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脂联素基因去信号肽区原核表达及酶免检测方法研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
符号与缩略语第10-12页
第一章 前言第12-22页
   ·脂联素概述第12-17页
     ·脂联素的发现第12-13页
     ·脂联素的结构特点第13-14页
     ·脂联素受体第14-15页
     ·脂联素的信号转导通路第15-17页
   ·脂联素与疾病第17-19页
     ·脂联素与肥胖(obesity)第17-18页
     ·脂联素与冠心病(coronary heart disease,CHD)第18页
     ·脂联素与Ⅱ型糖尿病(type Ⅱ Diabetes Mellitus)第18-19页
   ·脂联素检测方法的选择第19-20页
   ·研究意义第20-22页
第二章 材料与方法第22-44页
   ·材料第22-32页
     ·菌种第22页
     ·载体第22-23页
     ·组织、血清第23页
     ·引物第23页
     ·主要仪器与设备第23-24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·主要溶液的配制第25-32页
   ·方法第32-44页
     ·人脂联素基因去信号肽区的克隆与鉴定第32-37页
     ·重组ΔSADPN 蛋白的诱导表达及纯化第37-41页
     ·双抗体夹心ELISA 检测方法的初步建立第41-44页
第三章 结果第44-52页
   ·人脂肪组织总RNA 的提取第44页
   ·PCR 扩增目的基因第44页
   ·重组质粒酶切鉴定第44-45页
   ·重组菌 BL21(DE3)/pET41a(+)/ΔSADPN 诱导表达第45页
   ·重组ΔSADPN 蛋白活性鉴定第45-46页
   ·重组ΔSADPN 蛋白诱导表达条件的优化第46-47页
   ·重组ΔSADPN 蛋白的纯化第47-48页
   ·重组ΔSADPN 蛋白浓度的测定第48页
   ·检测标准品的制备第48页
   ·标准品稳定性试验第48-49页
   ·包被抗体和检测抗体最佳浓度的选择第49页
   ·检测标准曲线的绘制第49-50页
   ·精密性试验第50页
   ·方法对比试验第50-52页
第四章 讨论第52-58页
   ·表达载体的选择第52-54页
   ·目的片段的选取第54-55页
   ·可溶性表达条件的探索第55-56页
   ·标准品的制备第56-57页
   ·标准品的保存第57页
   ·与血清标准品比较第57-58页
第五章 结论第58-60页
参考文献第60-66页
附录 临床对比研究结果第66-68页
致谢第68-70页
攻读学位期间发表的学术论文目录第70-71页

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