| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 本论文常用缩写词英汉对照 | 第16-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-27页 |
| ·微孢子虫概述 | 第17-19页 |
| ·微孢子虫侵染宿主相关蛋白和基因的研究 | 第19-22页 |
| ·微孢子虫侵染宿主的方式 | 第19-20页 |
| ·微孢子虫极管蛋白的研究 | 第20-21页 |
| ·微孢子虫孢壁蛋白的研究 | 第21-22页 |
| ·差异表达基因的鉴定方法及应用 | 第22-24页 |
| ·研究背景与目的意义 | 第24-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 第2章 内网虫属微孢子虫嵊州株的核糖体RNA基因分析 | 第27-47页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·生物材料 | 第27-28页 |
| ·质粒和菌株 | 第28页 |
| ·主要仪器与设备 | 第28-29页 |
| ·主要试剂与配制 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-37页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株的繁殖与分离纯化 | 第30-32页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株的形态结构观察 | 第32页 |
| ·光学显微镜检 | 第32页 |
| ·电子显微镜检 | 第32页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株的rRNA全基因克隆测序 | 第32-37页 |
| ·rRNA全基因引物设计 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增rRNA全基因 | 第33-34页 |
| ·PCR产物的割胶回收 | 第34-35页 |
| ·连接反应 | 第35页 |
| ·转化 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的少量提取与鉴定 | 第36-37页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株的rRNA全基因序列分析 | 第37页 |
| ·一级结构分析 | 第37页 |
| ·序列的同源性分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-44页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株的显微结构 | 第37-39页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株rRNA基因序列的PCR扩增 | 第39-41页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株rRNA基因序列的测序结果 | 第41-42页 |
| ·内网虫属微孢子虫嵊州株rRNA基因序列分析结果 | 第42-44页 |
| ·序列的一级结构 | 第42页 |
| ·序列的同源性 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 第3章 家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP12基因的克隆表达分析 | 第47-71页 |
| ·材料 | 第47-52页 |
| ·生物材料 | 第47页 |
| ·质粒和菌株 | 第47-48页 |
| ·主要仪器与设备 | 第48页 |
| ·主要试剂与配制 | 第48-52页 |
| ·方法 | 第52-61页 |
| ·家蚕微孢子虫的分离与纯化 | 第52页 |
| ·家蚕微孢子虫DNA的提取 | 第52-53页 |
| ·引物设计与PCR扩增目的基因 | 第53-54页 |
| ·重组质粒pMD18-T/SWP12的构建 | 第54页 |
| ·PCR产物割胶回收 | 第54页 |
| ·连接反应 | 第54页 |
| ·质粒转化 | 第54页 |
| ·重组质粒的少量抽提与鉴定 | 第54页 |
| ·原核表达载体pET-30a/SWP12的构建 | 第54-55页 |
| ·重组蛋白的诱导与纯化 | 第55-57页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第55页 |
| ·重组蛋白可溶性分析 | 第55-56页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第56页 |
| ·考马斯亮兰法(Bradford法)测定蛋白浓度 | 第56-57页 |
| ·家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP12多克隆抗体的制备与纯化 | 第57-58页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第57页 |
| ·多克隆抗体的纯化 | 第57-58页 |
| ·家蚕微孢子虫孢壁蛋白提取 | 第58页 |
| ·多克隆抗体特异性鉴定 | 第58-59页 |
| ·酶联免疫反应 | 第58-59页 |
| ·Western blot | 第59页 |
| ·家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP12的表达与定位 | 第59-61页 |
| ·孢子粘附及感染实验 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-68页 |
| ·目的基因的PCR扩增及重组质粒pMD18-T/SWP12的构建 | 第61-63页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第63页 |
| ·重组蛋白的原核表达与纯化 | 第63-64页 |
| ·家蚕微孢子虫孢壁蛋白的提取结果 | 第64-65页 |
| ·抗体特异性鉴定结果 | 第65-66页 |
| ·家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP12在细胞中的表达与定位 | 第66-67页 |
| ·多克隆抗体对家蚕微孢子虫孢子的粘附及感染的抑制效果 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第4章 家蚕微孢子虫感染BmN细胞的基因差异表达 | 第71-87页 |
| ·材料与方法 | 第71-72页 |
| ·生物材料 | 第71-72页 |
| ·质粒和菌株 | 第72页 |
| ·主要仪器与设备 | 第72页 |
| ·主要试剂与配制 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-76页 |
| ·家蚕微孢子虫的繁殖与分离纯化 | 第72页 |
| ·BmN细胞培养与家蚕微孢子虫接种处理 | 第72-73页 |
| ·BmN细胞总RNA抽提与纯化 | 第73页 |
| ·BmN细胞的RNA提取 | 第73页 |
| ·去除总RNA中的DNA | 第73页 |
| ·GeneFishing法分离差异表达基因 | 第73-75页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第74-75页 |
| ·GeneFishing~(TM) PCR | 第75页 |
| ·差异片段的回收、连接与转化和鉴定 | 第75-76页 |
| ·PCR产物割胶回收 | 第75页 |
| ·连接反应 | 第75页 |
| ·质粒转化 | 第75-76页 |
| ·重组质粒的少量提取与鉴定 | 第76页 |
| ·差异表达基因的序列分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-83页 |
| ·BmN细胞的RNA提取结果 | 第76-77页 |
| ·BmN细胞差异表达基因的分离结果 | 第77-79页 |
| ·BmN细胞差异扩增片段的序列测定与分析 | 第79-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·小结 | 第85-87页 |
| 第5章 家蚕Akrin基因的克隆及表达分析 | 第87-97页 |
| ·材料与方法 | 第87-88页 |
| ·生物材料 | 第87-88页 |
| ·质粒和菌株 | 第88页 |
| ·主要仪器与设备 | 第88页 |
| ·主要试剂与配制 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-90页 |
| ·引物退火控制PCR鉴定家蚕Akirin基因 | 第88页 |
| ·家蚕Akirin基因序列分析 | 第88-89页 |
| ·家蚕Akirin基因克隆 | 第89页 |
| ·重组表达载体的构建及原核表达 | 第89-90页 |
| ·结果与分析 | 第90-95页 |
| ·家蚕Akirin基因的鉴定与序列分析 | 第90-92页 |
| ·家蚕Akirin基因的克隆和测序 | 第92-94页 |
| ·原核表达载体的构建及Akirin蛋白的诱导表达 | 第94-95页 |
| ·讨论 | 第95-96页 |
| ·小结 | 第96-97页 |
| 第6章 主要结论、创新点及后续研究展望 | 第97-99页 |
| ·主要结论 | 第97页 |
| ·创新点 | 第97-98页 |
| ·后续研究展望 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 附录 | 第115-131页 |
| 学习期间发表的论文 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
