活力(EST)测定第75-76页
     ·蛋白质浓度测定第76页
   ·小菜蛾cDNA模板制备第76-78页
     ·小菜蛾总RNA的提取第76页
     ·RNA质量检测第76页
     ·普通cDNA第一链的合成第76-77页
     ·RACE cDNA第一链的合成第77-78页
   ·PCR反应第78-79页
     ·引物设计第78页
     ·PCR体系和程序第78-79页
   ·PCR产物的纯化回收第79-80页
   ·连接反应第80页
   ·转化反应及扩大培养第80页
   ·重组质粒的提取及酶切检测第80-81页
   ·测序与分析第81页
   ·荧光实时定量PCR第81-82页
 2 结果与分析第82-97页
   ·活体增效试验第82-83页
   ·代谢酶活性测定第83-85页
   ·烟碱型乙酰胆碱受体α亚基片段的克隆与分析第85-86页
   ·Pxa2亚基cDNA全序列的克隆与分析第86-91页
     ·RACE技术获得Pxa2亚基的末端序列第86页
     ·Pxa2亚基cDNA全序列组装与验证第86页
     ·Pxa2亚基cDNA序列分析第86-88页
     ·小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体Pxa2亚基的系统进化第88-91页
   ·Pxa2亚基与多杀霉素抗性第91-94页
     ·Roth与SZ-Spin83品系的Pxa2亚基序列比较第91-92页
     ·Pxa2亚基mRNA水平相对表达量第92-94页
   ·Pxa6亚基与多杀霉素抗性第94-97页
     ·Roth与SZ-Spin83品系的Pxa6亚基序列比较第94-95页
     ·Roth与SZ-Spin83品系的Pxa6亚基mRNA表达量第95-97页
 3 讨论第97-102页
   ·多杀霉素抗性的生化机理第98-99页
   ·多杀霉素抗性的靶标突变机理第99-102页
第五章 小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的敏感毒力基线第102-110页
 摘要第102-103页
 1 材料与方法第103-105页
   ·供试昆虫第103-105页
   ·供试药剂和化学品第105页
   ·生物测定和增效试验第105页
 2 结果与分析第105-107页
   ·敏感毒力基线的建立第105-106页
   ·氯虫苯甲酰胺的增效实验第106-107页
 3 讨论第107-110页
第六章 田间抗氯虫苯甲酰胺种群的抗性特征第110-122页
 摘要第110-111页
 1 材料与方法第111-113页
   ·供试昆虫第111-112页
   ·供试药剂和化学品第112页
   ·生物测定和增效试验第112页
   ·抗性遗传方式测定第112-113页
   ·抗性稳定性分析第113页
 2 结果与分析第113-118页
   ·小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗药性监测第113-114页
   ·氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺的交互抗性第114-115页
   ·氯虫苯甲酰胺抗性的母体效应、性别连锁及显隐性第115-116页
   ·小菜蛾对氯虫苯甲醜胺的抗性稳定性第116-117页
   ·氯虫苯甲酰胺的活体增效实验第117-118页
 3 讨论第118-122页
   ·间小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性演化第118-119页
   ·二酰胺类杀虫剂间的交互抗性及氯虫苯甲酰胺抗性的稳定性第119-120页
   ·小菜蛾田间种群对氯虫苯甲酰胺抗性的遗传方式及机理探测第120-122页
第七章 小菜蛾RyR基因克隆及其与氯虫苯甲酰胺抗性的关系第122-154页
 摘要第122-123页
 1 材料与方法第123-131页
   ·供试昆虫第123-124页
   ·主要分子试验试剂第124页
   ·主要仪器和设备第124页
   ·小菜蛾PxRyR基因全长克隆第124-126页
   ·序列分析和系统发育树构建第126-127页
   ·PCR反应第127-129页
     ·引物设计第127-128页
     ·PCR体系、程序及产物连接、转化第128-129页
   ·相对定量PCR第129-131页
     ·小菜蛾总RNA的提取第129-130页
     ·RNA质量检测第130页
     ·基因组DNA去除反应第130页
     ·反转录反应第130页
     ·定量PCR引物设计第130-131页
 2 结果与分析第131-148页
   ·PxRyR基因cDNA全长克隆第131-132页
   ·小菜蛾鱼尼丁受体基因序列结构与分析第132-137页
   ·鱼尼丁受体基因家族的系统进化第137-138页
   ·小菜蛾PxRyR基因的时空表达第138-140页
     ·定量PCR产物溶解曲线和扩增效率一致性分析第138-140页
     ·PxRyR基因在小菜蛾不同发育阶段及不同组织部位的表达量第140页
   ·ZC-R品系与Roth品系PxRyR基因C-端重要功能区序列比对第140-142页
   ·遗传连锁第142-146页
     ·PxRyR基因13,349位碱基的遗传分析第142-145页
     ·PxRyR基因I4790K和G4946E位氨基酸遗传分析第145-146页
   ·PxRyR基因在抗性和敏感品系间的表达量第146-148页
     ·定量PCR引物有效性分析第146-147页
     ·PxRyR基因在抗性和敏感品系间的表达量比较第147-148页
 3 讨论第148-154页
   ·鱼尼丁受体的结构和功能特征第149-151页
   ·小菜蛾鱼尼丁受体与氯虫苯甲酰胺抗性第151-154页
全文总结第154-156页
参考文献第156-174页
攻读学位期间发表的学术论文第174-176页
致谢第176页

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