摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-52页 |
1 小菜蛾抗药性研究概述 | 第16-27页 |
·小菜蛾的发生与为害 | 第16-17页 |
·小菜蛾抗药性现状 | 第17-18页 |
·小菜蛾的抗性机理 | 第18-26页 |
·表皮穿透率下降 | 第18页 |
·解毒代谢酶活力增强 | 第18-19页 |
·靶标抗性 | 第19-26页 |
·小菜蛾抗性的化学治理 | 第26-27页 |
2 多杀霉素抗性研究概况 | 第27-35页 |
·多杀霉素的杀虫活性和作用机制 | 第28-29页 |
·昆虫对多杀霉素的抗药性现状 | 第29-31页 |
·多杀霉素的交互抗性 | 第31-33页 |
·多杀霉素的抗性遗传与适合度 | 第33-34页 |
·多杀霉素的抗性机理 | 第34-35页 |
3 新型二酰胺类杀虫剂及其抗药性 | 第35-49页 |
·新型二酰胺类杀虫剂的研发和性能 | 第35-41页 |
·邻苯二甲酰胺类杀虫剂 | 第36-38页 |
·邻甲酰胺基苯甲酰胺类杀虫剂 | 第38-41页 |
·鱼尼丁受体 | 第41-48页 |
·鱼尼丁受体的结构和类型 | 第41-42页 |
·鱼尼丁受体的功能 | 第42-44页 |
·鱼尼丁受体的调节 | 第44-45页 |
·昆虫鱼尼丁受体与二酰胺类杀虫剂 | 第45-48页 |
·新型二酰胺类杀虫剂的抗性演化 | 第48-49页 |
4 本研究的目的和意义 | 第49-52页 |
第二章 小菜蛾抗多杀霉素品系的选育及稳定性 | 第52-58页 |
摘要 | 第52-53页 |
1 材料与方法 | 第53-54页 |
·供试昆虫 | 第53页 |
·供试药剂 | 第53页 |
·室内毒力测定方法 | 第53-54页 |
·抗性选育方法 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-56页 |
·抗性选育及毒力测定 | 第54-55页 |
·抗多杀霉素品系的抗性稳定性 | 第55页 |
·小菜蛾对多杀霉素的抗性发展和衰退趋势 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
第三章 小菜蛾抗多杀霉素品系的交互抗性和抗性遗传 | 第58-72页 |
摘要 | 第58-59页 |
1 材料与方法 | 第59-60页 |
·供试昆虫 | 第59页 |
·供试药剂 | 第59页 |
·交互抗性测定方法 | 第59页 |
·正反交实验设计 | 第59-60页 |
·抗性的显隐性分析 | 第60页 |
·抗性等位基因数目的计算 | 第60页 |
2 结果与分析 | 第60-70页 |
·交互抗性谱 | 第60-62页 |
·小菜蛾对多杀霉素的抗性遗传方式 | 第62-66页 |
·抗多杀霉素品系对阿维菌素抗性的特征 | 第66-70页 |
·SZ-Spin83品系对阿维菌素的抗性稳定性 | 第66页 |
·PBO在SZ-Spin83品系中对阿维菌素毒力的增效作用 | 第66-67页 |
·SZ-Spin83品系对阿维菌素交互抗性的遗传方式 | 第67-70页 |
3 讨论 | 第70-72页 |
第四章 小菜蛾抗多杀霉素的生化和靶标抗性机制 | 第72-102页 |
摘要 | 第72-73页 |
1 材料与方法 | 第73-82页 |
·供试昆虫 | 第73页 |
·主要生化试验试剂 | 第73-74页 |
·主要分子试验试剂 | 第74页 |
·主要仪器设备 | 第74页 |
·增效剂活体增效试验 | 第74页 |
·酶活力测定 | 第74-76页 |
·多功能氧化酶(MFO)活力测定 | 第74-75页 |
·谷胱甘肽S-转移酶活力(GST)测定 | 第75页 |
·酯酶活力(EST)测定 | 第75-76页 |
·蛋白质浓度测定 | 第76页 |
·小菜蛾cDNA模板制备 | 第76-78页 |
·小菜蛾总RNA的提取 | 第76页 |
·RNA质量检测 | 第76页 |
·普通cDNA第一链的合成 | 第76-77页 |
·RACE cDNA第一链的合成 | 第77-78页 |
·PCR反应 | 第78-79页 |
·引物设计 | 第78页 |
·PCR体系和程序 | 第78-79页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第79-80页 |
·连接反应 | 第80页 |
·转化反应及扩大培养 | 第80页 |
·重组质粒的提取及酶切检测 | 第80-81页 |
·测序与分析 | 第81页 |
·荧光实时定量PCR | 第81-82页 |
2 结果与分析 | 第82-97页 |
·活体增效试验 | 第82-83页 |
·代谢酶活性测定 | 第83-85页 |
·烟碱型乙酰胆碱受体α亚基片段的克隆与分析 | 第85-86页 |
·Pxa2亚基cDNA全序列的克隆与分析 | 第86-91页 |
·RACE技术获得Pxa2亚基的末端序列 | 第86页 |
·Pxa2亚基cDNA全序列组装与验证 | 第86页 |
·Pxa2亚基cDNA序列分析 | 第86-88页 |
·小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体Pxa2亚基的系统进化 | 第88-91页 |
·Pxa2亚基与多杀霉素抗性 | 第91-94页 |
·Roth与SZ-Spin83品系的Pxa2亚基序列比较 | 第91-92页 |
·Pxa2亚基mRNA水平相对表达量 | 第92-94页 |
·Pxa6亚基与多杀霉素抗性 | 第94-97页 |
·Roth与SZ-Spin83品系的Pxa6亚基序列比较 | 第94-95页 |
·Roth与SZ-Spin83品系的Pxa6亚基mRNA表达量 | 第95-97页 |
3 讨论 | 第97-102页 |
·多杀霉素抗性的生化机理 | 第98-99页 |
·多杀霉素抗性的靶标突变机理 | 第99-102页 |
第五章 小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的敏感毒力基线 | 第102-110页 |
摘要 | 第102-103页 |
1 材料与方法 | 第103-105页 |
·供试昆虫 | 第103-105页 |
·供试药剂和化学品 | 第105页 |
·生物测定和增效试验 | 第105页 |
2 结果与分析 | 第105-107页 |
·敏感毒力基线的建立 | 第105-106页 |
·氯虫苯甲酰胺的增效实验 | 第106-107页 |
3 讨论 | 第107-110页 |
第六章 田间抗氯虫苯甲酰胺种群的抗性特征 | 第110-122页 |
摘要 | 第110-111页 |
1 材料与方法 | 第111-113页 |
·供试昆虫 | 第111-112页 |
·供试药剂和化学品 | 第112页 |
·生物测定和增效试验 | 第112页 |
·抗性遗传方式测定 | 第112-113页 |
·抗性稳定性分析 | 第113页 |
2 结果与分析 | 第113-118页 |
·小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗药性监测 | 第113-114页 |
·氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺的交互抗性 | 第114-115页 |
·氯虫苯甲酰胺抗性的母体效应、性别连锁及显隐性 | 第115-116页 |
·小菜蛾对氯虫苯甲醜胺的抗性稳定性 | 第116-117页 |
·氯虫苯甲酰胺的活体增效实验 | 第117-118页 |
3 讨论 | 第118-122页 |
·间小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性演化 | 第118-119页 |
·二酰胺类杀虫剂间的交互抗性及氯虫苯甲酰胺抗性的稳定性 | 第119-120页 |
·小菜蛾田间种群对氯虫苯甲酰胺抗性的遗传方式及机理探测 | 第120-122页 |
第七章 小菜蛾RyR基因克隆及其与氯虫苯甲酰胺抗性的关系 | 第122-154页 |
摘要 | 第122-123页 |
1 材料与方法 | 第123-131页 |
·供试昆虫 | 第123-124页 |
·主要分子试验试剂 | 第124页 |
·主要仪器和设备 | 第124页 |
·小菜蛾PxRyR基因全长克隆 | 第124-126页 |
·序列分析和系统发育树构建 | 第126-127页 |
·PCR反应 | 第127-129页 |
·引物设计 | 第127-128页 |
·PCR体系、程序及产物连接、转化 | 第128-129页 |
·相对定量PCR | 第129-131页 |
·小菜蛾总RNA的提取 | 第129-130页 |
·RNA质量检测 | 第130页 |
·基因组DNA去除反应 | 第130页 |
·反转录反应 | 第130页 |
·定量PCR引物设计 | 第130-131页 |
2 结果与分析 | 第131-148页 |
·PxRyR基因cDNA全长克隆 | 第131-132页 |
·小菜蛾鱼尼丁受体基因序列结构与分析 | 第132-137页 |
·鱼尼丁受体基因家族的系统进化 | 第137-138页 |
·小菜蛾PxRyR基因的时空表达 | 第138-140页 |
·定量PCR产物溶解曲线和扩增效率一致性分析 | 第138-140页 |
·PxRyR基因在小菜蛾不同发育阶段及不同组织部位的表达量 | 第140页 |
·ZC-R品系与Roth品系PxRyR基因C-端重要功能区序列比对 | 第140-142页 |
·遗传连锁 | 第142-146页 |
·PxRyR基因13,349位碱基的遗传分析 | 第142-145页 |
·PxRyR基因I4790K和G4946E位氨基酸遗传分析 | 第145-146页 |
·PxRyR基因在抗性和敏感品系间的表达量 | 第146-148页 |
·定量PCR引物有效性分析 | 第146-147页 |
·PxRyR基因在抗性和敏感品系间的表达量比较 | 第147-148页 |
3 讨论 | 第148-154页 |
·鱼尼丁受体的结构和功能特征 | 第149-151页 |
·小菜蛾鱼尼丁受体与氯虫苯甲酰胺抗性 | 第151-154页 |
全文总结 | 第154-156页 |
参考文献 | 第156-174页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第174-176页 |
致谢 | 第176页 |