| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 符号与缩略语 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| ·脂联素概述 | 第12-17页 |
| ·脂联素的发现 | 第12-13页 |
| ·脂联素的结构特点 | 第13-14页 |
| ·脂联素受体 | 第14-15页 |
| ·脂联素的信号转导通路 | 第15-17页 |
| ·脂联素与疾病 | 第17-19页 |
| ·脂联素与肥胖(obesity) | 第17-18页 |
| ·脂联素与冠心病(coronary heart disease,CHD) | 第18页 |
| ·脂联素与Ⅱ型糖尿病(type Ⅱ Diabetes Mellitus) | 第18-19页 |
| ·脂联素检测方法的选择 | 第19-20页 |
| ·研究意义 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-44页 |
| ·材料 | 第22-32页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·载体 | 第22-23页 |
| ·组织、血清 | 第23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-32页 |
| ·方法 | 第32-44页 |
| ·人脂联素基因去信号肽区的克隆与鉴定 | 第32-37页 |
| ·重组ΔSADPN 蛋白的诱导表达及纯化 | 第37-41页 |
| ·双抗体夹心ELISA 检测方法的初步建立 | 第41-44页 |
| 第三章 结果 | 第44-52页 |
| ·人脂肪组织总RNA 的提取 | 第44页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第44页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组菌 BL21(DE3)/pET41a(+)/ΔSADPN 诱导表达 | 第45页 |
| ·重组ΔSADPN 蛋白活性鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组ΔSADPN 蛋白诱导表达条件的优化 | 第46-47页 |
| ·重组ΔSADPN 蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·重组ΔSADPN 蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| ·检测标准品的制备 | 第48页 |
| ·标准品稳定性试验 | 第48-49页 |
| ·包被抗体和检测抗体最佳浓度的选择 | 第49页 |
| ·检测标准曲线的绘制 | 第49-50页 |
| ·精密性试验 | 第50页 |
| ·方法对比试验 | 第50-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-58页 |
| ·表达载体的选择 | 第52-54页 |
| ·目的片段的选取 | 第54-55页 |
| ·可溶性表达条件的探索 | 第55-56页 |
| ·标准品的制备 | 第56-57页 |
| ·标准品的保存 | 第57页 |
| ·与血清标准品比较 | 第57-58页 |
| 第五章 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 临床对比研究结果 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第70-71页 |