| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-29页 |
| ·研究微孢子虫的意义 | 第12-14页 |
| ·微孢子虫侵染宿主的模式 | 第14-16页 |
| ·微孢子虫的生活史及其体外培养技术 | 第16-19页 |
| ·微孢子虫基因和蛋白的研究进展 | 第19-22页 |
| ·昆虫的免疫机制及病原体的躲避策略 | 第22-26页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第26-29页 |
| 第2章 家蚕微孢子虫孢子生殖阶段细胞的分离 | 第29-37页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·生物材料 | 第29-30页 |
| ·主要仪器与设备 | 第30页 |
| ·主要试剂及配制 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子的繁殖与纯化 | 第30页 |
| ·Percoll密度梯度离心法分离孢子生殖细胞 | 第30-32页 |
| ·透射电镜检测孢子纯度 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-34页 |
| ·讨论与展望 | 第34-37页 |
| 第3章 孢子母细胞和成熟孢子蛋白的双向电泳及质谱分析 | 第37-51页 |
| ·实验材料 | 第37-40页 |
| ·生物材料 | 第37页 |
| ·主要仪器与设备 | 第37-38页 |
| ·主要试剂及配制 | 第38-40页 |
| ·实验方法 | 第40-46页 |
| ·孢子蛋白制备方法的优化 | 第40页 |
| ·孢子母细胞和成熟孢子蛋白的双向电泳分析 | 第40-43页 |
| ·孢子主要蛋白的MALDI-TOF/TOF MS分析及数据库搜索 | 第43-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·破碎法制备孢子蛋白 | 第46页 |
| ·孢子母细胞和成熟孢子蛋白的双向电泳分析 | 第46-47页 |
| ·MALDI-TOF/TOF MS分析及数据库搜索 | 第47-49页 |
| ·讨论与展望 | 第49-51页 |
| 第4章 NbSWP5蛋白的克隆、表达及精细定位 | 第51-67页 |
| ·材料 | 第51-53页 |
| ·生物材料 | 第51页 |
| ·主要仪器与设备 | 第51页 |
| ·主要试剂及配制 | 第51-53页 |
| ·实验方法 | 第53-60页 |
| ·NbSWP5的基因序列分析 | 第53页 |
| ·NbSWP5基因的克隆及原核表达 | 第53-58页 |
| ·Anti-NbSWP5多克隆抗体的制备 | 第58页 |
| ·Western blotting及间接免疫荧光试验 | 第58-59页 |
| ·NbSWP5蛋白在孢子表面的免疫胶体金电镜定位观察 | 第59-60页 |
| ·结果 | 第60-65页 |
| ·NbSWP5蛋白序列分析 | 第60-62页 |
| ·NbSWP5基因的克隆及原核表达 | 第62-64页 |
| ·NbSWP5蛋白在成熟孢子和孢子母细胞中的表达差异 | 第64页 |
| ·NbSWP5蛋白在孢子表面的免疫胶体金电镜定位观察 | 第64-65页 |
| ·分析与讨论 | 第65-67页 |
| 第5章 NbSWP5蛋白在家蚕微孢子虫侵染过程中的作用 | 第67-81页 |
| ·实验材料 | 第67-68页 |
| ·生物材料 | 第67页 |
| ·主要仪器与设备 | 第67页 |
| ·主要试剂及配制 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-70页 |
| ·昆虫培养细胞对FRS、KTS及孢子母细胞的吞噬试验 | 第68-69页 |
| ·细胞松弛素D对吞噬作用的抑制试验 | 第69页 |
| ·DAPI荧光染色观察昆虫培养细胞对孢子的吞噬 | 第69页 |
| ·透射电镜观察昆虫培养细胞对孢子的吞噬 | 第69-70页 |
| ·间接免疫荧光法观察昆虫培养细胞对孢子的吞噬 | 第70页 |
| ·NbSWP5蛋白对孢子母细胞的保护作用 | 第70页 |
| ·结果 | 第70-78页 |
| ·培养细胞对孢子的吞噬作用 | 第70-75页 |
| ·细胞松弛素D可以抑制培养细胞对孢子的吞噬作用 | 第75-76页 |
| ·NbSWP5蛋白对CSS及孢子母细胞的保护作用 | 第76-78页 |
| ·分析与讨论 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 附录1 | 第89-92页 |
| 附录2 | 第92-93页 |
| 附录3 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
